三種解酒中藥溶液對酒精性肝損傷的保護(hù)試驗(yàn)

【摘 要】目的：本實(shí)驗(yàn)是為了客觀科學(xué)地評價山東某生物制藥有限公司提供的蟲草多糖溶液、蟲草多糖+云芝多糖+猴頭菇多糖混合溶液、猴頭菇多糖溶液對酒精性肝損傷的保護(hù)效果。方法：通過成功建立小白鼠連續(xù)誘發(fā)酒精性肝損傷模型，用以上三種解酒中藥進(jìn)行連續(xù)30天飲服給藥，在第10、20和30天時采樣進(jìn)行ALT、AST和病理組織學(xué)觀察。結(jié)果：在連續(xù)灌服白酒早期，蟲草多糖+云芝多糖+猴頭菇多糖混合溶液的保肝作用優(yōu)于蟲草多糖溶液和猴頭菇多糖溶液。結(jié)論：隨著給藥時間的延長，三種中藥均有很好的保肝作用。

【關(guān)鍵詞】酒精性肝損傷；ALT；AST；組織病理學(xué)檢查

【中圖分類號】R285 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1004-7484（2013）10—0001—01

大量酒精攝入后可引起機(jī)體多系統(tǒng)損害，肝臟是酒精代謝的主要臟器。因此研制出有效的解酒護(hù)肝藥物進(jìn)行防治尤顯重要。反映肝細(xì)胞損傷的試驗(yàn)很多，較常用的有血清酶（谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST））的測定和組織病理學(xué)檢查。病理學(xué)改變主要為大泡性或大泡性為主伴小泡性的混合性肝細(xì)胞脂肪變性。因此我們也可根據(jù)這些指標(biāo)值和病變來評價藥物對酒精性肝損傷的保護(hù)作用。

本實(shí)驗(yàn)是為了客觀科學(xué)地評價山東某生物制藥有限公司提供的蟲草多糖溶液、蟲草多糖+云芝多糖+猴頭菇多糖混合溶液、猴頭菇多糖溶液對酒精性肝損傷的保護(hù)效果。通過成功建立小白鼠連續(xù)誘發(fā)酒精性肝損傷模型，用以上三種解酒中藥進(jìn)行連續(xù)30天飲服給藥，在第10、20和30天時采樣進(jìn)行ALT、AST和檢測及病理組織學(xué)觀察，評價了三種解酒中藥溶液對酒精性肝損傷的防治效果。

1材料與方法

1.1動物分組與處理

三種解酒中藥溶液，由山東華農(nóng)生物制藥有限公司提供，分別標(biāo)示為A、B和C。A為蟲草多糖溶液；B為蟲草多糖+云芝多糖+猴頭菇多糖混合溶液；C為猴頭菇多糖溶液。56°北京紅星二鍋頭酒，市售。選取健康♂小白鼠，120只，體重22～28g，適應(yīng)飼養(yǎng)1周。隨機(jī)分為5組：A、B、C三個解酒中藥組、白酒灌胃組和正常組。見表1。將中藥原液用蒸餾水分別稀釋成1%溶液（即每1mL含10mg

藥量），按每只鼠每天0.5mg藥量飲服。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 誘發(fā)酒精性肝損傷模型 將56°北京紅星二鍋頭酒用蒸餾水配制成含酒精40% （v/v）的白酒備用。除正常組外，各組在第一周均按9mL/kg灌胃，從第二周起至第30天白酒灌胃量減半（4.5mL/kg），每日上午9：00～10：00間灌胃一次。

1.2.2 采樣與測定 在試驗(yàn)第10、20和30天時，每組隨機(jī)選擇6只小白鼠處死，采集血液1～2mL（制備血清）和肝臟組織。肝組織在0～4℃下用玻璃勻漿器研磨，10000rpm離心10min，取上清液與血清一起于-20℃保存?zhèn)溆?。按生化檢測儀和試劑盒說明書測定。

所有試驗(yàn)組在第15、30天時各組取2只鼠的肝臟進(jìn)行病理切片檢查。

2 結(jié)果與分析

2.1 中藥溶液對酒精性肝損傷小白鼠血清的AST和ALT的影響

試驗(yàn)第10天時，各組小白鼠血清的AST（天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶）和ALT（丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶）的結(jié)果顯示，與正常組比較，白酒灌胃組和A、C中藥組的AST顯著升高（p<0.05），而中藥B組AST雖有升高，但明顯低于其他試驗(yàn)組，表明在第10天時，中藥B組在降低酒精性肝損傷的血清AST指標(biāo)上優(yōu)于中藥A和C。在血清ALT方面，中藥B組對降低ALT指標(biāo)亦優(yōu)于中藥A和C。試驗(yàn)第20天時，監(jiān)測各組小白鼠血清的AST和ALT。在試驗(yàn)第20天時，結(jié)果顯示，中藥B組對降低血清AST和ALT兩方面均優(yōu)于中藥A和C。中藥A效果較差。試驗(yàn)第30天時，監(jiān)測各組小白鼠血清的AST和ALT。試驗(yàn)第30天時，隨著給藥時間的延長，中藥A、B、C均表現(xiàn)良好的降低血清AST和ALT作用，其中中藥B與C相近，而中藥A效果較差。

2.2 病理組織學(xué)檢查結(jié)果

在試驗(yàn)第15、30天時，各組任取2只小白鼠肝臟進(jìn)行病理切片檢查結(jié)果

第15天：

中藥A組：肝臟未見結(jié)締組織增生，肝細(xì)胞胞核清晰，未見明顯退行性變化及壞死；未見明顯出血、淤血等；未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤及其它炎癥變化；未見細(xì)胞實(shí)質(zhì)細(xì)胞異常增殖、未見腫瘤性病變。

中藥B組：肝臟組織結(jié)構(gòu)較清晰，未見結(jié)締組織增生；肝細(xì)胞輕度腫脹，呈輕微顆粒變性，未見壞死；脈管結(jié)構(gòu)清晰，未見明顯出血、淤血等；未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤；未見細(xì)胞實(shí)質(zhì)細(xì)胞異常增殖、未見腫瘤性病變。

中藥C組：肝細(xì)胞腫脹，肝細(xì)胞明顯顆粒變性，少數(shù)細(xì)胞可見壞死；中央靜脈，肝血竇動脈等脈管結(jié)構(gòu)清晰；匯管區(qū)小靜脈可見淤血等血液學(xué)改變；未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤，未見其它炎癥變化；未見細(xì)胞實(shí)質(zhì)細(xì)胞異常增殖、未見腫瘤性病變。

白酒灌胃組：肝臟組織不明顯，肝細(xì)胞嚴(yán)重腫脹，肝細(xì)胞明顯顆粒變性，水泡變性、可見壞死。

正常組：未見結(jié)締組織增生、未見明顯出血、淤血等血液學(xué)改變；未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤；未見細(xì)胞實(shí)質(zhì)細(xì)胞異常增殖、未見腫瘤性病變。

第30天：

中藥A組：未見明顯退行性變化及壞死；未見明顯出血、淤血等血液學(xué)改變；未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤，未見其它炎癥變化；未見細(xì)胞實(shí)質(zhì)細(xì)胞異常增殖、未見腫瘤性病變。

中藥B 組：肝臟小葉間可見少量結(jié)締組織，未見結(jié)締組織增生；肝細(xì)胞輕度腫脹，呈輕微顆粒變性，未見壞死；未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤，未見其它炎癥變化；未見細(xì)胞實(shí)質(zhì)細(xì)胞異常增殖、未見腫瘤性病變。

中藥C組：肝臟小葉間可見少量結(jié)締組織，未見結(jié)締組織增生；肝細(xì)胞輕度顆粒變性及空泡變性，未見明顯出血、淤血等血液學(xué)改變；未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤，未見其它炎癥變化；未見細(xì)胞實(shí)質(zhì)細(xì)胞異常增殖、未見腫瘤性病變。

白酒灌胃組：肝臟組織呈不規(guī)則小葉結(jié)構(gòu)，小葉間可見少量結(jié)締組織，未見結(jié)締組織增生；肝細(xì)胞重度腫脹，肝細(xì)胞明顯顆粒變性，少數(shù)細(xì)胞可見壞死。

正常組：未見明顯退行性變化及壞死；未見明顯出血、淤血等，未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤，未見其它炎癥變化，

3 討論

3.1 AST和ALT是反映肝功能的兩種重要酶，它們含量上升越高表示肝功能受損越嚴(yán)重。本試驗(yàn)前20天中，中藥B的保肝作用明顯優(yōu)于中藥A和C。隨著給藥時間的延長，中藥B與C效果相近，而中藥A效果較差。

3.2 本試驗(yàn)綜合評價表明：在連續(xù)灌服白酒早期，蟲草多糖+云芝多糖+猴頭菇多糖混合溶液的保肝作用優(yōu)于蟲草多糖溶液和猴頭菇多糖溶液。隨著給藥時間的延長，三者均有很好的保肝作用。

參考文獻(xiàn)：

[1] 龔曉健，季暉，盧順高. 2010. 人工蟲草多糖對小鼠免疫功能的影響.中國藥科大學(xué)學(xué)報，31（1）：53～5

[2] 徐航民，謝志慧，張蔚羽等. 2009. 猴頭菇多糖的免疫調(diào)節(jié)作用. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，14（7）：427-428

[3] 廖勝東. 2000. 肝病患者部分酶學(xué)和指血18項(xiàng)指標(biāo)檢測的臨床意義. 臨床薈萃，12（12）：537～539

[4] 吳齤蓀. 1998. 自由基與臨床醫(yī)學(xué)微循環(huán)學(xué)雜志，8（4）：24-26

[5] 楊牧祥，田元祥，姚樹坤等. 2002. 解酒護(hù)肝飲對酒精性肝損傷大鼠血清和肝組織ALT、AST的影響. 河北中醫(yī)，22（10）：793～796