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    鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響因素研究

    2014-01-17 11:38:19王道營張牧焓諸永志徐為民
    食品科學(xué) 2014年1期
    關(guān)鍵詞:嫩度肌動(dòng)蛋白鴨肉

    董 晗,王道營,張牧焓,諸永志,徐為民,*,劉 芳

    (1.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,江蘇 南京 210014;2.南京財(cái)經(jīng)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,江蘇 南京 210046)

    鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響因素研究

    董 晗1,2,王道營1,張牧焓1,諸永志1,徐為民1,*,劉 芳1

    (1.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,江蘇 南京 210014;2.南京財(cái)經(jīng)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,江蘇 南京 210046)

    研究可能影響鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的多種因素,包括內(nèi)部因素(AMP、IMP、ADP、ATP、Ca2+、)和外部因素(NaCl腌制、不同種類磷酸鹽腌制)。以肌動(dòng)球蛋白提取物和鴨肉為原料,主要應(yīng)用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)法進(jìn)行檢測。結(jié)果表明:在4℃條件下,經(jīng)過8、16 mmol/L的AMP、IMP處理和25~50 mmol/L處理的肌動(dòng)球蛋白,檢測到肌動(dòng)蛋白條帶濃度明顯增加;經(jīng)過8、16 mmol/L ADP處理和0.1~5.0 mmol/L Ca2+處理后的肌動(dòng)球蛋白,檢測到肌動(dòng)蛋白條帶濃度無明顯變化。腌制對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離無明顯影響。

    鴨肉;肌動(dòng)球蛋白;解離;影響因素

    鴨肉及其制品深受中國人廣泛喜愛,人們通常以肉品嫩度來評(píng)定肉制品品質(zhì)[1-4]。因此,如何改善肉制品的嫩度成為提高肉品品質(zhì)的關(guān)鍵問題。一般認(rèn)為,肉在加熱后,肉中膠原蛋白凝膠化使得肉質(zhì)變嫩[5-9];但經(jīng)過實(shí)驗(yàn)研究,加熱的另一影響是促進(jìn)了肌動(dòng)球蛋白解離[10-11]。因此推斷,肌動(dòng)球蛋白的解離能夠改善肉品嫩度,實(shí)驗(yàn)擬對(duì)鴨肉中肌動(dòng)球蛋白解離規(guī)律及影響肌動(dòng)球蛋白解離的因素進(jìn)行研究,進(jìn)而揭示肌動(dòng)球蛋白解離與嫩度的關(guān)系。

    肌動(dòng)球蛋白是肌動(dòng)蛋白與肌球蛋白發(fā)生結(jié)合后的復(fù)合物。肌動(dòng)球蛋白的聚合度不同,因此它的分子質(zhì)量也不確定。肌動(dòng)蛋白與肌球蛋白的結(jié)合比例從1∶2.5到1∶4。肌動(dòng)球蛋白的結(jié)合與解離與肌肉的收縮直接相關(guān)。肌球蛋白形狀類似“豆芽”,頭部為重酶解肌球蛋白,尾部為輕酶解肌球蛋白。肌球蛋白的頭部有ATP酶活性,可以催化ATP降解。肌動(dòng)蛋白單獨(dú)存在時(shí)為球狀分子,稱為G-肌動(dòng)蛋白,但在ATP和磷酸鹽的存在下,G-肌動(dòng)蛋白聚會(huì)成F-肌動(dòng)蛋白,后者可以與原肌球蛋白等結(jié)合生成細(xì)絲,參與肌肉的收縮過程[12]。在ATP的作用下,肌球蛋白與肌動(dòng)蛋白結(jié)合成肌動(dòng)球蛋白。

    而在成熟過程中,肉的嫩度逐漸改善,可能原因也是各種因素作用于肌動(dòng)球蛋白而使其發(fā)生解離作用。由此可見,肌動(dòng)蛋白與肌球蛋白是否結(jié)合、結(jié)合是否緊密是決定肉品嫩度的關(guān)鍵因素[13]。因此,探究影響肌動(dòng)球蛋白解離的因素成為眾多肉品科研工作者的工作重點(diǎn)。

    現(xiàn)今已經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)的可以促進(jìn)肌動(dòng)球蛋白解離的因素有IMP和AMP[14],和焦磷酸鹽與MgCl2共存的情況下[15]??赡苡绊懠?dòng)球蛋白解離的其他多種因素還未有深入發(fā)現(xiàn),因此,影響肌動(dòng)球蛋白解離的因素還有待于進(jìn)一步研究。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    鴨肉原料取自肉用麻鴨(3 kg左右),選自當(dāng)?shù)剞r(nóng)貿(mào)市場(孝陵衛(wèi)農(nóng)貿(mào)市場),隨機(jī)選取40日齡左右健康肉用麻鴨6只,按企業(yè)的工藝要求,宰殺、放血、去毛,迅速剝離兩側(cè)胸肌,放置4℃條件下過夜成熟,待用。

    抗兔骨骼肌肌動(dòng)蛋白多克隆抗體、IMP、AMP、ADP、ATP 美國Sigma公司;羊抗兔IgG、DAB顯色試劑盒 巴傲得生物科技公司;Goat anti-GAPDH 美國Genscript公司;預(yù)熱寬范圍標(biāo)準(zhǔn)蛋白 加拿大Fermentas公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    HH-8數(shù)顯恒溫水浴鍋 常州國華電器有限公司;T-25數(shù)顯勻漿機(jī) 德國IKA公司;HI-9025酸度計(jì) 意大利Hanna公司;SPX-250B-Z生化培養(yǎng)箱 上海博訊有限公司;UniCenMR冷凍離心機(jī) 德國Herolab公司;UV-6100紫外-可見光分光光度計(jì) 上海元析儀器有限公司;Mini-PROTEAN Tetra Cell電泳儀、Semi-Dry轉(zhuǎn)印儀美國Bio-Rad公司;JS-680C全自動(dòng)凝膠成像分析儀 上海培清科技有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

    實(shí)驗(yàn)共設(shè)兩組,一組以鴨胸肉肉糜提取的肌動(dòng)球蛋白為實(shí)驗(yàn)原料,驗(yàn)證影響肌動(dòng)球蛋白解離的內(nèi)部因素:IMP、AMP、ADP、ATP、CaCl2、Na3PO4;另一組以完整鴨胸肉塊為實(shí)驗(yàn)原料,驗(yàn)證影響肌動(dòng)球蛋白解離的外部因素:NaCl腌制、磷酸鹽腌制。

    1.3.2 前處理方法

    內(nèi)部因素組:準(zhǔn)確吸取0.5 mL肌動(dòng)球蛋白溶液,放入1.5 mL離心管,分別加入1 mL不同濃度的IMP、AMP、ADP、ATP、CaCl2、Na3PO4溶液,4℃條件下振蕩反應(yīng)16 h。反應(yīng)完畢后,離心分離,取0.2 mL上清液,用于十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDSPAGE)、蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)法檢測。

    外部因素組:1)NaCl腌制:取完整的鴨胸肉,分別用NaCl干腌(胸肉表面撒鹽)15 h,濕腌(100℃飽和食鹽水,冷卻至室溫后腌制)15 h,干腌3 h后濕腌12 h,濕腌3 h后干腌12 h。2)混合磷酸鹽腌制:取完整的鴨胸肉,并取3種不同的磷酸鹽(焦磷酸鈉、三聚磷酸鈉、六偏磷酸鈉)分別溶于5 mL蒸餾水中。用5 mL注射器分別向鴨胸肉注入焦磷酸鈉溶液、三聚磷酸鈉溶液、六偏磷酸鈉溶液。磷酸鹽的用量為0.4 g/100 g鴨肉,腌制24 h。注射期間進(jìn)行2~3次滾揉,以利于磷酸鹽均勻分布。

    鴨肉腌制后,提取肌動(dòng)蛋白溶液,進(jìn)行SDS-PAGE分析。

    相關(guān)溶液配制方法:IMP溶液配制:20mmol/L Tris-HCl,3 mmol/L NaN3,x mmol/L IMP(x為IMP濃度,x = 0、12、24),pH 7.2。

    AMP、ADP、ATP溶液配制:同IMP溶液。

    Na3PO4溶液配制:20 mmol/L Tris-HCl,xmmol/L Na3PO4(x為Na3PO4濃度,x = 0、7.5、15、37.5、75),pH 7.2。

    CaCl2溶液配制:20mmol/L Tris-HCl,xmmol/L CaCl2(x為CaCl2濃度,x = 0、0.15、0.3、0.75、1.5、3、7.5),pH 7.2。

    100℃飽和食鹽水:燒杯中加一定量的水,煮沸后向其中加熱NaCl固體,不停攪拌,直到有固體未溶解,且等足夠長時(shí)間仍未溶解,過濾得濾液,即為100℃飽和食鹽水。

    1.3.3 肌動(dòng)球蛋白和肌動(dòng)蛋白提取方法

    肌動(dòng)球蛋白的提取方法為,參考Okitani等[11,14]的方法,并稍作修改。具體為2 g新鮮鴨肉肉糜溶于20 mL Weber-Edsall溶液(0.6 mol/L KCl、0.04 mol/L NaHCO3、0.01 mol/L Na2CO3,pH 7.2),12 000 r/min勻漿2次(每次30 s,中間間隔10 s)。勻漿后溶液置于4℃培養(yǎng)箱內(nèi),搖床振蕩24 h。過濾后,4℃、12 000×g離心20 min,棄去上清液,沉淀溶于20 mL Weber-Edsall溶液,振蕩混勻后,4℃、12 000×g離心20 min,棄去上清液,沉淀溶于5 mL Tris-HCl緩沖溶液(20 mmol/L Tris-HCl、0.6 mmol/L KCl,pH 7.2)即得肌動(dòng)球蛋白溶液。利用考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白質(zhì)量濃度后,并調(diào)整質(zhì)量濃度為10 mg/mL,立即使用。

    肌動(dòng)蛋白的提取方法與肌動(dòng)球蛋白提取方法類似。具體為2 g新鮮鴨肉肉糜溶于20 mL Weber-Edsall溶液(0.6 mol/L KCl、0.04 mol/L NaHCO3、0.01 mol/L Na2CO3,pH 7.2),12 000 r/min勻漿2次(每次30 s,中間間隔10 s)。勻漿后溶液置于4℃培養(yǎng)箱內(nèi),搖床振蕩24 h。過濾后,用蒸餾水使KCl濃度調(diào)整到0.2 mol/L。取其中0.2 mL樣品Ⅰ(肉樣勻漿稀釋液,即為肌肉全蛋白提取液)用于電泳檢測總蛋白,剩余部分于4℃、12 000×g離心20 min,取0.2 mL樣品Ⅱ(離心上清液,即為肌動(dòng)蛋白 提取液)并加入0.4 mL上樣緩沖液制成電泳樣品。

    1.3.4 檢測方法

    采用Western blotting法檢測提取液中肌動(dòng)蛋白含量。采用變性不連續(xù)電泳,分離膠12%,濃縮膠5%(丙烯酰胺與甲叉雙丙烯酰胺質(zhì)量比為36.5∶1)。電泳分離后用半干轉(zhuǎn)膜儀將凝膠中的蛋白轉(zhuǎn)印到聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride,PVDF)上,Tris-HCl緩沖溶液+吐溫溶液(TBST溶液)漂洗(3次,每次5 min)。轉(zhuǎn)印后的PVDF膜用含有5 g/100 mL脫脂奶粉的TBST溶液(0.05%吐溫-20、50 mmol/L Tris-HCl、150 mmol/L NaCl、5 mmol/L KCl,pH 7.4)室溫封閉1 h,膜漂洗3次后與一抗(一抗為抗兔骨骼肌肌動(dòng)蛋白多克隆抗體,用含有5 g/100 mL脫脂奶粉的TBST溶液1∶1 000稀釋)結(jié)合,4℃搖床孵育過夜,然后膜漂洗3次后與二抗(二抗為辣根過氧化酶連接的羊抗兔IgG,用含有5 g/100 mL脫脂奶粉的TBST溶液1∶5 000稀釋)結(jié)合,室溫?fù)u床孵育1 h,膜漂洗后使用DAB顯色劑顯色,顯色后蒸餾水徹底沖洗停止反應(yīng),并使用凝膠成像儀拍照。實(shí)驗(yàn)選用GAPDH作為內(nèi)參蛋白。Quantity One軟件掃描蛋白免疫印跡條帶,得出光密度值用于數(shù)據(jù)分析。

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    所有圖片使用Quantity One處理分析,所有數(shù)據(jù)以表示,所得數(shù)據(jù)使用SPSS18.0進(jìn)行單因素方差分析。不同處理組間差異分析采用單因素方差分析,用Duncan’s多重比較,α = 0.05。定量分析統(tǒng)計(jì)圖使用Sigma Plot繪制。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 內(nèi)部環(huán)境影響因素

    2.1.1 IMP對(duì)鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響

    圖1 IMP 對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離影響的Western blotting轉(zhuǎn)印圖(A)和定量分析圖(B)Fig.1 Western blotting (A) and quantitative analysis (B) for the effect of IMP on actomyosin dissociation

    由圖1A可知,對(duì)照組只有微弱的肌動(dòng)蛋白條帶,在IMP的作用下,可以觀察到條帶濃度逐漸增大。由圖1B也得出相同結(jié)果,加入IMP后的肌動(dòng)蛋白含量均高于對(duì)照組,并隨著IMP濃度的增加而增加,8 mmol/L IMP處理組顯著高于對(duì)照組(P<0.05),16 mmol/L處理組顯著高于8 mmol/L組與對(duì)照組(P<0.05)。

    2.1.2 AMP對(duì)鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響

    由圖2A可知,對(duì)照組的肌動(dòng)蛋白條帶濃度很低,在AMP的作用下,可以觀察到條帶濃度逐漸增大。由圖2B也得出相同結(jié)果,加入AMP后的肌動(dòng)蛋白含量均高于對(duì)照組,并隨著AMP濃度的增加而增加,但是經(jīng)過8mmol/L AMP處理的與對(duì)照組沒有顯著差異(P>0.05),16 mmol/L處理組顯著高于8 mmol/L組與對(duì)照組(P<0.05)。

    圖2 AMP對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離影響的Western blotting轉(zhuǎn)印圖(A)和定量分析圖(B)Fig.2 Western blotting (A) and quantitative analysis (B) for the effect of AMP on actomyosin dissociation

    2.1.3 ADP對(duì)鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響

    圖3 ADP對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離影響的Western blotting轉(zhuǎn)印圖(A)和定量分析圖(B)Fig.3 Western blotting (A) and quantitative analysis (B) for the effect of ADP on actomyosin dissociation

    由圖3A可知,不同濃度ADP處理組與對(duì)照組的肌動(dòng)蛋白條帶濃度都很低,并沒有觀察出ADP對(duì)肌動(dòng)球蛋白的解離有任何影響。由圖3B也得出相同結(jié)果,加入8、16 mmol/L ADP的處理組與對(duì)照組沒有顯著差異(P>0.05)。

    2.1.4 ATP對(duì)鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響

    由圖4可知,對(duì)照組可以檢測到微弱的肌動(dòng)蛋白條帶,但經(jīng)過ATP處理的肌動(dòng)球蛋白提取液,卻檢測不到肌動(dòng)蛋白的存在。

    圖4 ATP對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離影響的Western blotting轉(zhuǎn)印圖Fig.4 Western blotting for the effect of ATP on actomyosin dissociation

    2.1.5 Na3PO4對(duì)鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響

    圖5 Na3PO4對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離影響的Western bloting轉(zhuǎn)印圖(A)和定量分析圖(B)Fig.5 Western blotting (A) and quantitative analysis (B) for the effect of Na3PO4on actomyosin dissociation

    由圖5A可知,低濃度Na3PO4處理組條帶與對(duì)照組的肌動(dòng)蛋白條帶濃度都很低,在Na3PO4濃度增加到25 mmol/L時(shí),條帶濃度開始增大。由圖5B也得出相同結(jié)果,加入25 mmol/L Na3PO4處理的溶液中肌動(dòng)蛋白含量高于對(duì)照組與低濃度的Na3PO4處理組,但與對(duì)照組無顯著差異(P>0.05),50 mmol/L處理組顯著高于對(duì)照組與低濃度處理組(P<0.05)。

    2.1.6 CaCl2對(duì)鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響

    由圖6A可知,不同濃度CaCl2處理組與對(duì)照組的肌動(dòng)蛋白條帶濃度相似,沒有明顯差別。由圖6B也得出相同結(jié)果,不同濃度CaCl2處理組與對(duì)照組中的肌動(dòng)蛋白含量無顯著差異(P>0.05)。

    圖6 CaCCl2對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離影響的SDS-PAGGEE電泳圖(A)和定量分析圖(B)Fig.6 SDS-PAGE (A) and quantitative analysis (B) for the effect of CaCl2on actomyosin dissociation

    2.2 外部環(huán)境影響因素

    2.2.1 NaCl腌制對(duì)鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響

    圖7 NaCl腌制對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離影響的SDS-PAGE電泳圖(A)和定量分析圖(B)Fig.7 SDS-PAGE (A) and quantitative analysis (B) for the effect of NaCl on actomyosin dissociation

    由圖7A可知,腌制后的鴨肉肌動(dòng)蛋白條帶濃度略高于對(duì)照組,不同腌制方法的條帶濃度沒有明顯的差別。由圖7B也得出相同結(jié)果,不同腌制方法與對(duì)照組中的肌動(dòng)蛋白含量無顯著差異(P>0.05)。

    2.2.2 磷酸鹽腌制對(duì)鴨肉肌動(dòng)球蛋白解離的影響

    由圖8A可知,不同的磷酸鹽腌制后的鴨肉,肌動(dòng)蛋白條帶濃度相似。由圖8B也可得出此結(jié)果,不同磷酸鹽腌制的鴨肉中與對(duì)照組中的肌動(dòng)蛋白含量無顯著差異(P>0.05)。

    圖8 磷酸鹽腌制對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離影響的SDS-PAGE電泳圖(A)和定量分析圖(B)Fig.8 SDS-PAGE (A) and quantitative analysis (B) for the effect of phosphates on actomyosin dissociation

    3 討 論

    3.1 影響肌動(dòng)球蛋白解離的內(nèi)部因素

    本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,鴨肉本身的內(nèi)源物質(zhì),AMP、IMP和有助于肌動(dòng)蛋白從肌動(dòng)球蛋白上解離下來。而ADP、Ca2+和ATP對(duì)肌動(dòng)球蛋白的解離沒有促進(jìn)作用,反而ATP可以促進(jìn)肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白結(jié)合生產(chǎn)肌動(dòng)球蛋白。

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在較低溫度(4℃)條件下,用8 mmol/L和16 mmol/L的IMP和AMP處理的肌動(dòng)球蛋白可以顯著的促進(jìn)其解離,IMP和AMP的濃度越大,它對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離的促進(jìn)作用就越明顯。這也與Okitani等[14]的研究結(jié)果相符,IMP和AMP是導(dǎo)致低溫貯存的骨骼肌中肌動(dòng)球蛋白可逆解離的主要因素。

    Benjakul等[15]研究發(fā)現(xiàn),焦磷酸鹽與MgCl2共同作用可以導(dǎo)致肌動(dòng)球蛋白發(fā)生自然解離,也就證明了是可以影響肌動(dòng)球蛋白解離的因素之一。但是肉中雖然含有大量的礦物質(zhì),低濃度(<25 mmol/L)的對(duì)肌動(dòng)球蛋白的解離仍然沒有促進(jìn)作用。因此可以推測,鴨肉內(nèi)源游離的可能達(dá)不到可以促進(jìn)肌動(dòng)球蛋白解離的程度,而本實(shí)驗(yàn)中的25 mmol/L和50 mmol/L的高濃度促進(jìn)了肌動(dòng)球蛋白解離,可能是由于高濃度的離子,導(dǎo)致溶液的高強(qiáng)度的作用力將肌動(dòng)蛋白從肌動(dòng)球蛋白上分離下來。

    沒有檢測出ADP和ATP對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離有促進(jìn)作用,反而在ADP存在的情況下,肌動(dòng)蛋白的含量低于對(duì)照組。由ATP處理后的肌動(dòng)球蛋白無法檢測到肌動(dòng)蛋白條帶,可以推測,在較低的溫度(4℃)條件下,肌動(dòng)球蛋白的解離是可逆的,即溶液中的肌動(dòng)蛋白與肌球蛋白在ATP的作用下重新結(jié)合生成肌動(dòng)球蛋白。

    肉成熟嫩化的機(jī)制——酶假說[16-17]與鈣理論[18-19],人們大多支持酶假說,認(rèn)為Ca2+濃度升高激活鈣蛋白酶而改善了肉的嫩度,而Takahashi等[19-20]研究發(fā)現(xiàn),在鈣蛋白酶不發(fā)揮作用的情況下,肌肉中Z盤的弱化就是Ca2+的作用。但是本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示,不同濃度的Ca2+對(duì)提取出來的肌動(dòng)球蛋白解離沒有影響。這與鈣理論并不相符。

    3.2 影響肌動(dòng)球蛋白解離的外部因素

    南京鹽水鴨以其肉質(zhì)軟嫩而聞名,其制作過程的主要步驟之一就是用食鹽腌制,因此要考慮NaCl的腌制是否對(duì)肉的嫩度有影響。楊勇等[21]研究發(fā)現(xiàn),各種鹽和酶都是具有嫩化效果的,焦磷酸鈉的嫩化效果是最好的。Benjakul等[15]研究發(fā)現(xiàn),添加焦磷酸鹽與MgCl2可以引起肌動(dòng)球蛋白發(fā)生自然解離。孫衛(wèi)青等[22]也比較了混合磷酸鹽在鴨肉中的應(yīng)用,并得到一定嫩度改善結(jié)果。因此NaCl與多種磷酸鹽對(duì)肉品的腌制是否影響肌動(dòng)球蛋白解離有待研究。

    但是實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,NaCl腌制與磷酸鹽腌制對(duì)鴨胸肉肌動(dòng)球蛋白解離均沒有產(chǎn)生影響。最主要原因可能因?yàn)橥暾镍喰厝馐峭暾捏w系,而鹽溶液不能夠破壞肌纖維,更不能影響到肌肉的內(nèi)部蛋白,即無法影響肌動(dòng)球蛋白的解離。

    4 結(jié) 論

    本實(shí)驗(yàn)對(duì)鴨肉中影響肌動(dòng)球蛋白解離的多種因素進(jìn)行研究,結(jié)果表明,IMP、AMP、高濃度對(duì)肌動(dòng)球蛋白的解離有促進(jìn)作用,但ADP、Ca2+、ATP、腌制對(duì)肌動(dòng)球蛋白解離沒有明顯影響。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出,影響肌動(dòng)球蛋白解離的小分子內(nèi)部因素并不多,由此需要從另一角度進(jìn)行更深入的研究,包括構(gòu)成肌纖維的多種相關(guān)蛋白質(zhì)和鴨肉內(nèi)部的多種內(nèi)源酶。這一研究成果將為今后建立肌動(dòng)球蛋白解離的調(diào)控程序,探究肌動(dòng)球蛋白解離與鴨肉嫩度之間的關(guān)系提供參考依據(jù)。

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    Factors Influencing the Dissociation of Duck Breast Muscle Actomyosin

    DONG Han1,2, WANG Dao-ying1, ZHANG Mu-han1, ZHU Yong-zhi1, XU Wei-min1,*, LIU Fang1
    (1. Institute of Agricultural Products Processing, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China; 2. College of Food Science and Engineering, Nanjing University of Finance and Economics, Nanjing 210046, China)

    This study illustrated multiple potential factors infl uencing actomyosin dissociation, including internal factors (AMP, IMP, ADP, ATP, Ca2+, andand external factors (marinated with NaCl or with different phosphate salts). Actomyosin was extracted from duck breast muscle and the protein composition was examined by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and western-blot analysis. Results: The density of actin bands was increased signifi cantly when the actomyosin was treated with 8, 16 mmol/L AMP or IMP or with 25–50 mmol/Lat 4 ℃, whereas treatment with 8, 16 mmol/L ADP or with 0.1–5 mmol/L Ca2+did not result in a signifi cant change in actin band densities. These results suggest that marinating duck muscle with different salts has no signifi cant effects on actomyosin dissociation.

    duck; actomyosin; dissociation; affecting factors

    TS251.68

    A

    1002-6630(2014)01-0023-06

    10.7506/spkx1002-6630-201401005

    2012-11-15

    國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31101312);江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新基金項(xiàng)目(CX(12)3082)

    董晗(1987—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)槭称房茖W(xué)。E-mail:handong.2567@yahoo.com.cn

    *通信作者:徐為民(1969—),男,研究員,博士,研究方向?yàn)槿馄芳庸づc質(zhì)量控制。E-mail:weiminxu2002@yahoo.com.cn

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