摘要:對(duì)貴州不同種植區(qū)域的白術(shù)白絹病菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)菌株進(jìn)行不同溫度培養(yǎng),比較菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)核量、菌核萌發(fā)情況。結(jié)果表明,來(lái)源于不同種植區(qū)域的白術(shù)白絹病菌菌株在相同培養(yǎng)溫度條件下菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)核量、菌核萌發(fā)率存在較大差異;在適宜溫度范圍內(nèi),菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)核量、菌核萌發(fā)率與培養(yǎng)溫度相關(guān);菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)核產(chǎn)量和菌核萌發(fā)率相關(guān)關(guān)系不明顯。
關(guān)鍵詞:溫度;白術(shù);白絹病菌;貴州;不同區(qū)域
中圖分類(lèi)號(hào):S432.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A 文章編號(hào):0439-8114(2013)16-3839-03
白術(shù)(Atractylodes macrocephala Koidz.)是菊科多年生草本植物,以根莖入藥,是常用中藥材[1,2],為中醫(yī)“參、術(shù)、苓、甘”四大名貴藥材之一。作為中國(guó)白術(shù)主產(chǎn)區(qū)之一的貴州省,貴陽(yáng)市、遵義市、黔南州等地均有大面積的種植基地。但在白術(shù)的種植過(guò)程中白絹病危害較重[3],常導(dǎo)致減產(chǎn)甚至絕收。
在前期的研究[4,5]中發(fā)現(xiàn),不同種植區(qū)域采集的白術(shù)白絹病菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)由于寄主種質(zhì)資源、栽培及環(huán)境條件各異,在生長(zhǎng)狀況、致病力、抗藥性等各方面發(fā)生分化。本研究在實(shí)驗(yàn)室條件下系統(tǒng)地研究了溫度對(duì)貴州不同種植區(qū)域白術(shù)白絹病菌的影響,以期為研究白術(shù)白絹病的發(fā)生規(guī)律、環(huán)境與病原菌生理分化的關(guān)系提供依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 供試菌株
白術(shù)白絹病菌1、2、3、4號(hào)菌株,分別采自貴州省遵義市松林鎮(zhèn)、團(tuán)溪鎮(zhèn)、永樂(lè)鎮(zhèn)和務(wù)川縣。前期培養(yǎng)菌絲長(zhǎng)勢(shì)表現(xiàn)出一定的差異(圖1)。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 不同溫度菌絲生長(zhǎng)及菌株產(chǎn)核情況測(cè)定 菌株在PSA培養(yǎng)基培養(yǎng)2 d后用打孔器從菌落邊緣打取直徑5.00 mm的菌餅,接種于PSA培養(yǎng)基,恒溫箱中培養(yǎng)(溫度分別為5、10、15、20、25、30、35、40 ℃)2 d后用十字交叉法測(cè)量菌落直徑,計(jì)算菌絲平均生長(zhǎng)速率,10 d后測(cè)定菌株產(chǎn)核量[6,7]。
1.2.2 不同溫度菌核萌發(fā)情況測(cè)定 供試菌株的菌核接種于PSA培養(yǎng)基,每個(gè)培養(yǎng)皿20粒,恒溫箱中(溫度分別為5、10、15、20、25、30、35、40 ℃)培養(yǎng)5 d后測(cè)定菌核萌發(fā)率[7,8]。
1.3 統(tǒng)計(jì)分析
采用DPS 3.01軟件協(xié)助進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
2 結(jié)果與分析
2.1 溫度對(duì)菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)核量的影響
不同溫度菌絲生長(zhǎng)及菌株產(chǎn)核情況見(jiàn)圖2、表1。從圖2、表1可看出,4株供試菌株在15~35 ℃均能生長(zhǎng),25~30 ℃下菌絲生長(zhǎng)較快,10 ℃及以下和40 ℃菌絲不能生長(zhǎng)。但4株供試菌株在相同溫度下,生長(zhǎng)速率存在顯著或極顯著差異,1、2、3號(hào)菌株菌絲生長(zhǎng)最適溫度為30 ℃,生長(zhǎng)速率分別為29.60、30.75、28.65 mm/d,4號(hào)菌株菌絲在生長(zhǎng)最適溫度(25 ℃)生長(zhǎng)速率僅為17.75 mm/d。供試菌株在20 ℃及以下和40 ℃不能產(chǎn)生菌核,25~35 ℃能產(chǎn)生菌核,但最適溫度產(chǎn)核量不同菌株差異明顯(圖3)。1、3號(hào)菌株產(chǎn)菌核最適溫度為25 ℃,產(chǎn)核量分別為375.00、456.66個(gè)/皿;2、4號(hào)菌株產(chǎn)生菌核最適溫度為35 ℃,產(chǎn)核量分別為385.00、89.33個(gè)/皿。在適宜培養(yǎng)溫度范圍內(nèi),菌絲的生長(zhǎng)速率、菌株產(chǎn)核量和溫度相關(guān)。
2.2 溫度對(duì)菌核萌發(fā)的影響
不同溫度菌核萌發(fā)情況見(jiàn)圖4、表2。從圖4、表2可看出,在15~35 ℃時(shí)4株供試菌株菌核均能萌發(fā),35 ℃供試菌株菌核均可100%萌發(fā),10 ℃及以下溫度和40 ℃菌核均不能萌發(fā)。在除35 ℃外的適宜菌核萌發(fā)溫度條件下,供試菌株菌核萌發(fā)率存在顯著或極顯著差異。1號(hào)菌株在20、25、30 ℃菌核萌發(fā)率低,分別為5%、10%和15%,極顯著低于其他菌株在相同溫度條件下的萌發(fā)率。4號(hào)菌株表現(xiàn)出較高的萌發(fā)率,15、20、25、30 ℃的菌核萌發(fā)率分別為95%、95%、100%、100%。在適宜培養(yǎng)溫度范圍內(nèi),菌株菌核萌發(fā)率和溫度呈正相關(guān)關(guān)系。菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)核量與菌核萌發(fā)率之間相關(guān)關(guān)系不明顯,菌絲長(zhǎng)勢(shì)較弱、產(chǎn)核量較低的4號(hào)菌株在相同溫度條件下菌核萌發(fā)率明顯高于生長(zhǎng)快、產(chǎn)核量高的1號(hào)菌株。
3 小結(jié)與討論
由于白絹病菌能侵染500種以上的寄主[9],侵染所致的白絹病是熱帶、亞熱帶地區(qū)作物及林木的重要病害。該病害為害及流行對(duì)氣候條件要求嚴(yán)格,病害的發(fā)生受溫度影響較大。貴州省為典型亞熱帶濕潤(rùn)性季風(fēng)氣候[10],適宜于該病原菌的侵染。溫度對(duì)病菌菌絲的生長(zhǎng)有顯著影響[11],環(huán)境因素促使病原菌分化,來(lái)源于不同種植區(qū)域的白術(shù)白絹病菌在致病力等方面均表現(xiàn)出差異和分化。本研究結(jié)果表明,白術(shù)白絹病菌不同種植區(qū)域的菌株表現(xiàn)出較大差異。供試菌株菌絲生長(zhǎng)率、產(chǎn)核量與溫度相關(guān),菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)核量和菌核萌發(fā)率相關(guān)關(guān)系不明顯。
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