湖南炎陵太子參與其它產(chǎn)地太子參質(zhì)量比較

【摘 要】目的：通過(guò)測(cè)定貴州、福建、安徽、湖南四個(gè)地方太子參的多糖和皂苷含量，比較湖南炎陵太子參從貴州引種后的質(zhì)量情況。方法：利用紫外-可見分光光度計(jì)采用硫酸-苯酚法測(cè)定多糖的含量，香草醛-冰醋酸法測(cè)定皂苷含量。結(jié)果：貴州、福建、安徽、湖南栽培太子參的總多糖含量分別為8.92%、10.36%、12.79%、9.64%；總皂苷含量分別為0.868%、0.698%、0.599%、0.865%。結(jié)論：以多糖和總皂苷的含量為指標(biāo)，綜合考慮兩類成分含量高低，初步認(rèn)定湖南從貴州引種的太子參，質(zhì)量沒(méi)有下降。

【關(guān)鍵詞】太子參；總多糖；總皂苷；質(zhì)量比較

【中圖分類號(hào)】R284 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004—7484（2013）10—0487—02

太子參為石竹科植物孩兒參的干燥塊根，是常用補(bǔ)益中藥，具有益氣健脾、生津潤(rùn)肺之功效，現(xiàn)代研究表明，太子參具有抗疲勞、抗缺氧、抗應(yīng)激、抗衰老等藥理作用[1-3]。全國(guó)各地均有分布，主要產(chǎn)于江蘇、安徽、山東、福建、貴州等省[4]。江蘇歷來(lái)為太子參主產(chǎn)區(qū)，傳統(tǒng)藥材商品一直以江蘇地產(chǎn)的太子參質(zhì)量最優(yōu)，有“道地藥材”之稱。近二十多年來(lái)，野生資源日漸減少，安徽、福建、貴州等地也開始大面積種植太子參，隨著這些地區(qū)種植的發(fā)展，太子參的種植范圍逐漸擴(kuò)展。由于原藥材市場(chǎng)需求量逐年加大，為了進(jìn)一步滿足市場(chǎng)需要，我們從貴州引種在湖南炎陵開展太子參的栽培。為了鑒定湖南炎陵太子參質(zhì)量，本研究對(duì)炎陵太子參與其它產(chǎn)地太子參中多糖及皂苷含量進(jìn)行比較，為確定湖南炎陵太子參的質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。

1材料、儀器和試劑

UV-756CRT紫外-可見分光光度計(jì)；葡萄糖與人參皂苷Rb1購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品鑒定所；其它所有試劑均為分析純；安徽太子參藥材（安徽宣城太子參種植基地），貴州太子參藥材（貴州施秉太子參種植基地），福建太子參藥材（福建柘榮太子參種植基地），湖南炎陵太子參藥材（湖南炎陵太子參種植基地），經(jīng)湖南中醫(yī)藥高等專科學(xué)校楊先國(guó)博士鑒定均為石竹科植物孩兒參的塊根。

2 方法與結(jié)果

2.1太子參多糖含量測(cè)定

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 配制0.1mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL置于10 mL具塞試管中，依次加入蒸餾水使終體積為2.0 mL ，蒸餾水作為空白對(duì)照，各管加入5%的苯酚試液1mL，搖勻，再加入濃硫酸5 mL，搖勻，沸水浴15分鐘，取出放至室溫，在490 nm 處測(cè)定吸光度。以吸光度值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：A= 0.7351C - 0.0266 （R2 = 0.9995）

2.1.2 樣品溶液制備 分別取太子參樣品，經(jīng)60℃干燥后粉碎過(guò)40目篩，稱取50g用350mL 蒸餾水浸泡24小時(shí)，超聲波提取兩次，每次30分鐘，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，合并濾液濃縮，用95%乙醇靜置沉淀，將上層懸浮物用離心機(jī)離心30分鐘后取出，合并沉淀物，溶于丙酮中充分洗滌靜置過(guò)夜，沉淀再次溶液無(wú)水乙醇中充分洗滌靜置，待沉淀完全后將沉淀物置于水浴鍋中加熱干燥，得到太子參多糖粗品[5-8]。

2.1.3 樣品測(cè)定 同標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制法測(cè)定不同產(chǎn)地太子參樣品中多糖含量，結(jié)果見表1.

從表1可以看出，湖南炎陵太子參多糖含量比貴州的高，而相比福建、安徽的低。

2.1.4 精密度實(shí)驗(yàn) 取0.1 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL，按標(biāo)準(zhǔn)曲線方法連續(xù)測(cè)定6次吸光光度并計(jì)算含量，RSD=1.24%，結(jié)果表明儀器精密度試驗(yàn)符合要求。

2.1.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取0.1 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL，按標(biāo)準(zhǔn)曲線方法分別在0 ， 30 ， 60 ， 90 ， 120 ， 180分鐘測(cè)定6次吸光度并計(jì)算含量，RSD = 1.78%，說(shuō)明供試樣品溶液中多糖在3小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一產(chǎn)地6份樣品按2.1.2項(xiàng)制備供試樣品液6份，按標(biāo)準(zhǔn)曲線方法測(cè)定吸光度并計(jì)算含量，RSD = 1.20%。結(jié)果表明該測(cè)定方法重復(fù)性良好。

2.1.7 加樣回收試驗(yàn) 取已知含量的太子參樣品10克，按2.1.2項(xiàng)制備得到粗多糖，并制成供試樣品5份，每份加入對(duì)照溶液0.5 mL，操作步驟同2.1.4，測(cè)定吸光度值，得出平均回收率為95.76%，RSD = 1.85%。

2.2 太子參皂苷含量測(cè)定

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 取人參皂苷Rb1對(duì)照品，加甲醇溶解配制0.1 mg / mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1 mL ， 0.2 mL ， 0.4 mL ， 0.8 mL ， 1.6 mL，分別置于10 mL 具塞試管中，用微熱風(fēng)吹去溶劑，加入5%香草醛冰醋酸溶液0.2 mL、高氯酸0.8 mL，搖勻，密塞，置60℃水浴中加熱15分鐘后立即用流水冷卻，加冰醋酸5 mL，搖勻，同法作一空白。在560 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：A=3.9251C – 0.019 （R2=0.9997）

2.2.3 樣品溶液制備 分別取太子參樣品，經(jīng)60℃干燥后粉碎過(guò)40目篩，稱取2.0 g，加20倍的水，超聲提取30分鐘。將提取液濃縮至一定體積，趁熱于攪拌下緩慢加入70%的乙醇，靜置過(guò)夜，抽濾，濾液減壓蒸干乙醇。蒸干后以30 mL蒸餾水溶解，以60 mL 水飽和的正丁醇分3次萃取，萃取液合并后再以50 mL 正丁醇飽和的蒸餾水洗滌1次。正丁醇減壓蒸干，蒸干后以甲醇溶解并定容至10 mL，即得待測(cè)的皂苷甲醇溶液[9-12]。

2.2.4 樣品測(cè)定 同標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制法測(cè)定不同產(chǎn)地太子參樣品中皂苷含量，結(jié)果見表2.

從表2可以看出，湖南炎陵太子參皂苷含量比貴州的低，但是高于其它三個(gè)主要太子參產(chǎn)地的皂苷含量。

2.2.5 精密度試驗(yàn) 取同一份太子參樣品的皂苷甲醇溶液，連續(xù)監(jiān)測(cè)5次，測(cè)定其吸光光度并計(jì)算含量，RSD=1.06 %，結(jié)果表明儀器精密度試驗(yàn)符合要求。

2.2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取同一太子參藥材粉末2g，共6份，按照2.2.3項(xiàng)方法制備太子參皂苷甲醇溶液，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制法測(cè)定，計(jì)算其總皂苷含量，RSD = 1.86%。結(jié)果表明該測(cè)定方法重復(fù)性良好。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取0.1 mg/mL人參皂苷Rb1標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL，按標(biāo)準(zhǔn)曲線方法分別在0 ， 30 ， 60 ， 90 ， 120 ， 180分鐘測(cè)定6次吸光度并計(jì)算含量，RSD = 1.31%，說(shuō)明供試樣品溶液中皂苷在3小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.8 回收率試驗(yàn) 稱取太子參樣品的粉末每份2g，共6份，每份精確加入人參皂苷Rb1對(duì)照品10 mg，操作步驟同2.2.3，測(cè)定吸光度值，得出平均回收率為100.66%，RSD = 1.68%。

3 討論

本文測(cè)定了湖南、貴州、安徽、福建四個(gè)產(chǎn)地太子參的多糖與皂苷含量，其中多糖含量在8.92% - 12.79%之間，總皂苷含量在0.599% - 0.868% 之間，與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致，說(shuō)明本試驗(yàn)方法可靠。

從分析的結(jié)果知道：湖南炎陵太子參多糖含量比貴州的高，總皂苷含量基本上與貴州的持平。湖南炎陵太子參是從貴州引種過(guò)來(lái)的，經(jīng)過(guò)栽培，在化學(xué)成分含量上沒(méi)有下降，所以從成分這個(gè)角度看，湖南炎陵是適合太子參種植的地方。

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作者簡(jiǎn)介：

狄慶鋒（1984-），男（漢族），湖南汨羅人，現(xiàn)任湖南中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校助教，碩士學(xué)位，主要從事天然藥物提取分離和醫(yī)藥化工中間體合成研究工作。

馮務(wù)群（1966-），女（漢族），現(xiàn)任湖南中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校教授，碩士學(xué)位，主要從事天然藥物提取分離分析以及中藥活性成分研究。

基金項(xiàng)目：

湖南科技廳計(jì)劃項(xiàng)目（No.2011SK3019）；