鯊魚微量元素硒的原子熒光光譜法測定與研究

【摘 要】目的：建立鯊魚中硒的微波消解氫化物原子熒光光譜測定方法。方法：樣品經(jīng)微波消解，在鐵氰化鉀-鹽酸體系中， 用硼氫化鉀作還原劑，采用氫化物原子熒光光譜法測定。結(jié)果：硒濃度在0～25ug/l的范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)r=0.9997，方法檢出限為0.13ug/l，樣品檢出限0.016mg/kg，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.45%～3.23%，回收率93%～102%。結(jié)論：該法靈敏度高，準(zhǔn)確度好，精密度高，干擾少，簡便適用，適合鯊魚中硒的測定。

【關(guān)鍵詞】鯊魚；硒；微波消解；氫化物原子熒光光譜法

【中圖分類號(hào)】R657 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004—7484（2013）10—0143—02

鯊魚肉中富含微量元素硒【1】，硒是一種多功能的生命營養(yǎng)素，人體對(duì)硒的最佳攝入量范圍很小，硒的安全和適宜攝入量為50～400ug∕d【2】。福建閩東地區(qū)地處我國東南沿海，毗鄰臺(tái)灣海峽，擁有天然深水良港---三都澳，水產(chǎn)豐富，盛產(chǎn)鯊魚。建立一種鯊魚肉中硒含量的簡便、快速、準(zhǔn)確測定方法，對(duì)研究鯊魚營養(yǎng)成分和評(píng)估其經(jīng)濟(jì)價(jià)值具有一定意義。目前硒的測定方法有化學(xué)比色法、分子熒光光度法、原子吸收法、極譜法、原子熒光法等。氫化物原子熒光光譜法是新近發(fā)展起來的方法，也是衛(wèi)生部食品中硒測定的標(biāo)準(zhǔn)方法（GB/T5009.93---2003），關(guān)于該方法的應(yīng)用已有報(bào)道【3，4】，但測定鯊魚中硒未見報(bào)道。本法經(jīng)過改進(jìn)，利用微波消解消化技術(shù)，對(duì)鯊魚中的硒進(jìn)行氫化物原子熒光光譜法測定，可提高消化速度，減少被測物損失，消除環(huán)境導(dǎo)致的污染，可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員無危害?，F(xiàn)將結(jié)果匯報(bào)如下。

1 材料與方法

1.1 儀器 AFS—2202E雙道原子熒光光度計(jì)（北京海光儀器公司）；硒空心陰極燈（北京有色金屬研究總院）；XT—9800型多用預(yù)處理加熱儀（上海新拓）；XT—9900型智能微波消解儀（上海新拓）。玻璃器皿經(jīng)10%硝酸浸泡24小時(shí)處理，去離子水清洗后使用。

1.2 試劑和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 測定用水為去離子水，本法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純，硝酸；過氧化氫；載流：鹽酸（5%，V/V），取50 ml鹽酸倒入500 ml去離子水中，定容至1000 ml；硼氫化鉀溶液（1.5%，W/V）：稱取2g氫氧化鉀溶于200ml去離子水中，加入6g硼氫化鉀并溶解，用去離子水稀釋至400ml，用時(shí)現(xiàn)配；鐵氰化鉀（100g/L）：稱取10g鐵氰化鉀溶于100ml去離子水中，混勻；硒標(biāo)準(zhǔn)溶液（100ug/ml）：購自國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，使用時(shí)用5%HCL逐級(jí)稀釋到所需濃度。

1.3 測定方法

1.3.1 微波消解條件 樣品消解程序：5MPa，60s；10 MPa，90s；15 MPa，120s；20 MPa，180s；

25 MPa，240s。

作者簡介：章亞彥（1967-），男，本科，副主任技師。主要從事衛(wèi)生理化檢驗(yàn)工作

1.3.2 樣品處理 取鯊魚可食部分，勻漿備用。稱取樣品0.2000g于溶樣杯中，加7ml濃硝酸，晃動(dòng)溶樣杯，混合均勻，在多用預(yù)處理加熱儀上消化至無紅色煙后，冷卻，加3ml過氧化氫，置于微波爐進(jìn)行消解。消解結(jié)束后，加入2ml6mol/L鹽酸，在多用預(yù)處理加熱儀上加熱，到溶液變?yōu)榍辶翢o色伴有白煙出現(xiàn)，溶液剩1ml左右。將消解后溶液移入25ml比色管中，加入濃鹽酸2 ml，加入1ml鐵氰化鉀溶液，用5%鹽酸定容至刻度。搖勻，靜置30分鐘。同時(shí)做樣品空白試驗(yàn)。

1.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線配制 吸取100ug/ml硒標(biāo)準(zhǔn)液，用5%鹽酸逐級(jí)稀釋到0.25ug/ml。吸取0.25ug/ml硒標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.00、0.10、0.50、1.00、1.50、2.00 、2.50 ml于25 ml比色管中， 相當(dāng)于含硒0、0.025、0.125、0.250、0.375、0.500、0.625ug。按上述樣品處理步驟，配置成0、1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0ug/l的硒標(biāo)準(zhǔn)系列。

1.3.4 儀器條件與參數(shù) 硒光電倍增管負(fù)高壓310V；燈電流80mA；，輔助燈電流40mA；原子化器爐溫200℃；原子化器高度8mm；載氣（氬氣）流量400 ml/min；屏蔽氣流量1000ml/min；讀數(shù)時(shí)間10s；延遲時(shí)間1.0s；重復(fù)次數(shù)1；測量方式Std. Curve（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）；讀數(shù)方式Peak Area（峰面積）；空白判別值5。

1.3.5 測定步驟 安裝硒空心陰極燈，打開AFS—2202E雙道原子熒光光度計(jì)電源，儀器聯(lián)機(jī)自檢。設(shè)定好儀器工作條件和參數(shù)，原子化器點(diǎn)火，儀器預(yù)熱30分鐘。進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)空白溶液測量，進(jìn)行系列標(biāo)準(zhǔn)溶液測量，沖洗，進(jìn)行樣品空白溶液測量，輸入未知樣品信息，進(jìn)行未知樣品測量。儀器自動(dòng)生成工作曲線并計(jì)算結(jié)果，數(shù)據(jù)存盤，打印報(bào)告。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性范圍、標(biāo)準(zhǔn)曲線及最低檢出限 按本法對(duì)硒標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)行測定，結(jié)果表明，硒濃度在0～25ug/l范圍呈線性關(guān)系，回歸方程If=53.125×C-5.452，相關(guān)系數(shù)r=0.9997。對(duì)空白溶液連續(xù)測定11次，根據(jù)公式DL=3×SD/K，計(jì)算出儀器檢出限為0.13ug/l，若取樣0.2g，本方法樣品最低檢出限0.016mg/kg。

2.2 精密度 對(duì)5 ug/l、10 ug/l、25 ug/l三種濃度硒標(biāo)準(zhǔn)溶液及0.61 mg/kg樣品分別連續(xù)測定11次，根據(jù)測定值計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD，結(jié)果分別為3.10%、2.41%、1.45%、3.23%。

2.3 樣品加標(biāo)回收率 取2份含量不同的樣品（鯊魚1、鯊魚2），分別加入0.25ug/ml的硒標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.20ml、1.00ml（相對(duì)于硒0.05ug、0.25ug），按上述樣品測定方法處理，進(jìn)行回收率試驗(yàn)。結(jié)果見表1 。

2.4 樣品的消化 試驗(yàn)表明，本試驗(yàn)采用硝酸+過氧化氫（7+3）混合酸為消化液。采用程序升壓方式，樣品消解程序：5MPa，60s；10 MPa，90s；15 MPa，120s；20 MPa，180s；25 MPa，240s為合適。

2.5 儀器工作條件的選擇 在含硒15ug/l反應(yīng)體系中，1.5%硼氫化鉀溶液作還原劑，5%鹽酸溶液作載流，進(jìn)行試驗(yàn)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)，采用負(fù)高壓310V，定燈電流80mA，原子化器高度為8mm，載氣流量400 ml/min、屏蔽氣流量1000 ml/min為最佳。

2.6 反應(yīng)介質(zhì)的選擇 在上述工作條件下進(jìn)行試驗(yàn)，選用5%鹽酸溶液作為載流，選用硼氫化鉀濃度1.5%為合適。

2.7 干擾試驗(yàn) 在上述選定試驗(yàn)條件下， 15ug/l硒中分別加入下列離子進(jìn)行干擾試驗(yàn)，相對(duì)誤差≤5%，20000倍Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Al3+，1000倍Fe2+、Mn2+、Zn2+、Pb2+，200倍Cu2+、Ni2+、As3+、Sn2+、Hg+、Cd2+、Sb3+，均不干擾測定。試驗(yàn)表明，加入鐵氰化鉀作為掩蔽劑，效果良好。

2.8 本法與國標(biāo)法比較試驗(yàn)

本法用硝酸+過氧化氫（7+3）微波消解對(duì)樣品消化，而國標(biāo)法用硝酸+高氯酸（4+1）混合酸濕法消化。樣品來自于本地盛產(chǎn)小鯊魚，用兩種消化方法，按上述測定方法進(jìn)行測定。結(jié)果見表2。

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)P>0.05，無顯著性差異。

3小結(jié)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，利用微波消解消化技術(shù)，氫化物原子熒光光譜法測定鯊魚中的硒，具有較高的靈敏度、準(zhǔn)確度、基體干擾少、樣品用量少、所耗試劑少、便于操作等優(yōu)點(diǎn)。結(jié)果令人滿意，適合鯊魚中硒的測定

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