大腸癌組織中ERCC1、TS表達(dá)及臨床意義

【摘要】 目的：探討ERCC1和TS蛋白在大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義。方法：采用免疫組化SP法和組織芯片對(duì)196例大腸癌組織和50例正常大腸切緣組織進(jìn)行ERCC1和TS蛋白表達(dá)水平檢測(cè)，分析兩者與臨床病理特征的關(guān)系。其中129例術(shù)后患者行FOLFOX4方案化療，隨訪3年。結(jié)果：在結(jié)直腸癌中ERCC1及TS表達(dá)均高于正常腸黏膜組織，而與性別、年齡、分化程度、部位無(wú)關(guān)（P>0.05），TS陽(yáng)性表達(dá)率及兩者雙陽(yáng)性表達(dá)率均在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者及TNM Ⅲ期、Ⅳ期患者中明顯升高。ERCC1、TS陰性表達(dá)者3年DFS均分別高于陽(yáng)性表達(dá)者（P<0.05）。結(jié)論：ERCC1和TS蛋白在大腸癌中的陽(yáng)性表達(dá)較高，可能與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移有關(guān)。ERCC1和TS蛋白陰性者可從FOLFOX4化療中獲益。

【關(guān)鍵詞】 ERCC1蛋白； TS 蛋白； 大腸癌； 免疫組化； 3年DFS

大腸癌是常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤，發(fā)病率逐年上升，嚴(yán)重威脅人民健康。大腸癌治療采用手術(shù)、放化療、分子靶向治療等相結(jié)合的綜合治療，腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是影響長(zhǎng)期生存的主要因素。目前分子生物技術(shù)的發(fā)展，為大腸癌的診斷及預(yù)后、個(gè)體化治療提供了有力的保障。筆者收集2009年1-12月安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院一年間行大腸癌根治術(shù)后的196例標(biāo)本，采用免疫組化及組織芯片技術(shù)，檢測(cè)ERCC1和TS蛋白在大腸癌中的表達(dá)，探討其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系，并對(duì)其中129例術(shù)后患者應(yīng)用FOLFOX4方案化療，進(jìn)行3年隨訪，探討ERCC1和TS蛋白的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院2009年1-12月手術(shù)切除的結(jié)直腸癌組織石蠟標(biāo)本196例，患者術(shù)前均未接受放療和化療。其中男112例，女84例，年齡28～83歲，平均59.5歲，病理均為腺癌。129例Ⅱ期、Ⅲ期患者應(yīng)用FOLFOX4方案行術(shù)后輔助化療。其中Ⅱ期患者44例，Ⅲ期患者85例。取50例正常大腸組織作為對(duì)照。

1.2 方法

1.2.1 應(yīng)用免疫組化SP法和組織芯片技術(shù) 按照SP檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)所示步驟進(jìn)行，組織芯片由上海芯超生物科技有限公司制作。ERCC1鼠抗人單克隆抗體、TS鼠抗人單克隆抗體、SP檢測(cè)試劑盒及DAB顯色液，均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn) ERCC1以胞核及胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色，TS以胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色，選取5個(gè)高倍視野（400×），每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)腫瘤細(xì)胞，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞百分比，取其均值。參照Wachters等[1]的方法：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分率≤10%或不表達(dá)，記作陰性，>10%記作陽(yáng)性。門(mén)診復(fù)查、電話(huà)隨訪等，隨訪3年，記錄DFS。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用 字2檢驗(yàn)，F(xiàn)isher精確概率法及Kaplan-Meier法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

筆者的研究顯示ERCC1及TS蛋白在大腸癌中的表達(dá)均高于正常大腸組織。在大腸癌組織中ERCC1表達(dá)與性別、年齡、分化程度、部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期無(wú)關(guān)（P>0.05），而TS蛋白陽(yáng)性表達(dá)與淋巴及轉(zhuǎn)移、腫瘤進(jìn)展分期明顯相關(guān)。Yuanming等[5]報(bào)道ERCC1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌患者中的表達(dá)率降低，與筆者的研究不太一致。

本研究顯示TS蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期患者中陽(yáng)性表達(dá)分別高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期為Ⅰ、Ⅱ期者（P<0.05），提示TS蛋白陽(yáng)性表達(dá)率的升高，與結(jié)腸癌變進(jìn)展、轉(zhuǎn)移有關(guān)。

ERCC1、TS、MMR單一指標(biāo)的檢測(cè)能否作為判斷結(jié)腸癌Ⅱ、Ⅲ期患者預(yù)后的指標(biāo)，研究報(bào)道不一[6-9]。筆者的研究顯示ERCC1和TS共同陽(yáng)性表達(dá)（表4）與結(jié)腸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期有明顯相關(guān)性，其表達(dá)率的升高提示腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移性增加。Ohrling等[10]報(bào)道在Ⅲ期結(jié)腸癌患者中聯(lián)合檢測(cè)錯(cuò)配修復(fù)蛋白（MMR）和TS表達(dá)情況相比檢測(cè)單一指標(biāo)對(duì)5-Fu為基礎(chǔ)的化療方案的敏感預(yù)見(jiàn)性更好。聯(lián)合檢測(cè)ERCC1蛋白和TS蛋白表達(dá)可能對(duì)結(jié)腸癌術(shù)后的FOLFOX輔助化療更有指導(dǎo)意義，筆者的研究顯示：ERCC1和TS蛋白陰性者輔助化療后的3年DFS分別明顯高于ERCC1和TS蛋白陽(yáng)性者，能從FOLFOX4化療中獲益。Li等[11]報(bào)道ERCC1陰性者大腸癌的5年生存率高于陽(yáng)性者，與筆者的3年DFS隨訪結(jié)果一致。

隨著腫瘤分子學(xué)的研究深入，結(jié)直腸癌的病理生理特點(diǎn)及其預(yù)后判斷和個(gè)體化診療，將會(huì)有更進(jìn)一步的發(fā)展。

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（收稿日期：2013-05-13） （本文編輯：歐麗）