雌激素受體亞型ERα在子宮肌瘤中的表達(dá)及其臨床意義

【摘 要】目的：檢測雌激素受體亞型ERα在子宮肌瘤中的表達(dá)，探討 ERα與子宮肌瘤的發(fā)生、發(fā)展之間的關(guān)系。 方法：收集子宮肌瘤組織標(biāo)本30例，相應(yīng)肌瘤包膜外正常子宮肌層組織30例 ，選取正常子宮肌層組織10例。應(yīng)用免疫組化 S-P法 ，檢測ERα在子宮肌瘤組織、肌瘤包膜外正常子宮肌層組織及正常子宮肌層組織中的表達(dá)。結(jié)果：30例子宮肌瘤組織中，29例ERα蛋白陽性表達(dá)（ 29/30），30例肌瘤包膜外正常子宮肌層組織中21例陽性表達(dá)（21/30）， 10例正常子宮肌層組織中7例陽性表達(dá)（ 7/10）， 三組不同組織ERα蛋白陽性率比較有非常顯著性差異（x 2=8.06， P =0.004）。 結(jié)論：雌激素受體亞型ERα與子宮肌瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】ERα；免疫組化；肌瘤組織；肌層組織

【中圖分類號(hào)】R737.33 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004—7484（2013）10—0034—01

子宮肌瘤是婦科最常見的良性腫瘤，生育期婦女其發(fā)病率約為20%～25%，占女性生殖器良性腫瘤的52%。長期以來關(guān)于子宮肌瘤病因的研究頗多，確切發(fā)病機(jī)制不清。目前為止， 一般認(rèn)為雌激素有誘發(fā)并促進(jìn)子宮肌瘤生長的作用，近來研究表明孕激素對(duì)子宮肌瘤更有促生長作用[1， 2]。雌、孕激素的生理作用分別由雌、孕激素受體介導(dǎo)。 雌激素受體分為α和β兩種亞型[3] ，由兩個(gè)獨(dú)立的基因編碼。 ERα和ERβ具有不同的調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄的活性，最終發(fā)揮不同的臨床作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)對(duì)象 為2012年5月-2012年12月在沈陽市紅十字會(huì)醫(yī)院因子宮肌瘤行子宮切除術(shù)的30例患者和因?qū)m頸CINⅢ級(jí)或子宮脫垂行子宮切除術(shù)的10例患者的石蠟組織標(biāo)本。肌瘤組：取子宮肌瘤結(jié)節(jié)中心部位組織30例，患者年齡35 ～ 40歲，平均37.27+1.5歲。；肌瘤包膜外組：取自肌瘤組同一患者的子宮肌瘤包膜外2cm子宮肌層組織30例，患者年齡同肌瘤組；正常子宮肌層組：取正常子宮肌層組織10例，患者年齡35 ～ 40歲，平均37.40+1.5歲。標(biāo)本均經(jīng)術(shù)后病理確診。排除內(nèi)分泌干擾因素，即：手術(shù)時(shí)間為患者月經(jīng)周期的第8-14天，手術(shù)前6個(gè)月未服用激素類藥物，亦無糖尿病，甲狀腺功能亢進(jìn)或減低，卵巢腫瘤等并發(fā)癥。

1.1.2 主要試劑 兔抗人ERα多克隆抗體購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司，S-P免疫組化試劑盒購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司（通用型）。

1.2方法

1.2.1 免疫組化S-P 法染色 取子宮肌瘤結(jié)節(jié)組織的標(biāo)本30例 ，選取同一患者子宮肌瘤包膜外2厘米正常子宮肌層組織30例，選取正常子宮肌層組織10例。標(biāo)本取材后，常規(guī)用10%的甲醛溶液固定12-24小時(shí)，石蠟包埋。切4um厚的石蠟切片，HE染色后光鏡下觀察組織學(xué)形態(tài)，篩選組織標(biāo)本。采用 S-P免疫組化法 ，檢測標(biāo)本中 ERα 的表達(dá)情況。

1.2.2結(jié)果判定 各個(gè)受體細(xì)胞核內(nèi)或細(xì)胞漿內(nèi)有棕黃色顆粒染色者為陽性染色細(xì)胞，陽性判斷采用Sinicrope改良法[4] 。記錄各級(jí)切片中染色細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，分為5級(jí)： 0分：染色細(xì)胞<5%： 1分：染色細(xì)胞5%～25%； 2分：染色細(xì)胞25%～50%； 3分：染色細(xì)胞50 ～-75%； 4分：染色細(xì)胞>75%。染色強(qiáng)度分為4級(jí)，0分：不顯色；1分：淺黃色；2分：棕黃色；3分：深棕色。每份切片記分=染色細(xì)胞計(jì)數(shù)分?jǐn)?shù)×染色強(qiáng)度分?jǐn)?shù)，所得分?jǐn)?shù)<1分為陰性結(jié)果，反之為陽性，2-3分為弱陽性（+），4-5分為中度陽性（十十），>5分為強(qiáng)陽性（+++）。 每張切片取連續(xù)10個(gè)高倍視野觀察評(píng)分后取值。

1.2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用spss11.0軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。陽性率比較及相關(guān)性采用x2檢驗(yàn)和spearman等級(jí)相關(guān)分析。 P<0. 05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0. 01極顯著性意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

30例子宮肌瘤組織中29例陽性表達(dá)（ 29/30），30例肌瘤包膜外正常肌層組織中21例陽性表達(dá)（21/30）， 10例正常子宮肌層組織中7例陽性表達(dá)（ 7/10） 。三種組織ERα蛋白陽性率比較有非常顯著性差異（x 2=8.06， P =0.004）； 子宮肌瘤與肌瘤包膜外肌層組ERα蛋白陽性率比較有非常顯著性差異（x 2=7.68， P =0.008）； 子宮肌瘤組與正常子宮肌層組ERα蛋白陽性率比較有顯著性差異（x 2=5.92， P =0.018）； 肌瘤包膜外肌層組與正常子宮肌層組ERα蛋白陽性率比較無顯著性差異（x 2=0.16，P =0.721）； 見表

3 討論 子宮肌瘤作為婦科最常見的良性腫瘤，對(duì)其病因的研究至今尚無定論。但目前普遍認(rèn)為：子宮肌瘤是一種卵巢激素依賴性腫瘤， 其生長與雌激素、孕激素、雄激素、催乳素等內(nèi)分泌激素有關(guān)，并且受到局部多肽類生長因子的介導(dǎo)。但應(yīng)用激素療法及選擇性使用激素受體調(diào)節(jié)劑及生長因子調(diào)節(jié)劑，均不能徹底治愈子宮肌瘤，因此提示還有其他因素參與子宮肌瘤的發(fā)生。

一般認(rèn)為，雌激素通過雌激素受體（ER）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮生理作用，即雌激素與ER 結(jié)合成 ER二聚體，二聚體繼而與靶基因的雌激素反應(yīng)元件（ERE）結(jié)合，從而激活或抑制靶基因的表達(dá)而引發(fā)一系列的生物學(xué)效應(yīng)。 本次檢測表明：子宮肌瘤組織ERα 蛋白含量明顯高于肌瘤包膜外肌層組織（P<0.05），且也明顯高于正常肌層組織組 （P<0.05），可見子宮肌瘤患者的瘤體組織ERα的含量增加，且ERα在子宮肌瘤組織中表達(dá)陽性率較高，推測子宮肌瘤的發(fā)生與ERα水平升高有關(guān)，并且ERα在其中可能起主要作用。 綜上所述，在子宮肌瘤發(fā)展過程中， ERα對(duì)子宮肌瘤的表達(dá)發(fā)揮促進(jìn)作用 。

參考文獻(xiàn)：

[1] 許爭峰，王迅美1 子宮平滑肌瘤細(xì)胞遺傳學(xué)初步研究 中華婦產(chǎn)科雜志，1993 ，28 （2） ：91

[2] Kurbanora MKH ，Koroleva AG， sergeer AS1 Genetic cepidemiolgic analysis of uterine myoma：assessment of repeated risk ，Genetika，2003，25：1896-1898

[3] 吳際，段云程 子宮肌瘤組織雌、孕激素受體及細(xì)胞增殖相關(guān)抗原與激素及細(xì)胞核體關(guān)系的探討 中華婦產(chǎn)科雜志2005 ，30（9） ：603