菟絲子提取物促進(jìn)大鼠精子生成的研究

【摘 要】目的：研究菟絲子提取物對大鼠精子生成的影響。方法：以醋酸棉酚建造大鼠生精障礙模型，用菟絲子提取物灌胃治療。結(jié)果：菟絲子提取物治療組大鼠的精子數(shù)量顯著多于模型組（P<0.01）。結(jié)論：菟絲子提取物可促進(jìn)生精障礙大鼠精子的生成。

【關(guān)鍵詞】菟絲子提取物；大鼠；精子

【中圖分類號】R256 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1004—7484（2013）10—0112—01

中藥菟絲子為旋花科菟絲子（Cuscuta chinensis Lam.）的干燥成熟種子，在臨床上應(yīng)用廣泛，被《神農(nóng)本草經(jīng)》列為上品，具滋補(bǔ)肝腎、益精明目、固精縮尿、止瀉安胎等功效[1]，單獨(dú)或配伍使用治療少弱精子所致的男性不育癥效果顯著[2-3]，但其機(jī)理尚未完全明了。本實(shí)驗(yàn)建造大鼠生精障礙模型，研究菟絲子提取物對大鼠精子生成的影響，報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1試劑與儀器

氯化鉀、果糖、磷酸二氫鉀、苦味酸等，AR級，均為國產(chǎn)。

醋酸棉酚（Gossypol acetate）：國產(chǎn)，純度99.9%（HPLC法）；菟絲子藥材購自中藥飲片有限公司，符合《中國藥典》規(guī)定。

Olympus光學(xué)顯微鏡：日本Olympus Optical Co.Ltd生產(chǎn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物

Wistar雄性大鼠40只，清潔級，體質(zhì)量130～150g。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)藥劑的制備

稱取菟絲子50g，加8倍量蒸餾水浸泡30min，煮沸，再煎30min，過濾，濾渣再加8倍量蒸餾水同上處理2次，合并3次濾液，70℃濃縮，制成1.0g生藥/mL，4℃冷藏備用。

實(shí)驗(yàn)中使用的精子營養(yǎng)液等參照有關(guān)文獻(xiàn)配制。

1.3.2 生精障礙大鼠模型的建造與給藥

Wistar雄性大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)2天后隨機(jī)分為正常對照組（10只）和建造模型組（30只）。

以醋酸棉酚按50mg/kg體質(zhì)量灌胃，隔日一次，連續(xù)2周，建造大鼠生精障礙模型。

將30只生精障礙模型大鼠再隨機(jī)分為模型組、菟絲子低劑量組與高劑量組，每組10只。實(shí)驗(yàn)組按5.0g、10.0g生藥/kg體質(zhì)量，用菟絲子提取物灌胃；正常對照組、模型組給以10.0g /kg體質(zhì)量的生理鹽水灌胃；每日一次，連續(xù)3周。

1.3.3 實(shí)驗(yàn)大鼠的處理及檢測

各組大鼠于末次給藥2h后立即處死，取出睪丸、附睪，剔除脂肪和結(jié)締組織，吸干血液、組織液，稱重。取附睪尾部，釋出精子，觀察其活力情況并計(jì)數(shù)；同時(shí)做精子爬高試驗(yàn)，記錄精子30分鐘的爬高距離，考察精子的質(zhì)量。

2結(jié)果與分析

實(shí)驗(yàn)表明：模型組的精子數(shù)量顯著低于正常對照組和菟絲子實(shí)驗(yàn)各組，有非常顯著性差異（P<0.01）；模型組精子30分鐘爬高距離顯著低于正常對照組和菟絲子實(shí)驗(yàn)組，差異有顯著性（P<0.01， P<0.05）；模型組的精子指數(shù)與正常對照組、菟絲子實(shí)驗(yàn)組比較，有非常顯著性差異（P<0.01），而菟絲子低劑量組與高劑量組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果雖有差異，但差異無顯著性（P>0.05）。實(shí)驗(yàn)表明模型組大鼠睪丸的生精能力最差，而經(jīng)菟絲子提取物治療后，生精功能明顯增強(qiáng)，在一定范圍內(nèi)，呈劑量依賴關(guān)系。

精子活力觀察：在精子計(jì)數(shù)之前在顯微鏡下觀察精子的活力，模型組精子活力很差，a級精子很少，絕大多數(shù)精子原地緩慢移動；而正常對照組、菟絲子不同劑型組的精子活力明顯優(yōu)于模型組，精子活躍，多數(shù)直線運(yùn)動，a級精子明顯增多。結(jié)果表明，與模型組比較，實(shí)驗(yàn)組的精子數(shù)量和質(zhì)量均有顯著改變，詳見下表。

3 討論

棉酚的雄性抗生育作用是肯定的，機(jī)理是其能抑制精子的發(fā)生[4]。本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M的精子數(shù)量、質(zhì)量與正常對照組比較，均有顯著性差異（P<0.01），表明實(shí)驗(yàn)建造的大鼠生精障礙模型成功。

睪丸與附睪的重量、精子的數(shù)量是睪丸生精功能的直接反映，本實(shí)驗(yàn)精子計(jì)數(shù)結(jié)果：模型組大鼠的精子數(shù)量最少，顯著低于菟絲子給藥實(shí)驗(yàn)組，有非常顯著性差異（P<0.01），說明大鼠生精障礙大鼠經(jīng)各菟絲子給藥組治療后，睪丸的生精功能明顯改善。

精子活力是精子質(zhì)量的重要參數(shù)，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果模型組的精子較少，活動情況很差，大多數(shù)精子僅有緩慢的蠕動。而菟絲子給藥實(shí)驗(yàn)組的精子數(shù)量明顯多于模型組，活力也明顯優(yōu)于模型組，大多數(shù)精子非常活躍地運(yùn)動，a、b級精子顯著增多。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與類似的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果基本一致[5]。

精子爬高試驗(yàn)是直接評價(jià)精子活力（質(zhì)量）的有效方法[6]。實(shí)驗(yàn)表明：正常對照組和菟絲子給藥實(shí)驗(yàn)各組精子30分鐘爬高均高于模型組，與模型組比較有顯著性差異（P<0.01），菟絲子給藥組之間無顯著差異，說明菟絲子均可顯著提高實(shí)驗(yàn)大鼠精子的數(shù)量和質(zhì)量。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明菟絲子提取物對實(shí)驗(yàn)性生精障礙大鼠治療后的性器官、精子質(zhì)量與數(shù)量均有顯著性的提高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果也為菟絲子治療少弱精子的男性不育癥提供了科學(xué)的依據(jù)。關(guān)于菟絲子L對雄性生殖系統(tǒng)的作用，本課題組將繼續(xù)進(jìn)行研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] 林慧彬，彭廣芳，李為玲.中藥菟絲子的本草考證[J].時(shí)珍國藥研究，1997，8（3）：193-194.

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[3] 王建國，張會臣.菟絲子湯治療腎虛型男性不育癥19例[J].河北中醫(yī)，2001，23（1）：53.

[4] 薛社普，梁德才，劉 裕.男用節(jié)育藥棉酚的實(shí)驗(yàn)研究[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1983，2-66.

[5] 任獻(xiàn)青，丁 櫻，崔瑞琴.菟絲子黃酮干預(yù)雷公藤多苷所致雄性幼鼠睪丸組織損傷的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合兒科雜志，2010，2（4）：302-305.

[6] 方奉誰.精子爬高實(shí)驗(yàn)在常規(guī)檢驗(yàn)中的地位[J].廣西醫(yī)學(xué)，1991，13（6）：393-395.

基金項(xiàng)目：

浙江省教育廳科研項(xiàng)目（20071242）資助課題。