洛氏（Phoxinus lagowsrii）胚胎及仔魚發(fā)育研究

牟振波，徐革鋒,2，劉 洋，李永發(fā)

（1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，哈爾濱 150070；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030）

牟振波1，徐革鋒1,2，劉 洋1，李永發(fā)1

（1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，哈爾濱 150070；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030）

通過顯微照相系統(tǒng)對洛氏胚胎及仔魚發(fā)育進(jìn)行觀察，較為詳細(xì)描述洛氏早期個體發(fā)育模式。結(jié)果表明，在水溫為14.0～14.5℃條件下，洛氏受精卵完成胚胎期發(fā)育所需有效積溫為2 005.02℃·h，整個胚胎發(fā)育過程可分4個階段，18個發(fā)育分期。洛氏卵裂前、卵裂、囊胚和器官形成4個階段分別歷時2.5、5.5、24和122 h。剛破膜的仔魚不具游泳能力，全身透明，體循環(huán)清晰可見；4 d后卵黃囊期仔魚口裂明顯，頭頂部和背部開始沉積黑色素；10 d后，仔魚開始上浮，卵黃囊基本吸收完全，仔魚具有游泳能力，鰭條開始不斷分化；上浮15 d后仔魚軀干呈半透明特征，黑色斑點(diǎn)在頭頂部和背部大量沉積，胸鰭、背鰭與臀鰭基本分化完畢。

洛氏；胚胎發(fā)育；仔魚

1 材料與方法

1.1 受精卵和孵化條件

1.2 采樣設(shè)計(jì)與觀察方法

受精卵在受精24 h以內(nèi)，每0.5 h采樣1次；24～48 h，每1 h采樣1次；48～72 h，每2 h采樣1次；72～98 h，每6 h采樣1次；98～326 h，每12 h采樣1次；326～542 h，每24 h采樣1次；每次采樣數(shù)量為15～30粒（或尾），并將受精卵（或仔魚）進(jìn)行Bouin′s液固定，固定7 d后，將樣品移入75%酒精中，置于4℃暫存，胚胎通過剝?nèi)ヂ涯みM(jìn)行觀察；仔魚階段直接采用顯微照像方法觀察。在Motic K-700 L型體視顯微鏡下觀察胚胎發(fā)育和仔魚期形態(tài)特征，并記錄；同時使用Motic Imales Plus 3.0ML成像系統(tǒng)進(jìn)行拍照并測定受精卵直徑及仔魚形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)，整理發(fā)育時序圖。

1.3 有效積溫計(jì)算

生物體完成某一發(fā)育階段所需的總熱量接近一個常數(shù)或者是近似一個單位時間（天數(shù)或小時數(shù)）與溫度（℃）的乘積為有效積溫[2]。本文借鑒王妍妍等方法[3]，將有效積溫表示為：K=T·N。式中，T為發(fā)育期間平均水溫（℃）；N為完成某階段發(fā)育所需時間（h）；K即為生物完成某階段發(fā)育所需有效積溫（℃·h）。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

使用SPSS 11.0對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以算術(shù)平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（X±SD）表示，使用Motic Imales Plus 3.0成像系統(tǒng)和Photoshop 7.0制作圖版。

2 結(jié)果與分析

2.1 胚胎發(fā)育

表1洛氏的胚胎發(fā)育時序Table 1 Embryonic development of Phoxinus lagowsrii

表1洛氏的胚胎發(fā)育時序Table 1 Embryonic development of Phoxinus lagowsrii

各發(fā)育期時序圖見圖版Ⅰ。

圖版I洛氏胚胎發(fā)育時序Plate I Development of embryo of Phoxinus lagowsrii

2.1.1 卵裂前期

2.1.2 卵裂期

2.1.3 囊胚期

2.1.4 器官發(fā)生期

2.2 仔魚形態(tài)

2.2.1 破膜期仔魚形態(tài)

2.2.2 卵黃囊期仔魚形態(tài)

2.2.3 上浮期仔魚形態(tài)

圖版Ⅱ 洛氏仔魚形態(tài)發(fā)育變化PlateⅡ Morphological development of larval Phoxinus lagowsrii

3 討論與結(jié)論

水輪發(fā)電機(jī)組狀態(tài)監(jiān)測系統(tǒng)具有實(shí)時性和高速性。操作人員利用計(jì)算機(jī)相關(guān)技術(shù)，采用人機(jī)聯(lián)系設(shè)備，對機(jī)組運(yùn)行狀態(tài)進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測，在控制指令發(fā)出后往往能在3s左右得到響應(yīng)。機(jī)組運(yùn)行狀態(tài)變化時，計(jì)算機(jī)系統(tǒng)可以以最快的速度對其進(jìn)行顯示和記錄，加上該過程有大量的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，要求該系統(tǒng)具有足夠快的響應(yīng)速度。

3.3 不同時期仔魚形態(tài)特征

破膜期仔魚頭部比例并不大，尾干伸展，卵黃囊呈長帶狀，初孵仔魚保持平躺姿勢，活動能力弱，體循環(huán)清晰可見。洛氏卵黃囊形狀與丁[10]、鯉魚[11]和蛇句[17]等廣溫性魚類形似，與冷水性魚類球狀卵黃囊不同，如哲羅鮭[4]、細(xì)鱗鮭[9]、亞東鮭[13]和虹鱒[16]等。這可能與仔魚內(nèi)源性營養(yǎng)模式不同有關(guān)，因?yàn)槔渌贼~類仔魚早期發(fā)育緩慢，需大量內(nèi)源性營養(yǎng)物質(zhì)，球狀卵黃囊可攜帶更多卵黃物質(zhì)，而廣溫性魚類因其發(fā)育速度較快，內(nèi)源性營養(yǎng)階段短暫，形成適應(yīng)性長帶狀卵黃囊。洛氏上浮期仔魚眼睛比例較大，腹腔較小，鰭條基本發(fā)育完畢，背部及身體兩側(cè)沉積大量黑斑點(diǎn)，這與哲羅鮭[4]和細(xì)鱗鮭[9]等魚類稚魚階段幼鮭斑出現(xiàn)類似，但洛氏無大面積斑點(diǎn)出現(xiàn)，只在背部開始黑色素沉積。

3.4 胚胎發(fā)育與水溫關(guān)系

魚類胚胎發(fā)育與水溫密切相關(guān)，在適宜水溫范圍內(nèi)，水溫越高，胚胎發(fā)育越快，孵化時間越短；相反，當(dāng)水溫到達(dá)或超過上、下限時，魚卵就會停止發(fā)育、產(chǎn)生畸形或死亡[10]。在水溫為14.0～14.3℃條件下，洛氏受精卵歷時158 h孵出，所需有效積溫為2 005.02℃·h。洛氏胚胎發(fā)育較快，有效積溫遠(yuǎn)低于鮭科魚類哲羅鮭（6 274.70℃·h）[4]、細(xì)鱗鮭（5 244.90℃·h）[9]、亞東鮭（339.7～447.2℃·d）[13]和虹鱒（328.12℃·d）[16]等冷水性魚類，但遠(yuǎn)高于鯉魚（1 078.55℃·h）[11]、蛇句（53.9℃·d）[17]、鄱陽湖黃顙魚（Pseudobagrus fulvi?draco）（62.16℃·d）[19]和黑脊倒刺鲃（49.96℃·d）[20]等魚類發(fā)育積溫。樓允東認(rèn)為，卵生魚類胚胎期長短與其卵子性質(zhì)、發(fā)育水溫有關(guān)[21]。冷水性魚類（或寡質(zhì)卵）胚胎發(fā)育時間長于溫水性魚類（或富質(zhì)卵）發(fā)育時間，器官發(fā)生早晚程度也與其胚胎期長短有關(guān)。洛氏屬于廣溫偏冷水性魚類，因此其胚胎發(fā)育速度介于冷水性魚類和溫水性魚類間，在適溫范圍內(nèi)洛氏屬于非典型魚類胚胎發(fā)育模式，其器官形成與分化與其他魚類基本相似，除部分鰭條在胚后形成，其他主要器官均在胚胎時期分化完畢。

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Study on embryos and larval ofPhoxinus lagowsriiDybowski/MOU

Zhenbo1,XU Gefeng1,2,LIU Yang1,LI Yongfa1(1.Heilongjiang Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Harbin 150070,China;2.School of Animal Sciences and Technology, NortheastAgricultural University,Harbin 150030,China)

The early ontogenetic development ofPhoxinus lagowsriiwas observed by microscope, and the early developmental mode of this species was described.The results showed that the effective accumulative day temperature was 2 005.02℃·h from fertilization to hatching at 14.0-14.5℃.The development included 4 stages,18 periods.It took 2.5,5.5,24 and 122 h to the stages of prior to cell division,cell division,blastula,organogenesis,respectively.The hatching larvae could not swim,of which the bodies were diaphanous,and systemic circulation was clear.After 4 d,mouth cleft of yolk sac larva was clear,of which the top of head and belly began to be buff.After 10 d,larva could swim,of which the yolk sac was absorbed completely,fin and scale began to differentiate uninterruptedly.After floating 15 d,the body of larval was semitransparent,black spots sediment in head and back.Pectoral fin,dorsal fin and anal fin developed completely.

Phoxinus lagowsrii;development of embryos;larva

S917.4；Q954.3

A

1005-9369（2014）07-0098-06

時間2014-7-7 8:58:09 [URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20140707.0858.024.html

Mou Zhenbo,Xu Gefeng,Liu Yang,et al.Study on embryos and larval ofPhoxinus lagowsriiDybowski[J].Journal of Northeast Agricultural University,2014,45(7):98-103.(in Chinese with English abstract)

2013-10-16

“十二五”農(nóng)村領(lǐng)域國家科技計(jì)劃（2012BAD26B05）；黑水研基本科研專項(xiàng)（HSY201312）

牟振波（1961-），男，研究員，研究方向?yàn)槔渌贼~類養(yǎng)殖、增殖。E-mail:mouzhenbo@163.com