桑杏平喘顆粒對小白鼠的急性毒性試驗

摘要：為了解桑杏平喘顆粒對動物的毒性，對其進(jìn)行了小白鼠的急性毒性試驗。將50只昆明系小白鼠分成5組，每組10只，雌雄各半，分別按生藥250.00 g/（kg·bw）、300.00 g/（kg·bw）、360.00 g/（kg·bw）、432.00 g/（kg·bw）、518.40 g/（kg·bw）灌胃給藥，其半數(shù)致死量LD50為319.16 g/（kg·bw）。結(jié)果表明，桑杏平喘顆粒是一種安全的、無毒的復(fù)方中藥制劑。

關(guān)鍵詞：桑杏平喘顆粒；小白鼠；急性毒性；半數(shù)致死量

中圖分類號：S853.75 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）14-3373-02

近年來豬場的規(guī)?；B(yǎng)殖程度越來越高，但飼養(yǎng)管理方式和衛(wèi)生條件仍然相對落后，伴隨而來的問題是豬病復(fù)雜化趨勢日益嚴(yán)重，給養(yǎng)殖戶造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬支原體肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine，MPS）是由豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae， Mhp）引起的一種接觸性、慢性呼吸道疾病，以咳嗽、喘氣、呈腹式呼吸為特征性癥狀，在豬群中可造成地方性流行；患豬生長發(fā)育遲緩，飼料利用率降低，若不及時治療，易繼發(fā)混合感染豬巴氏桿菌、放線桿菌、圓環(huán)病毒（PCV）、豬流感病毒、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒等多種傳染病，最后導(dǎo)致成豬呼吸道疾病綜合征（PRDC），對養(yǎng)豬生產(chǎn)危害很大，給該病的免疫和防治帶來了很大困難。另外臨床上常用的豬支原體減毒疫苗存在產(chǎn)量低、成本高、反應(yīng)較大等缺陷，采用胸腔注射的免疫途徑也不容易被一般用戶所接受， 因而在推廣應(yīng)用上受到限制。而中藥通過對動物的生理機(jī)能進(jìn)行綜合調(diào)理，提高機(jī)體非特異性免疫力，發(fā)揮其抗菌、抗病毒、抗應(yīng)激的自身優(yōu)勢，從而可以有效地防控和治療該病，并取得了一定的效果；且兼有低毒、低殘留、無耐藥性等優(yōu)點，符合當(dāng)前人們對畜產(chǎn)品安全的需求。

桑杏平喘顆粒是中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所自主研發(fā)的，根據(jù)中獸醫(yī)辨證觀和整體觀，選擇具有清熱宣肺、止咳平喘功能的桑白皮、杏仁、石膏、甘草等中藥辨證組方而成，利用現(xiàn)代制藥工藝研制而成的用于防治豬支原體肺炎的中獸藥新制劑。為了解其對動物的毒性反應(yīng)及為臨床安全用藥提供科學(xué)的數(shù)據(jù)支持，以小白鼠為試驗動物進(jìn)行了急性毒性試驗，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

昆明系小白鼠，18～22 g，50只，雌雄各半，購自蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物中心。

桑杏平喘顆粒來自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所。試驗前將桑杏平喘顆粒用滅菌水配成相當(dāng)于原藥材10 g/mL的濃溶液，待用。

1.2 方法

將50只小白鼠在實驗室條件下適應(yīng)性飼喂3 d后，隨機(jī)分成5組，每組10只，雌雄各半。禁食8 h（不禁水）后，分別按生藥250.00 g/（kg·bw）、300.00 g/（kg·bw）、360.00 g/（kg·bw）、432.00 g/（kg·bw）、518.40 g/（kg·bw）灌胃給藥，1次給藥量≤0.8 mL，低劑量組一次給藥，高劑量組可以在24 h內(nèi)分兩次給藥。觀察給藥后小白鼠的精神、行為、飲食欲等情況，記錄小白鼠死亡時間和數(shù)量，剖檢死亡小白鼠，觀察各臟器組織的病理變化。試驗共7 d，試驗結(jié)束后統(tǒng)計小白鼠的死亡數(shù)。用SPSS 13.0軟件計算桑杏平喘顆粒對小白鼠的LD50及其95%可信限。

2 結(jié)果與分析

用灌胃針經(jīng)口灌入已制備好的藥物后，大部分小白鼠表現(xiàn)靜伏少動，自發(fā)活動減少，行動遲緩，個別小白鼠出現(xiàn)運(yùn)動失調(diào)，呼吸急促或明顯的神經(jīng)癥狀，隨著劑量的增大其癥狀加劇。小白鼠死亡前出現(xiàn)后肢抽搐癥狀，被毛粗亂，皮膚發(fā)紺，呼吸困難。7 d后存活的小白鼠飲食欲良好，精神好轉(zhuǎn)，活動正常，被毛柔順而有光澤。死亡的時間主要集中在灌藥后1～2 h，解剖觀察主要的臟器病變?yōu)椋菏改c出血，肝臟顏色發(fā)暗，有不明顯的出血、淤血，其他臟器無明顯的眼觀病變。7 d之內(nèi)5組小鼠分別死亡0、4、9、9、10只，見表1。

由SPSS 13.0軟件通過Bliss方法計算出桑杏平喘顆粒對小白鼠的LD50及其95%可信限，LD50為319.16 g/（kg·bw），95%的可信限為270.31～363.68 g/（kg·bw）。

3 小結(jié)與討論

豬支原體肺炎是由豬肺炎支原體引起的一種慢性呼吸道疾病，感染率高，流行快，新發(fā)病的豬群中常呈暴發(fā)性流行，發(fā)病率和死亡率都很高，且多為急性經(jīng)過；老疫區(qū)病豬多呈慢性經(jīng)過，易與巴氏桿菌、豬圓環(huán)病毒等混合感染，長期攜帶致病微生物并向外傳播，所以豬支原體肺炎是目前及今后很長一段時間內(nèi)影響?zhàn)B豬生產(chǎn)的主要疾病之一，也是全球養(yǎng)豬界公認(rèn)的最難凈化的疫病[1]。目前，化學(xué)藥物防治的效果不理想，初期會有一定的防治效果，但是伴隨這些藥物的長期使用，病原菌的耐藥性會大大降低藥物的有效性。同時，大量使用化學(xué)藥物造成的動物產(chǎn)品殘留問題日益引起人們的重視，難以滿足人們對畜產(chǎn)品安全性的要求?？股刂荒芤种浦гw生長，無法完全清除，使用藥物是為了緩解病情，降低繼發(fā)感染，一旦停止用藥容易復(fù)發(fā)，并且支原體的耐藥性強(qiáng)，在肺部黏膜表面的有效濃度低，因此抗生素的效果很難保證[2]。使用疫苗也可以在一定程度上起到預(yù)防的作用，目前國內(nèi)自主研發(fā)的相關(guān)疫苗只有弱毒疫苗，但是該疫苗由于需要胸腔接種所以不易于推廣普及，進(jìn)口的滅活疫苗雖易操作但成本過高[3]。

桑杏平喘顆粒其方劑由桑白皮、杏仁、石膏、甘草等中藥組成，全方具有清肺平喘、宣泄郁熱、化痰止咳的功效，集石膏的清熱解毒、杏仁的止咳平喘、桑白皮的瀉肺平喘為一體，組方中其他中藥則有清肺止咳、降逆止嘔、排膿消癰等功效，適用于豬支原體肺炎咳嗽和喘氣等癥狀的治療。

現(xiàn)代藥理作用表明，NO是機(jī)體生理、生化功能的重要調(diào)節(jié)物質(zhì)，在調(diào)節(jié)支氣管平滑肌張力和治療哮喘發(fā)病方面也有重要作用，桑白皮丙酮提取物可以通過提高支氣管NO含量，松弛支氣管平滑肌，對抗乙酰膽堿引起的支氣管痙攣性哮喘發(fā)作[4]。韋媛媛等[5-7]研究了桑白皮總黃酮的鎮(zhèn)咳、祛痰及平喘作用，發(fā)現(xiàn)桑白皮總黃酮可顯著抑制濃氨水、SO2所致小白鼠咳嗽潛伏期，減少氨水引咳次數(shù)，拮抗乙酰膽堿對小白鼠肺支氣管的收縮作用；延長組胺、乙酰膽堿引喘潛伏期和豚鼠卵蛋白性哮喘潛伏期，降低哮喘豚鼠嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）的浸潤，并且對組胺引發(fā)的離體豚鼠氣管收縮有抑制作用，對支氣管痙攣顯示出解痙作用?？嘈尤受諆?nèi)服后，可被體內(nèi)苦杏仁酶分解為氫氰酸和苯甲醛，氫氰酸對呼吸中樞可產(chǎn)生一定的抑制作用，能使呼吸加深，咳嗽減輕[8]。石膏可抑制體溫中樞的亢進(jìn)而產(chǎn)生有力的解熱作用，同時發(fā)汗中樞也被抑制，故解熱而不發(fā)汗，無傷津之弊[9]。甘草調(diào)和諸藥，《千金方》記載“甘草能解百毒”，可通過其所含化學(xué)成分吸附毒物或與毒物結(jié)合，使毒物轉(zhuǎn)化為毒性較小或無毒性的物質(zhì)以達(dá)到解毒之功能，另外其所具有的腎上腺皮質(zhì)激素樣作用可提高機(jī)體對外界刺激的適應(yīng)性并能起到保護(hù)機(jī)體作用[10]。故由桑白皮、杏仁、石膏、甘草等組成的桑杏平喘顆粒具有松弛支氣管平滑肌、清熱解毒、鎮(zhèn)咳平喘等作用，對于豬支原體肺炎具有良好的療效。

昆明系小白鼠的急性毒性試驗表明，桑杏平喘顆粒對小白鼠的LD50為319.16 g/（kg·bw），農(nóng)業(yè)部《新獸藥一般毒性試驗技術(shù)要求》判定，桑杏平喘顆粒安全無毒。通過以上試驗結(jié)果證明，桑杏平喘顆粒是一種安全無毒產(chǎn)品，可安全地應(yīng)用于獸醫(yī)臨床。

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