淺談顯色培養(yǎng)基檢測(cè)沙門氏菌的認(rèn)識(shí)與體會(huì)

【摘 要】目的：總結(jié)本人在顯色培養(yǎng)基檢測(cè)沙門氏菌方面一些初步認(rèn)識(shí)與體會(huì)；方法：通過查閱相關(guān)資料和本人在檢驗(yàn)實(shí)踐中的體會(huì)，進(jìn)行分析；結(jié)果：沙門氏菌顯色培養(yǎng)基種類、應(yīng)用比對(duì)研究現(xiàn)狀、注意事項(xiàng)等；結(jié)論：以供其他技術(shù)人員參考。

【關(guān)鍵詞】顯色培養(yǎng)基；沙門氏菌；認(rèn)識(shí)與體會(huì)

【中圖分類號(hào)】R446 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004—7484（2013）10—0795—02

顯色培養(yǎng)基是近年來發(fā)展起來的一種新型培養(yǎng)基。在傳統(tǒng)培養(yǎng)基制作基礎(chǔ)上，添加了新型組合式特異性發(fā)色酶底物，當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)代謝過程中產(chǎn)生的特異性酶特異性發(fā)色底物后，目標(biāo)菌形成不同顏色的菌落，從而對(duì)目標(biāo)菌得到快速的分離和鑒別，同時(shí)也可以進(jìn)行計(jì)數(shù)。沙門氏菌是重要食源性，目前沙門氏菌檢測(cè)主要采用傳統(tǒng)的生化方法，包括增菌、分離培養(yǎng)、生化鑒定、血清鑒定等多個(gè)步驟。耗費(fèi)時(shí)間久，一般一周的時(shí)間，操作繁瑣，準(zhǔn)確度差，近年來沙門氏菌顯色培養(yǎng)基以它的強(qiáng)選擇性，操作簡(jiǎn)單、耗用時(shí)間短被大眾所接受。與其他顯色培養(yǎng)基相比，接受度更好一些。 經(jīng)過長(zhǎng)期使用顯色培養(yǎng)基進(jìn)行沙門氏菌檢測(cè)的過程總結(jié)，以及查閱其他技術(shù)人員應(yīng)用研究成果，得出以下幾點(diǎn)體會(huì)。

1種類：

1.1進(jìn)口沙門氏菌顯色培養(yǎng)基：

市面上的有法國科馬嘉、法國AES、英國OXOID、美國BD等品牌，他們共同特點(diǎn)是菌落小、沙門氏菌與其他菌落顏色對(duì)比強(qiáng)烈。進(jìn)口沙門氏菌顯色培養(yǎng)基使用最廣泛的是法國CHROMagar顯色培養(yǎng)基，沙門氏菌顯紫色。

1.2國產(chǎn)沙門氏菌顯色培養(yǎng)基：

由于沙門氏菌顯色培養(yǎng)基使用方便，減少檢驗(yàn)技術(shù)工作量，國內(nèi)很多培養(yǎng)基廠家都進(jìn)行了自主研發(fā)，目前國產(chǎn)沙門氏顯色培養(yǎng)基銷量最大有北京陸橋、廣東環(huán)凱、青島海博。北京陸橋的顏色判斷與法國科馬嘉顯色培養(yǎng)基相同：沙門氏菌為紫紅色，非沙門氏菌是藍(lán)綠色、無色或不生長(zhǎng)。廣東環(huán)凱沙門氏菌顯色培養(yǎng)基2009年獲得全國發(fā)明銀獎(jiǎng)。顏色判定為沙門氏菌為粉紅色。大腸菌群和大腸桿菌顯藍(lán)色。枸櫞酸桿菌顯紫色。其他菌落顯黃色或者無色。

2應(yīng)用研究

法國CHROMagar公司從1974年就開始研發(fā)顯色培養(yǎng)基，沙門氏菌顯色培養(yǎng)基是從2000年開始使用，使用研究有兩大方面：一是沙門氏菌顯色培養(yǎng)基與傳統(tǒng)選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行比對(duì)實(shí)驗(yàn)，從而得出沙門氏顯色培養(yǎng)基可以取代傳統(tǒng)選擇性培養(yǎng)基的結(jié)論；二是國產(chǎn)沙門氏菌顯色培養(yǎng)基與進(jìn)口沙門氏菌顯色培養(yǎng)基進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)。

2.1沙門氏菌顯色培養(yǎng)基與傳統(tǒng)選擇性培養(yǎng)基比對(duì)研究

可查的有2001年廣西食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所盧漢興《顯色培養(yǎng)基在微生物檢驗(yàn)初篩中的應(yīng)用》、2002年廣州鐵路中心衛(wèi)生防疫站梁春梅《沙門菌顯色培養(yǎng)基在健康體檢沙門菌檢測(cè)中的應(yīng)用》、2004年江蘇省獸藥監(jiān)察所周春紅等《科馬嘉顯色培養(yǎng)基在檢測(cè)飼料中沙門氏菌的應(yīng)用評(píng)價(jià)》、2011年輝南縣疾病預(yù)防控制中心安靜的《應(yīng)用顯色培養(yǎng)基檢測(cè)沙門氏菌的初步研究》、2007年嘉慶市疾病預(yù)防控制中心沈志英等《260份農(nóng)產(chǎn)品食源性致病菌檢測(cè)結(jié)果分析》、2006年長(zhǎng)春市疾病預(yù)防控制中心龔云偉等《科馬嘉顯色培養(yǎng)基在病原微生物分離中的應(yīng)用》等。涉及檢測(cè)對(duì)象有臨床檢測(cè)、飼料、農(nóng)產(chǎn)品、健康體檢等樣本。經(jīng)過比對(duì)得出沙門氏菌顯色培養(yǎng)基是可以取代傳統(tǒng)選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，而且比傳統(tǒng)選擇性培養(yǎng)基特異性和靈敏度更好。但是使用沙門氏菌顯色培養(yǎng)基價(jià)格昂貴，使用它提高檢測(cè)成本。

2.2 國產(chǎn)沙門氏菌顯色培養(yǎng)基與進(jìn)口培養(yǎng)基的效果對(duì)比研究

由于進(jìn)口沙門氏菌顯色培養(yǎng)基價(jià)格昂貴，國內(nèi)培養(yǎng)基廠家研發(fā)出國產(chǎn)沙門氏菌顯色培養(yǎng)基，那么國產(chǎn)沙門氏菌顯色培養(yǎng)基是否能取代進(jìn)口沙門氏菌顯色培養(yǎng)基。國內(nèi)很多技術(shù)人員開展了與法國科馬嘉的比對(duì)試驗(yàn)，其中比對(duì)試驗(yàn)開展比較的多是廣東環(huán)凱生產(chǎn)沙門氏菌顯色培養(yǎng)基，可查的有2006年廣東環(huán)凱微生物科技有限公司張淑紅《顯色培養(yǎng)基在幾種食源性致病菌快速檢測(cè)中的應(yīng)用》、2007年廣東省疾病預(yù)防控制中心朱海明《顯色培養(yǎng)基在檢測(cè)食品中沙門氏菌的應(yīng)用研究、2008年廣東環(huán)凱微生物科技有限公司盧勉飛等《顯色培養(yǎng)基快速檢測(cè)沙門氏菌效果的研究》、2009年河南省疾病預(yù)防控制中心張秀麗《兩種沙門氏菌顯色培養(yǎng)基實(shí)際應(yīng)用效果比對(duì)研究》以及本人今年《兩種沙門氏菌顯色培養(yǎng)基在水產(chǎn)品檢驗(yàn)中應(yīng)用比對(duì)研究》和《沙門氏菌顯色培養(yǎng)基在從業(yè)人員健康體檢中應(yīng)用比對(duì)研究》。涉及的檢測(cè)對(duì)象有臨床、食品、農(nóng)產(chǎn)品、水產(chǎn)品等樣本。經(jīng)過比對(duì)研究得出國產(chǎn)沙門氏菌顯色培養(yǎng)基具有菌落大、易挑起等特點(diǎn)。與進(jìn)口沙門氏顯色培養(yǎng)基使用無差別。

3 沙門氏菌顯色培養(yǎng)基使用注意事項(xiàng)

3.1傷寒沙門氏菌容易漏檢，由于個(gè)別傷寒沙門氏菌在顯色培養(yǎng)基生長(zhǎng)的顏色為無色，所以在檢測(cè)過程中要注意觀察無色菌落。

3.2顯色培養(yǎng)基上面所長(zhǎng)的陽性菌落不能直接確認(rèn)為沙門氏菌。因?yàn)樯抽T氏菌不同血清型存在特異性酶反應(yīng)的差異，在顯色培養(yǎng)基上出現(xiàn)不同顏色的菌落。

3.3煮沸溫度最好控制在90-95℃之間，溫度太高容易溢出，煮沸時(shí)間為10-20min，無需高壓滅菌。溫度冷卻到46℃時(shí)傾注平板，平板保質(zhì)期為2-5天，保存溫度為2-8℃。

3.4在接種顯色培養(yǎng)基之前最好經(jīng)過增菌，除非樣本中菌量比較多。

3.5從顯色培養(yǎng)基接種做生化鑒定時(shí)候，要做菌液純培養(yǎng)，否則顯色培養(yǎng)基上的顯色劑容易干擾生化結(jié)果。

3.6進(jìn)行沙門氏菌檢測(cè)比對(duì)研究中，沒有對(duì)藥品實(shí)際樣本進(jìn)行，所以藥品中沙門氏菌檢測(cè)是否可以使用沙門氏菌顯色培養(yǎng)基，有待驗(yàn)證。

以上是本人在查閱資料和檢驗(yàn)實(shí)踐中認(rèn)識(shí)與體會(huì)，以供其他技術(shù)人員參考，有不到之處歡迎指正。

參考文獻(xiàn)：

[1] 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)-沙門氏菌檢驗(yàn)，GB4789.4-2010[S]

[2] 田幀干，辛棋，張曉航等.CHROMagar顯色培養(yǎng)基在口岸從業(yè)人群沙門菌檢測(cè)中的應(yīng)用與評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué).2007，34（24）：4648.

[3] 楊蘭萍，許學(xué)斌，姚宗蓓等.CHROMagar顯色培養(yǎng)基分離沙門菌的初步應(yīng)用和評(píng)估. [J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué).2005，20（1）：52-54.

[4] 汪士薔.CHROMagar顯色培養(yǎng)基檢測(cè)沙門菌的方法探討[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn).2005，1（15）1：99.

[5] 盧漢興，車光，王紅等.顯色培養(yǎng)基在微生物檢驗(yàn)初篩中的應(yīng)用[J].廣西預(yù)防醫(yī)學(xué).2001，2（7）1：44-45

作者簡(jiǎn)介：

馬永，性別：女，1966年4月出生，河北省新河人，高級(jí)工程師，學(xué)士，研究方向：食品質(zhì)量與安全，工作單位：福建生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院。

項(xiàng)目：福建省教育廳B類科研項(xiàng)目（JB11300）