復(fù)方戊二醛消毒劑對雞常見病原菌的殺滅效果

[摘 要] 研究戊二醛和季銨鹽復(fù)合消毒劑對雞常見金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的殺滅效果。用PBS液和有機(jī)物的溶液（5%雞糞和10%小牛血清）分別將兩種細(xì)菌稀釋成5×106CFU/ml細(xì)菌懸液，分別加到不同消毒劑中作用不同時(shí)間進(jìn)行計(jì)數(shù)[1]。結(jié)果：1：500稀釋的該消毒劑作用10分鐘對大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌殺滅率均為100%，有機(jī)物的存在不影響其殺菌效果。

[關(guān)鍵詞] 復(fù)方戊二醛消毒劑 細(xì)菌 消毒

[中圖分類號] S831 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1003-1650 （2013）08-0186-01

一、材料與方法

1.受試細(xì)菌

金黃色葡萄球菌 （購自中監(jiān)所）；大腸埃希氏菌O78（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物室提供）。

2.化學(xué)藥品及試劑

復(fù)方戊二醛消毒劑（含5%戊二醛和5%雙鏈季銨鹽）；中和劑為1%甘氨酸和3%吐溫-80；培養(yǎng)基有營養(yǎng)瓊脂、馬丁肉湯；0.03M磷酸鹽緩沖液。

3.標(biāo)準(zhǔn)硬水

硬度為3.42×10-2（無水氯化鈣0.304g，氯化鎂0.139g，蒸餾水1000ml，121℃滅菌15分鐘）。

4. 5%雞糞水溶液

新鮮雞糞5g溶于標(biāo)準(zhǔn)硬水100ml中，棄去沉淀，滅菌備用[2]。

5. 10%血清水溶液，90ml標(biāo)準(zhǔn)硬水中加入10ml小牛血清[3]

6.受試菌傳代和稀釋

將受試菌傳至第6代，用PBS液稀釋成含菌5×106CFU/ml。

7.消毒液稀釋

消毒劑用滅菌蒸餾水按1：500、1：700、1：1000稀釋成不同濃度，分裝試管，每管4.5ml。

8.殺菌試驗(yàn)

向不同濃度消毒劑中分別加入受試菌液0.5ml，混勻，于20℃水浴中作用10、30、60分鐘，各吸取0.5ml，加入4.5ml用馬丁肉湯稀釋的中和劑中，混勻。作用10分鐘后，用平板法作細(xì)菌計(jì)數(shù)。同時(shí)設(shè)PBS對照組。然后按以下公式計(jì)算殺菌率[4]。試驗(yàn)重復(fù)6次。

殺菌率（pt）=[（n0-nt）/n0]×100%

式中n0為對照組活菌數(shù)，nt為消毒后試驗(yàn)組活菌數(shù)。

9.有機(jī)物干擾試驗(yàn)

以5%雞糞水溶液或10%小牛血清水溶液代替PBS液稀釋細(xì)菌，然后分別與不同濃度的消毒劑作用10分鐘和30分鐘，觀察消毒劑作用效果，試驗(yàn)重復(fù)3次[5]。

10.結(jié)果判定方法

消毒劑對細(xì)菌的殺菌效果是否有效以殺菌率是否達(dá)到99.9%以上的消毒劑的最高有效稀釋倍數(shù)作為判定標(biāo)準(zhǔn)[6]。

二、結(jié)果

1.復(fù)方戊二醛消毒劑對雞大腸埃希氏菌或金黃色葡萄球菌兩種細(xì)菌的殺滅效果（分別見表1-3，表1-4）。

由表1-3和表1-4可見，該消毒劑1：500稀釋10分鐘能有效殺滅雞大腸埃希氏菌，1：700稀釋作用10分鐘能有效殺滅雞金黃色葡萄球菌。

在有機(jī)物存在時(shí)復(fù)方戊二醛消毒劑仍具有良好的消毒效果，1：500稀釋作用10分鐘即可完全殺滅大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌，但高稀釋度下有機(jī)物對其殺菌作用有明顯影響。

三、討論

1.本研究所采用中和劑能在消毒劑作用結(jié)束時(shí)很好地中和消毒劑，并且不影響檢測時(shí)的細(xì)菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。

2.戊二醛與季銨鹽均為常用消毒劑，二者在單獨(dú)使用時(shí)，皆易受到微生物種類、使用濃度、環(huán)境有機(jī)物等因素影響，二者復(fù)方的復(fù)合物在1：700稀釋能在10分鐘內(nèi)有效殺滅雞金黃色葡萄球菌，1：500稀釋作用10分鐘能有效殺滅雞大腸埃希氏菌；從總體情況來看，有機(jī)物的存在并不影響其殺菌效果。

四、結(jié)論

復(fù)方戊二醛消毒劑殺菌作用快速、效果可靠，有推廣應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]王洪林，顧健，王小萍.CDS-型臭氧水處理塔殺菌效果觀察[J].中國消毒學(xué)雜志，1995，12：175.

[2]傅先強(qiáng)，劉占軍.養(yǎng)禽場禽病檢驗(yàn)手冊[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，1992，130-133.

[3]高東旗.季銨鹽類消毒劑復(fù)方的應(yīng)用[J].中國消毒學(xué)雜志，1993，10（4）：224.

[4]農(nóng)業(yè)部獸藥審評委員會.獸藥試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范匯編[S].2001，30-47.

[5]李綏晶，王莉.復(fù)方戊二醛消毒劑殺菌效果的試驗(yàn)觀察[J].中國消毒學(xué)雜志，2003，10（3）：125.

作者簡介：郭紅霞，（1980年11月-），女，助理獸醫(yī)師，河津市畜牧獸醫(yī)局。