土鱉蟲凍干粉對(duì)高脂飲食肉兔血脂的影響

白秀娟，任慧君，羅哲容，王慧，趙志壯，冷雪冰

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，哈爾濱 150030；3.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，長春 130118）

土鱉蟲凍干粉對(duì)高脂飲食肉兔血脂的影響

白秀娟1，任慧君2，羅哲容2，王慧1，趙志壯1，冷雪冰3

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，哈爾濱 150030；3.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，長春 130118）

為研究土鱉蟲凍干粉對(duì)高脂飲食肉兔血脂生理指標(biāo)的影響，選擇健康的150只肉兔隨機(jī)分成5組，即空白組、高脂組和三個(gè)不同劑量組（0.4、0.2、0.1 g·kg-1土鱉蟲凍干粉），每20 d每組隨機(jī)抽取5只肉兔心臟靜脈血，分離血清，用于測量血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量。結(jié)果表明，高脂組血脂水平顯著高于空白組（P＜0.05）；高劑量組和低劑量組TC、TG顯著高于空白組（P＜0.05），與高脂組差異不顯著（P＞0.05）；高、中、低劑量組LDL-C均顯著高于空白組和高脂組（P＜0.05）；中劑量組TC、TG、LDL-C水平顯著低于高脂組（P＜0.05），與空白組差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)果顯示，土鱉蟲凍干粉可抑制高脂飲食肉兔血脂水平升高，具有調(diào)節(jié)血脂作用。中劑量組（0.2 g·kg-1）為最佳劑量。

土鱉蟲；凍干粉；肉兔；血脂；高脂飼料

土鱉蟲別名地鱉蟲、土元等，動(dòng)物分類為節(jié)肢動(dòng)物門昆蟲綱鱉蠊科（Corydi-idae）昆蟲地鱉（Eupolyphaga sinensisWalker）或冀地鱉（Steleopha?ga plancyiBoleny），以其雌蟲干燥體入藥，味咸，性寒；有小毒；歸肝經(jīng)。具有逐瘀、破積、通絡(luò)、消腫止痛等功效[1]。付英杰等研究表明，土鱉蟲中含氨基酸、揮發(fā)油、脂肪酸、生物堿和脂溶性維生素等化學(xué)成分[2]。田軍鵬等藥理研究發(fā)現(xiàn)，土鱉蟲有調(diào)節(jié)血脂、抗凝血、抗血栓、抗腫瘤等作用[3]。

傳統(tǒng)炮制方法主要有凈制法、炒制法、酒制法、酥油制法、鹽水燙制法、土制法和烘焙法等[4]，但這些炮制方法破壞藥物原始性狀，在炮制過程中造成藥物氧化和污染。凍干粉是在無菌環(huán)境下將藥物冷凍成固態(tài)，抽真空將水分升華干燥而成的無菌粉，與其他炮制方法比，保持藥物原始性狀及結(jié)構(gòu)，防氧化，提高藥物純度。所以本試驗(yàn)將新鮮土鱉蟲制成土鱉蟲凍干粉，研究土鱉蟲對(duì)高血脂的預(yù)防和保健作用，為土鱉蟲開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

選擇三月齡平均體（2.00±0.20）kg的健康雄性伊拉肉兔150只，隨機(jī)分成5組，每組30只，分別為空白組：飼喂普通基礎(chǔ)顆粒料；高脂組：飼喂高脂飼料；高劑量組：高脂飼料+土鱉蟲凍干粉0.4 g·kg-1（兔每千克體質(zhì)量喂0.4 g土鱉蟲凍干粉，下同）；中劑量組：高脂飼料+土鱉蟲凍干粉為0.2 g·kg-1；低劑量組：高脂飼料+土鱉蟲凍干粉為0.1 g·kg-1。單籠飼養(yǎng)，自由采水，根據(jù)適應(yīng)期采食情況規(guī)定每只每日限食量，連續(xù)喂養(yǎng)40 d。

1.2 試驗(yàn)飼料

購進(jìn)家兔普通基礎(chǔ)顆粒飼料。高脂飼料配比為：0.5%膽固醇，10%豬油，9.5%蛋黃粉，80%普通飼料?；钔流M蟲，購自山東臨沂，由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院白秀娟教授鑒定，清理干凈體表雜質(zhì)后用凍干機(jī)進(jìn)行粉末凍干，取出收集，密封后放入4℃冰箱保存?zhèn)溆?。含藥高脂飼料?%土鱉蟲凍干粉+99%高脂飼料粉，混勻后制成顆粒料（即100 g高脂飼料中含土鱉蟲凍干粉1 g）。根據(jù)藥量計(jì)算后飼喂高、中、低劑量組，待食完后給與高脂飼料補(bǔ)充至規(guī)定食量。每10 d稱體重1次調(diào)整含藥高脂飼料的飼喂量。

1.3 試劑和儀器

1.5mL離心管、5 mL注射器、采血管，均購自哈爾濱伊事達(dá)生物工程有限公司；TGL-16GA型高速離心機(jī)，微量移液器，F(xiàn)D-8型凍干機(jī)，PL2002型電子天平，飼料制粒機(jī)，均由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物遺傳實(shí)驗(yàn)室提供。

1.4 指標(biāo)檢測

試驗(yàn)開始前1 d晚上禁食不禁水，約12 h后（使肉兔空腹）隨機(jī)抽取5只肉兔心臟靜脈血4～5 mL，靜置至析出血清，分離出血清到新的離心管，3 000 r·min-1離心10 min，取出后微量移液器抽取上層透明血清1 000 μL至新的離心管。試驗(yàn)開始前1 d（記為第0天，下同）、第20天和第40天肉兔心臟靜脈采血，40 d共計(jì)采集血清3次。編號(hào)后送到吉化總醫(yī)院檢驗(yàn)科，全自動(dòng)生化分析儀測量血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用Excel 2003初步統(tǒng)計(jì)，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，進(jìn)行顯著性分析。采用單因素ANOVA，Duncan′s多重比較，計(jì)量資料以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 總膽固醇

土鱉蟲凍干粉對(duì)肉兔血脂TC的影響見表1。結(jié)果可知，第0天（試驗(yàn)前1 d，下同），各組TC含量差異均不顯著（P＞0.05）。第20天，高脂組和高、中、低劑量組TC含量均有所升高，但各組TC含量差異均不顯著（P＞0.05），說明在這一時(shí)期，土鱉蟲凍干粉作用效果不明顯。第40天，高脂組TC含量顯著高于空白組（P＜0.05），說明本試驗(yàn)高脂飼料可以顯著升高肉兔血脂TC水平；高、低劑量TC含量顯著高于空白組（P＜0.05），與高脂組差異不顯著（P＞0.05）；中劑量組與空白組差異不顯著（P＞0.05），而顯著低于高脂組、高劑量組和低劑量組（P＜0.05）。說明土鱉蟲凍干粉可抑制由高脂飲食引起TC水平升高，其中，中劑量組有顯著效果。

表1 土鱉蟲凍干粉對(duì)肉兔血脂TC的影響Table 1 Effects of eupolyphaga freeze-dried powder on TC of rabbits (mmol·L-1)

2.2 甘油三酯

土鱉蟲凍干粉對(duì)肉兔血脂TG的影響見表2。結(jié)果可知，第0天，各組TG含量差異均不顯著（P＞0.05）。第20天，各組TG含量差異均不顯著（P＞0.05），但高脂組和高、中、低劑量組TG含量升高，且均高于空白組，高、中、低劑量組均低于高脂組，推測土鱉蟲凍干粉抑制由高脂飲食引起的肉兔血脂TG上升速度。第40天，高脂組TG含量顯著高于空白組（P＜0.05），說明本試驗(yàn)高脂飼料可顯著升高肉兔血脂TG水平；高、低劑量組與空白組和高脂組差異均不顯著（P＞0.05）；中劑量組與空白組比差異不顯著（P＞0.05），顯著低于高脂組（P＜0.05）。說明高、中、低劑量組均能抑制TG水平升高，但只有中劑量組效果顯著。

表2 土鱉蟲凍干粉對(duì)肉兔血脂TG的影響Table 2 Effects of eupolyphaga freeze-dried powder on TG of rabbits (mmol·L-1)

2.3 高密度脂蛋白膽固醇

土鱉蟲凍干粉對(duì)肉兔血脂HDL-C的影響見表3。由結(jié)果可知，第0天，各組HDL-C含量差異均不顯著（P＞0.05）。第20天，高脂組HDL-C含量有所降低，高、中、低劑量組有所升高，但各組含量差異均不顯著（P＞0.05）。第40天，高脂組HDL-C含量有所降低，但與空白組差異不顯著（P＞0.05）。高、中、低劑量組均顯著高于空白組和高脂組（P＜0.05），說明土鱉蟲凍干粉能顯著升高血脂HDL-C水平。

2.4 低密度脂蛋白膽固醇

土鱉蟲凍干粉對(duì)肉兔血脂LDL-C的影響見表4。由結(jié)果可知，第0天，各組LDL-C含量差異均不顯著（P＞0.05）。第20天，高脂組和高、中、低劑量組LDL-C含量均有所升高，但各組差異均不顯著（P＞0.05）。第40天，高脂組顯著高于空白組（P＜0.05），說明高脂飼料使肉兔血脂LDL-C水平顯著升高。高、中、低劑量組均與空白組差異不顯著（P＞0.05），均顯著低于高脂組（P＜0.05），說明，土鱉蟲凍干粉能顯著抑制因高脂飲食引起的血脂LDL-C水平升高，中劑量組顯著低于低劑量組（P＜0.05），說明中劑量組抑制效果最顯著。

表3 土鱉蟲凍干粉對(duì)肉兔血脂HDL-C的影響Table 3 Effect of eupolyphaga freeze-dried powder on HDL-C of rabbits (mmol·L-1)

表4 土鱉蟲凍干粉對(duì)肉兔血脂LDL-C的影響Table 4 Effect of eupolyphaga freeze-dried powder on LDL-C of rabbits (mmol·L-1)

3 討論與結(jié)論

本試驗(yàn)第40天，高脂組血脂TC、TG、LDL-C水平顯著高于空白組，證明本試驗(yàn)高脂飼料能升高家兔血脂TC、TG、LDL-C水平。本試驗(yàn)高脂飼料降低血脂HDL-C作用不明顯，推測與高脂飼料配方有關(guān)，有待進(jìn)一步研究[5-6]。

土鱉蟲具有調(diào)理血脂作用。于燕等發(fā)現(xiàn)土鱉蟲水提液能顯著降低血清中TC、TG和LDL-C含量[7]，升高HDL-C含量，具有量效關(guān)系，證明土鱉蟲對(duì)血脂具有調(diào)節(jié)作用，與本文中劑量組試驗(yàn)結(jié)果一致。于燕等還發(fā)現(xiàn)土鱉蟲水提液有調(diào)整脂質(zhì)代謝、抗脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、維持NO/ET（一氧化氮/內(nèi)皮素）平衡、保護(hù)血管內(nèi)皮，減少內(nèi)皮素（ET）的合成與釋放等功效[8]。土鱉蟲凍干粉是否具有以上功能和功效有待進(jìn)一步研究證實(shí)。王玉明等研究發(fā)現(xiàn)，土鱉蟲可降低高血脂小鼠血液中TC、TG、LDL-C含量，提高血液HDL-C水平，降低動(dòng)脈硬化指數(shù)，可能會(huì)對(duì)由高血脂引發(fā)的動(dòng)脈粥樣硬化和高脂肪飲食造成的脂肪肝具有一定預(yù)防和治療作用[9-10]。王征等發(fā)現(xiàn)土鱉蟲提取物可明顯降低高脂血癥大鼠體質(zhì)量、TC、TG、LDL-C水平、肝臟脂肪含量，能提高HDL-C水平，并能明顯抑制高脂血癥大鼠胰脂肪酶活性，對(duì)高脂血癥大鼠具有明顯降脂作用[1]。由本試驗(yàn)結(jié)果可知，土鱉蟲凍干粉高劑量組和低劑量組可以抑制因高脂飲食所致的血清TC、TG水平升高，但作用效果不顯著（P＞0.05）。高劑量組和低劑量組可以顯著抑制LDL-C水平的升高（P＜0.05），升高血脂HDL-C水平效果顯著（P＜0.05）；中劑量組在第40天可以有效抑制高脂飲食肉兔TC、TG、LDL-C水平的升高，且作用效果顯著（P＜0.05）。中劑量組也可以顯著升高血脂HDL-C水平（P＜0.05）。說明土鱉蟲凍干粉可以抑制高脂飲食肉兔TC、TG、LDL-C水平，升高HDL-C作用明顯，且中劑量組降低血脂TC、TG、LDL-C水平的作用具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？梢?，土鱉蟲凍干粉預(yù)防性給藥能降低因高脂飲食而造成的血脂水平升高，具有一定的調(diào)脂作用。基于試驗(yàn)結(jié)果和用藥成本的綜合考慮，選取中劑量組（0.2 g·kg-1）為預(yù)防由高脂飲食引起的血脂升高的最佳劑量[11]。

本試驗(yàn)提供不同劑量土鱉蟲凍干粉在不同時(shí)期對(duì)肉兔血脂中TC、TG、LDL-C、HDL-C含量的影響，可為研究土鱉蟲凍干粉的作用機(jī)理提供依據(jù)。本試驗(yàn)高脂組TC、TG、LDL-C血脂水平與空白組差異顯著（P＜0.05），為研究建立兔子高脂血癥模型提供參考。

有關(guān)土鱉蟲調(diào)節(jié)血脂作用機(jī)理研究較少，王鳳霞等報(bào)道土鱉蟲調(diào)節(jié)血脂的作用機(jī)理可能是土鱉蟲中的一種脂肪酸—亞油酸，降低血清TC水平[12]；土鱉蟲提取物可抑制胰脂肪酶活性，也很可能是其降血脂作用機(jī)理之一[1]；土鱉蟲粉能降低肝臟TG含量，這可能與其減少肝中TG合成或增加TG轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)，土鱉蟲粉改善全血粘度作用為其調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝機(jī)理之一[13]。土鱉蟲調(diào)節(jié)血脂水平的有效成分和分子機(jī)理有待深入研究。

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Effect of eupolyphaga freeze-dried powder on the blood lipid of rabbit fed with high-fat diet

BAI Xiujuan1,REN Huijun2,LUO Zherong2,WANG Hui1,ZHAO Zhizhuang1,LENG Xuebing3>
(1.School of Animal Science and Technology,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China;2.School of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China;3.School of Traditional Chinese Medicine,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China)

To study the effects of eupolyphaga freeze-dried powder on blood lipids physiological indices in rabbits with high-fat diet.Total 150 rabbits were selected and randomly divided into five groups,control group,high-fat group and three different dosage eupolyphaga groups(0.4,0.2,0.1 g·kg-1eupolyphaga freeze-dried powder).Every 20 d,each group of randomly selected five rabbits to draw cardiac venous blood,separation of serum,used to measure the serum's total cholesterol(TC),triglyceride(TG),high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C),low density lipoprotein cholesterol(LDL-C)levels.The results showed that the blood lipid of high-fat group was abnormal,compared with control group,the levels were significantly increased(P＜0.05);Compared with control group,the levels of TC,TG in high group and low group were significantly increased(P＜0.05),no significant differences(P＞0.05)were observed between high group,low group and high-fat group.Compared with control group and high-fat group,the levels of LDL-C in high group,medi-um group and low group were significantly increased(P＜0.05);Compared with high-fat group,TC,TG, LDL-C of medium group were significantly reduced(P＜0.05).No significant differences(P＞0.05)were observed between the medium group and control group.Results showed that theEupolyphagaFreeze-dried powder can inhibit the rise of the blood lipid of rabbit fed with high-fat diet and regulate blood lipid.The results showed that eupolyphaga freeze-dried powder could inhibit the rise of the blood lipid of rabbit fed with high-fat diet,could regulate blood lipid.Medium group(0.2 g·kg-1)was the best dosage.

eupolyphaga;freeze-dried powder;rabbit;blood lipid;high-fat diet

Q959.9

A

1005-9369（2014）11-0071-05

2014-01-06

黑龍江省畜禽良種化工程項(xiàng)目（213122）

白秀娟（1963-），女，教授，博士，研究方向?yàn)榻?jīng)濟(jì)動(dòng)物繁殖與育種。E-mail:bxj630306@163.com

時(shí)間2014-11-21 16:27:00[URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20141121.1627.001.html

白秀娟,任慧君,羅哲容,等.土鱉蟲凍干粉對(duì)高脂飲食肉兔血脂的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2014,45(11):71-75.

Bai Xiujuan,Ren Huijun,Luo Zherong,et al.Effect of eupolyphaga freeze-dried powder on the blood lipid of rabbit fed with high-fat diet[J].Journal of Northeast Agricultural University,2014,45(11):71-75.(in Chinese with English abstract)