初均速法預(yù)測巖白菜醇提液的穩(wěn)定性研究

摘要：目的：用化學(xué)動力學(xué)方法預(yù)測巖白菜醇提液的穩(wěn)定性，為其質(zhì)量評價(jià)提供依據(jù)。方法：選擇9個(gè)溫度進(jìn)行恒溫加速實(shí)驗(yàn)，用紫外-可見分光光度法測定巖白菜素類的含量，計(jì)算巖白菜醇提液的室溫貯存期和降解反應(yīng)的活化能。結(jié)果：進(jìn)行回歸分析得出室溫下巖白菜醇提液的貯存期是20d，降解反應(yīng)的活化能是8715kJ·mol-1。結(jié)論：巖白菜醇提液是巖白菜類藥物的中間產(chǎn)物，不可久貯且貯放溫度不宜高，以保證藥物質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：初均速法；巖白菜；巖白菜素；穩(wěn)定性

中圖分類號：R284文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1007-2349（2013）02-0047-02

巖白菜為虎耳草科巖白菜屬植物巖白菜Bergenia purpurascens（Hookfet Thoms）Engl的干燥根莖，又名滇巖白菜、巖七等，主要分布于滇西北、滇中，四川西部、西藏東南部也有分布。巖白菜有鎮(zhèn)咳祛痰功效，主要用于慢性支氣管炎的治療，此外，還具有良好的抗炎、抗心律失常、抗病毒、護(hù)肝作用等[1]，已制成多種劑型上市。

巖白菜主要有效成分巖白菜素屬于異香豆精類化合物[2]，分子結(jié)構(gòu)中含有二個(gè)酚羥基和一個(gè)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，易氧化變質(zhì)或開環(huán)水解，給制劑生產(chǎn)過程帶來一定的難度，甚至影響產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。本文采用初均速法，研究不同溫度下巖白菜醇提液中巖白菜素類的含量變化，并根據(jù)回歸方程計(jì)算了巖白菜醇提液的室溫貯存期和降解反應(yīng)的活化能。

1材料與儀器

巖白菜藥材購于昆明菊花村藥材市場，經(jīng)云南中醫(yī)學(xué)院楊樹德教授鑒定為虎耳草科巖白菜屬植物巖白菜Bergenia purpurascens（Hookfet Thoms）Engl的干燥根莖。巖白菜素對照品購于中國藥品生物制品檢定所。

所用試劑均為分析純。

UV-2450紫外-可見分光光度計(jì)（日本島津），D-101大孔吸附樹脂（天津農(nóng)藥股份有限公司樹脂分公司），SYP型玻璃恒溫水?。暇┥Ａ﹄娮釉O(shè)備廠），BUCHI-R-200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士）。

2方法與結(jié)果

21對照品溶液的制備精密稱取巖白菜素對照品31 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解，并定容至刻度，即得6200 μg/mL的巖白菜素對照品溶液。

22供試品溶液的制備[3]待測液用大孔吸附樹脂吸附30 min，分別用去離子水和20%乙醇洗脫，精密吸取乙醇洗脫液適量置10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，即得。

23線性范圍考察精密吸取巖白菜素對照品溶液（6200μg/mL）13、22、31、40、49mL置10mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，以甲醇為空白對照，在274nm處測定吸光度[4]，以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度c為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析，得出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A=002347c+000534，相關(guān)系數(shù)r=099992，表明巖白菜素對照品在806～3038 μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

24精密度試驗(yàn)取同一濃度巖白菜素對照品溶液連續(xù)測定5次，結(jié)果RSD=020%，表明儀器精密度良好。

25穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液在0、30 min、1、2、4 h時(shí)測定，結(jié)果RSD為117%，表明供試品溶液在4h內(nèi)穩(wěn)定。

26樣品含量測定

261巖白菜醇提液的制備取巖白菜粗粉適量，精密稱定，加10倍50%乙醇回流提取3次，每次30 min，合并濾液，減壓濃縮至乙醇回收完全，定容后即得。

262恒溫加速實(shí)驗(yàn)及含量測定精密吸取巖白菜醇提液適量，分別置于不同溫度的恒溫水浴中密閉加熱，按表1進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。定時(shí)取樣，取出后迅速冷卻，按22項(xiàng)下方法制備供試品溶液并在（275±1）nm的波長處測定吸光度，計(jì)算含量，結(jié)果見表1。實(shí)驗(yàn)設(shè)置3個(gè)平行組。

表1恒溫加速實(shí)驗(yàn)

27數(shù)據(jù)處理反應(yīng)初均速是反應(yīng)開始時(shí)的平均速度，即反應(yīng)開始時(shí)單位時(shí)間內(nèi)藥物濃度的變化。溫度對反應(yīng)初均速的[FL）][SD1，1][FQ（19。175mm，X，DY-W][SQ+1mm][CD=175mm][FL（K8mm]影響符合Arrhenius指數(shù)規(guī)律，將此直線外推至室溫，則可求得室溫貯存期[5]。

初均速v0=[SX（]c0-ci[]ti[SX）]，式中c0=2312μg/mL，ci為ti時(shí)間對應(yīng)的濃度，計(jì)算結(jié)果見表1。以lnv0-1/T進(jìn)行線性回歸，得回歸方程

lnv0=-10482[SX（]1[]T[SX）]+29934（r=-09927）

計(jì)算活化能：E=-8314×（-10482）×10-3=8715kJ·mol-1

推算室溫（29815K）貯存期（分解10%的時(shí)間）：

ln[SX（]01c0[]τ09[SX）]=-10482[SX（]1[]29815[SX）]+29934

計(jì)算得：τ09=4288h=20d

3小結(jié)與討論

用初均速法預(yù)測巖白菜醇提液的穩(wěn)定性，數(shù)據(jù)處理結(jié)果線性關(guān)系良好，得出的活化能8715 kJ·mol-1與中藥典型活化能文獻(xiàn)值836 kJ·mol-1接近；推算出室溫下巖白菜醇提液的貯存期是20 d，提示巖白菜醇提液不可長時(shí)間貯存，貯放應(yīng)盡可能在較低溫度下進(jìn)行。

影響中成藥產(chǎn)品質(zhì)量的主要因素有藥材的質(zhì)量、生產(chǎn)工藝以及有效成分的穩(wěn)定性，巖白菜制劑在生產(chǎn)工藝中常采用醇提制膏而成，生產(chǎn)中得到的醇提液應(yīng)盡快制成最終產(chǎn)品，避免巖白菜素在醇提液中分解，以保證藥品質(zhì)量。[KH*1D]

參考文獻(xiàn)：

[1]王剛，麻兵繼巖白菜素的研究概況[J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，21（6）：59～62

[2]云南省藥物研究所云南重要天然藥物[M].昆明：云南科技出版社，2006：276～283

[3]劉海周，孫海林，李文軍，等巖白菜中巖白菜素的純化及提取工藝研究[J].云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，34（2）：22～25

[4]國家藥典委員會中華人民共和國藥典[S]（一部）北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：384

[5]龐貽慧，魯純素藥物穩(wěn)定性預(yù)測方法[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1984：76～80[JX*1]