D—二聚體檢測方法及其在診斷血栓栓塞疾病中的應(yīng)用觀察

【摘 要】目的：探討D-二聚體檢測方法及其在血栓栓塞性疾病診斷中的應(yīng)用價值。方法：收集血栓栓塞疾病患者共342例，按照栓塞類型分為急性腦梗死組（ACI組，156例）、深靜脈血栓組（DVT組，38例）和急性心肌梗死組（AMI組，148例），并選擇同期健康體檢者160例作為健康對照組，分別應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）及VIDS DD法測定患者的測定4組患者的D-二聚體，分析D-二聚體檢測對于血栓栓塞性疾病的診斷價值。結(jié)果：傳統(tǒng)ELISA法與VIDAS DD法的檢測結(jié)果無明顯差異（P>0.05）；ACI、DVT、AMI三組的血漿DD含量均顯著高于健康對照組（P<0.05）；兩種方法對于DVT的診斷陽性率均顯著優(yōu)于ACI和AMI（P<0.05），VIDAS DD法對于ACI和AMI的診斷陽性率略高于傳統(tǒng)ELISA法，但無顯著差異（P>0.05）。結(jié)論：血漿D-二聚體檢測的檢測對于早期診斷血栓栓塞疾病具有重要價值，其中，VIDS DD法操作簡便快速，對于當(dāng)個樣本檢測較為適用，ELISA法診斷準(zhǔn)確率較好，適用于大樣本檢測。

【關(guān)鍵詞】血栓栓塞疾??；D-二聚體；診斷

【中途分類號】R446.6 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】1004—7484（2013）10—0361—01

血栓性疾病是臨床常見疾病之一，主要是由于凝血、纖溶系統(tǒng)的成分異常變化導(dǎo)致凝血、抗凝系統(tǒng)的動態(tài)平衡發(fā)生破壞而引起。在凝血過程中，纖維蛋白原能夠被凝血酶原降解生成交聯(lián)纖維蛋白，其發(fā)生特異性降解可生成D-二聚體（DD）[1]。近年來，大量研究證實，血漿DD對于血栓栓塞疾病的排除診斷具有重要價值。目前，臨床檢測DD的傳統(tǒng)方法主要是酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測，近年來，臨床相繼推出了多種DD檢測法，其中，快速ELISA法（VIDAS DD）法是目前臨床常用的方法之一。本文對比分析了ELISA法與VIDAS DD法在血栓栓塞疾病診斷中的應(yīng)用價值，現(xiàn)總結(jié)報道如下：

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月至2013年9月期間，我院收治的血栓栓塞疾病患者共342例，按照栓塞類型分為急性腦梗死組（ACI組，156例），其中，男性88例，女性68例，年齡平均為（61.5±4.9）歲；深靜脈血栓組（DVT組，38例），男性21例，女性17例，平均年齡為（47.1±8.6）歲；急性心肌梗死組（AMI組，148例），男性79例，女性69例，平均年齡為（64.1±8.2）歲。選擇同期健康體檢者160例作為健康對照組，男性91例，女性69例，平均年齡為（50.2±10.3）歲。

1.2 方法

受試者均抽取靜脈血標(biāo)本并進行抗凝處理，置于3000r/min轉(zhuǎn)速室溫下離心分離10min，取血漿分裝成為0.5ml/份，立即置于-20℃下保存待測。

1.2.1 傳統(tǒng)ELISA檢測法

采用上海太陽生物技術(shù)有限公司提供的D-Dimer檢測試劑盒進行檢測，酶標(biāo)儀為美國BIO RAD680型，洗板機為美國BIO RAD1575型，操作嚴(yán)格按照說明書進行。

1.2.2 VIDAS D-Dimer檢測法

采用法國生物梅里埃D-Dimer檢測試劑，置于VIDAS儀器中按照相關(guān)操作說明檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

連續(xù)測定四組的血漿DD含量，并以臨床金標(biāo)準(zhǔn)（靜脈血栓造影、MRI或CT等）作為參照，對比分析兩種檢測方法的診斷陽性率

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)以SPSS18.0軟件分析，以（ ）表示計量資料，經(jīng)t檢驗；以率表示計數(shù)資料，經(jīng)χ檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血漿DD含量比較

檢測結(jié)果顯示，傳統(tǒng)ELISA法與VIDAS DD法的檢測結(jié)果無明顯差異（P>0.05）；ACI、DVT、AMI三組的血漿DD含量均顯著高于健康對照組（P<0.05），DVT組顯著高于ACI組和AMI組（P<0.05），ACI組與AMI組之間無明顯差異（P>0.05）。見表1。

2.2 兩種檢查方法對于血栓栓塞疾病的診斷性能比較

兩種方法對于DVT的診斷陽性率均顯著優(yōu)于ACI和AMI（P<0.05），VIDAS DD法對于ACI和AMI的診斷陽性率略高于傳統(tǒng)ELISA法，但兩者無顯著差異（P>0.05）。見表2。

3 討論

D-二聚體是目前臨床診斷血栓栓塞疾病的重要指標(biāo)，對于彌漫性血管內(nèi)凝血（DVT）、肺栓塞（PE）、腦血管疾病、惡性腫瘤、肝臟疾病等的診斷價值已獲得了許多臨床研究結(jié)果的證實[2]。臨床研究資料顯示，血漿DD可作為繼發(fā)性纖容亢進的標(biāo)志性物質(zhì)，對于血栓栓塞的診斷及病情監(jiān)測均具有重要意義，隨著病情的發(fā)展，血漿DD濃度可持續(xù)上升，常用于疾病早期診斷。例如對于DVT患者而言，監(jiān)測血漿DD可早期排除DVT形成，從而避免了靜脈造影檢查對于患者造成的痛苦以及危險性[3]。

本研究中，病例組的血漿DD含量均顯著高于健康對照組，提示血漿DD監(jiān)測對于早期篩查和診斷血栓栓塞疾病具有重要意義。目前，臨床檢查血漿DD的方法較多，傳統(tǒng)ELISA法具有較高的特異性，且所用試劑價格低廉，通常具有普通酶標(biāo)儀的實驗室即可進行血漿DD的檢測，但其操作較為繁瑣，耗時較長，通常是在3h以上才能夠得出結(jié)果，不適用于單個檢測。VIDAS D-Dimer法是一種新型的快速ELISA法，其主要原理是將夾心法（兩部酶免疫法）聯(lián)合最后熒光檢測法（ELFA）進行檢測，樣品置入含有堿性磷酸酶標(biāo)記物的抗DD抗體孔中，使共扼物酶催化底物被水解生成熒光物質(zhì)4-甲級傘形酮，可在450nm的熒光下進行測定，樣品抗原濃度與熒光強度呈正比。這種方法的敏感性、特異性以及陰性預(yù)測率均較高。其所用試劑是預(yù)先分配在專用密封條之中的，有現(xiàn)成的單份劑量，可有效避免污染和浪費，檢測時間在較傳統(tǒng)ELISA法顯著縮短，對于單個樣品的檢測具有較高的應(yīng)用價值[4]。本研究結(jié)果顯示，該法與傳統(tǒng)ELISA法的血漿DD檢測結(jié)果無明顯差異，對于ACI及AMI的陽性率略優(yōu)于傳統(tǒng)ELISA法，有望取代傳統(tǒng)ELISA法。

綜上所述，血漿DD檢測方便、快速且成本較低，可根據(jù)臨床實際需求及標(biāo)本數(shù)量選擇相應(yīng)的方法進行檢測，對于血栓栓塞疾病的早期診斷具有重要意義。

參考文獻：

[1] 王軍，朱平輝，任雨冰等.心房纖顫患者血漿D-二聚體水平與心血管疾病風(fēng)險關(guān)系研究[J].中國實驗診斷學(xué)，2010，14（9）：1447-1448.

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[3] 嚴(yán)敏，陸曄，潘湘濤等.動脈血栓栓塞性疾病血漿D-二聚體和纖維蛋白原測定的臨床意義[J].中外醫(yī)療，2009，28（16）：12-13.

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