Stathmin蛋白在鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤組織中的表達(dá)、臨床意義

【摘 要】目的：探討Stathmin蛋白在鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤（NIP）中的表達(dá)及其與臨床病理之間的關(guān)系。方法：采用免疫組織化學(xué)法檢測35例NIP和20例鼻中隔切口邊緣粘膜組織（SM）以及10例鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌（NSCC）標(biāo)本中Stathmin蛋白的表達(dá)。結(jié)果：Stathmin 蛋白在 NIP 的陽性表達(dá)率為57.14% ，明顯高于它在鼻中隔黏膜組織中的表達(dá)率0% ，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （ P<0.05 ） ； Stathmin蛋白在鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌組織中的陽性表達(dá)率為80% ，高于它在 NIP 的表達(dá)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（ P<0.05） 結(jié)論：提示Stathmin 與腫瘤病理類型及腫瘤細(xì)胞分化程度有重要關(guān)聯(lián)性。Stathmin 的陽性表達(dá)可能與 NIP 的侵襲性、高復(fù)發(fā)性有重要的相關(guān)性，在對 NIP 的診斷及檢測中可能有重要作用。

【關(guān)鍵詞】Stathmin；鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤； 免疫組織化學(xué)

【中途分類號】R739.62 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1004—7484（2013）10—0035—01

鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤是臨床上較多見的鼻腔鼻竇腫瘤。雖被定義為良性腫瘤但因其具有破壞性侵蝕生長、對周圍組織造成極大損害，并且復(fù)發(fā)率高達(dá)28%一74%以及近5%—15%【1】的鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤可發(fā)生惡變。因而在臨床治療上多采取較積極的態(tài)度，早期發(fā)現(xiàn)、早期預(yù)測其復(fù)發(fā)與惡變。Stathmin是一種微管不穩(wěn)定蛋白，由于在細(xì)胞周期中具有特殊的微管解聚活性，作為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子在細(xì)胞分化、組織再生與修復(fù)、尤其在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展及表型決定上具有重要作用及意義。S tatlmi in在人類多種惡性腫瘤中存在高表達(dá)，如乳腺癌、肺腺癌和口腔鱗狀細(xì)胞癌等[2一4]。據(jù)報道，S tatlmi in8的高表達(dá)與一些惡性腫瘤分化和預(yù)后有關(guān)，被認(rèn)為是腫瘤分化和預(yù)后的分子標(biāo)志物[2一4]。本實驗采用免疫組織化學(xué)方法檢測Stathmin蛋白在鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤組織中的表達(dá)。并對其在鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤中的表達(dá)進(jìn)行了分析研究。

1材料與方法

1.1資料

1.1.1研究對象：選取即墨中醫(yī)醫(yī)院病理科檔案資料中2000-2011年間35例經(jīng)病理確診為鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤（男21例，女14例，平均年齡52.2歲）的石蠟包埋標(biāo)本作為實驗組；另取2012年20例因鼻中隔偏曲行鼻中隔矯正術(shù)中所取鼻中隔切口邊緣粘膜組織的石蠟包埋標(biāo)本（男11例，女9例，平均年齡45歲）以及2000-2011年間經(jīng)病理確診并在耳鼻喉科科住院手術(shù)的鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌10例（男7例，女3例，平均年齡56. 3歲）作為對照組；作為對照組；所有患者均在耳鼻咽喉科住院治療，病理檢查之前除手術(shù)治療之外，均未行放化療、干擾素、免疫治療等治療措施，且未發(fā)現(xiàn)有其它系統(tǒng)惡性腫瘤。

1.1.2主要試劑與儀器：兔抗人Stathmin多克隆抗體（bs}902R）購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司；鼠抗人S tatlmi in單克隆抗體購白英國C ST公司。第二代通用型二步法檢測系統(tǒng)（PV X000）購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.2方法

1.2.1常規(guī)病理制片：所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林固定24-48小時，常規(guī)石蠟包埋，每例石蠟標(biāo)本作4um厚連續(xù)切片4張（其中2張行Stathmin免疫組化染色，另2張分別供HE染色和空白對照），貼于涂有0. 05%多聚賴氨酸的載玻片，置于60 °C烤箱內(nèi)烤干，備用。常規(guī)HE染色及免疫組化染色，按照試劑盒要求操作。

1.2.2染色結(jié)果判斷：在400倍視野下，每例隨機選不重復(fù)5個視野，根據(jù)陽性表達(dá)部位的染色強度和陽性表達(dá)的細(xì)胞數(shù)兩種標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行綜合評分，（1）依據(jù)細(xì)胞陽性表達(dá)部位的染色強度判斷：a.細(xì)胞無染色，記0分；b.細(xì)胞陽性表達(dá)部位染成黃色為弱陽性，記1分；c.細(xì)胞陽性表達(dá)部位染成棕黃色目_背景無著色，或細(xì)胞陽性表達(dá)部位染成棕色并有棕黃色背景為中等陽性，記2分；d.細(xì)胞陽性表達(dá)部位染成棕色目_背景無著色為強陽性，記3分，（2）依據(jù)陽性細(xì)胞表達(dá)數(shù)計分：a.無陽性細(xì)胞表達(dá)為0分；b.陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)}25%為1分；c. 25%<陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)<50%為2分；d.陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)）50%為3分，在有經(jīng)驗的病理科診斷醫(yī)生指導(dǎo)下，分別按上述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分，再將兩者評分結(jié)果相乘，其乘積為最終得分①0分者為陰性表達(dá)，最終得分為0分；②1分和2分者為弱陽性表達(dá)，最終得分為1分；③3分和4分者為中等陽性表達(dá)，最終得分為2分；④6分和9分者為強陽性表達(dá)，最終得分為3分，最終得分為0分和1分者記為陰性，2分和3分者記為陽性。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS 13. 0統(tǒng)計學(xué)軟件，計量資料采用x（—）±s表示，兩組患者計量資料的比較采用兩獨立樣本t檢驗，計數(shù)資料的比較采用x2檢驗，P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

Stathmin 蛋白的陽性信號表達(dá)于細(xì)胞漿，按染色程度從黃色、棕黃色到棕色不等。在 NIP 中 stathmin 蛋白陽性產(chǎn)物大部分位于鱗狀上皮、呼吸上皮或移行上皮細(xì)胞胞漿，基底細(xì)胞層陽性表達(dá)較少，陽性細(xì)胞分布以上皮層為主，向上皮各層逐漸分散 ； 在鼻中隔黏膜組織中部分切片陽性細(xì)胞表達(dá)呈棕黃色，染色較淺，陽性細(xì)胞數(shù)較少，密度稀，稀疏的陽性細(xì)胞分散于上皮的基底細(xì)胞層 ； 在鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌中陽性表達(dá)顏色較深，大部分呈棕色，部分為深棕色，密度高，陽性細(xì)胞數(shù)延伸到上皮的全層，分化差的表達(dá)無層次 。Stathmin 蛋白在 NIP 的陽性表達(dá)率為57.14% ，明顯高于它在鼻中隔黏膜組織中的表達(dá)率0% ，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （ P<0.05 ） ； Stathmin蛋白在鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌組織中的陽性表達(dá)率為80% ，高于它在 NIP 的表達(dá)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（ P<0.05） ，見表 1。

3 討論

鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤是鼻腔、鼻竇最常見的良性腫瘤之一。盡管鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤屬良性腫瘤，但其局部侵襲性生長以及高復(fù)發(fā)高惡變率的特殊生物學(xué)特性使其具有與一般良性腫瘤不同的特點[5]。因而臨床上應(yīng)給與高度的重視，同時也期待發(fā)現(xiàn)更好的方法改變其高復(fù)發(fā)高惡變率的特性。Stathmin 蛋白是新發(fā)現(xiàn)的一種微管不穩(wěn)定蛋白，具有獨特的微管解聚活性，通過微管系統(tǒng)的動力學(xué)平衡可以調(diào)控細(xì)胞周期，并因此改變細(xì)胞的增殖、分化、活性等生物學(xué)行為。在細(xì)胞增殖和分化及腫瘤發(fā)生中有重要的作用。近年研究證實，在多種惡性腫瘤中 Stathmin 都有高水平表達(dá)，在白血病、淋巴瘤、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、肝癌、宮頸癌、成骨肉瘤、乳腺癌及消化系統(tǒng)惡性腫瘤等多種腫瘤中都檢測到 Stathmin 的高表達(dá)。黃方等[6]研究發(fā)現(xiàn)，Stathmin 在兒童喉乳頭狀瘤組織中具有高表達(dá)，可能與其高復(fù)發(fā)性、難治性有關(guān)。本研究通過檢測鼻腔內(nèi)翻性乳頭狀瘤中 Stathmin 的表達(dá)情況，顯示從鼻中隔粘膜一鼻腔內(nèi)翻性乳頭狀瘤一鼻腔鱗癌，Stathmin 陽性細(xì)胞數(shù)逐漸增多，而且在三種組織類型之間差異有顯著性，提示Stathmin 與腫瘤病理類型及腫瘤細(xì)胞分化程度有重要關(guān)聯(lián)性。Stathmin 的陽性表達(dá)可能與 NIP 的侵襲性、高復(fù)發(fā)性有重要的相關(guān)性，在對 NIP 的診斷及檢測中可能有重要作用。

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