新型熱熔壓敏膠制備的傷科貼膏的薄層鑒別

摘要：目的：對(duì)以新型熱熔壓敏膠為基質(zhì)制備的傷科貼膏進(jìn)行薄層鑒別，以控制其質(zhì)量。方法：采用薄層色譜法分別對(duì)處方中黃連、大黃、梔子、地榆進(jìn)行鑒別。結(jié)果：黃連、大黃、梔子、地榆的薄層色譜具有鑒別特征、斑點(diǎn)清晰、陰性對(duì)照無干擾。結(jié)論：鑒別方法靈敏度高、專屬性強(qiáng)、操作簡便，可用于傷科貼膏的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：傷科貼膏；熱熔壓敏膠；薄層色譜法

中圖分類號(hào)：R9442文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-2349（2013）02-0044-03

傷科貼膏是佛山市中醫(yī)醫(yī)院在傳統(tǒng)驗(yàn)方渭良傷科散的基礎(chǔ)上，以新型熱熔壓敏膠為基質(zhì)制備的新一代貼膏劑，傳統(tǒng)的貼膏主要由橡膠及其他輔料組成，這種以熱熔壓敏膠為基質(zhì)的經(jīng)皮給藥制劑在市面上仍較少見。熱熔壓敏膠[1]（hot melt pressure sensitive adhesive，HMPSA）是繼溶劑型和乳液型壓敏膠之后的第3代壓敏膠產(chǎn)品，以熱塑性聚合物為主體成分，兼有熱熔和壓敏雙重特性，在制備時(shí)不加入有機(jī)溶劑，在熔融狀態(tài)下進(jìn)行涂布，冷卻固化后施加輕度指壓即能快速粘接，同時(shí)又能夠較易地被剝離，不污染被粘物表面。由于不含有機(jī)溶劑，熱熔壓敏膠制備的貼劑可以減少基質(zhì)和藥物之間的相互作用[1]，利于藥物在基質(zhì)中的釋放，同時(shí)對(duì)皮膚的刺激性也大大低于天然橡膠；另一方面，熱熔膠在制備時(shí)無需揮發(fā)有機(jī)溶劑，特別適合制備含有易揮發(fā)藥物的中藥貼劑，因此，熱熔膠在中藥貼劑新劑型的研發(fā)中受到越來越多的重視，我國已把熱熔膠粘劑的研究作為“十一五”發(fā)展的重點(diǎn)[2]。新制劑既保留了原劑型的療效和經(jīng)皮給藥的特點(diǎn)，又克服了外用散劑使用不便的缺點(diǎn)，受到廣大醫(yī)護(hù)人員和患者的歡迎。

[KG（0.15mm]傷科貼膏由大黃、黃連、黃柏、梔子等7味中藥組成，具有解毒消炎、散瘀消腫的功效，臨床主要用于跌打扭傷挫傷、瘀血及無名腫毒等，其療效確切、不良反應(yīng)少，是骨傷科疾病的良藥。為了保證產(chǎn)品的質(zhì)量，筆者對(duì)傷科貼膏的薄層鑒別方法進(jìn)行了研究，其中大黃、黃連、梔子、地榆4味中藥的薄層鑒別方法靈敏度高、專屬性強(qiáng)、陰性無干擾，可用于控制產(chǎn)品的質(zhì)量。[KG）]

1儀器和試藥

11儀器ZF-90型暗箱式紫外透射儀（上海顧村電光儀器廠），KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），電熱數(shù)字顯示恒溫水浴鍋（上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司）

12試藥黃連對(duì)照藥材（120913-200407）、大黃對(duì)照藥材（121249-200402）、大黃素對(duì)照品（110756-200110）、梔子對(duì)照藥材（120986-200303）、梔子苷對(duì)照品（110749-200512）、地榆對(duì)照藥材（121286-200402）、沒食子酸對(duì)照品（110831-200803），均由中國藥品生物制品檢定所提供；薄層層析硅膠G（化學(xué)純，青島海洋化工有限公司制造，批號(hào)：20100116）、薄層層析硅膠H（化學(xué)純，青島海洋化工有限公司制造，批號(hào)：00091208）；傷科貼膏（批號(hào)：301K1、301K2、301K3，由佛山市中醫(yī)院制劑中心提供）；各藥材，由廣州至信中藥飲片有限公司提供；所用試劑均為分析純，所用水為蒸餾水。

2方法與結(jié)果

21黃連的薄層鑒別取本品二分之一貼，剪成小塊，除去蓋襯，加無水乙醇30 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液置水浴上蒸至體積不再減少，殘?jiān)铀? mL使溶解，用乙醚10 mL萃取1次，棄去乙醚液，水層蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。另取黃連對(duì)照藥材002 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。按處方比例稱取缺黃連的各藥材，按工藝制成不含黃連的陰性樣品，同供試品溶液制備方法制成缺黃連陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，分別吸取供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各5 μL、對(duì)照藥材溶液2 μL，點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-濃氨溶液（6∶3∶15∶15∶05）為展開劑[3]，置氨蒸氣預(yù)飽和的層析缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯4個(gè)相同顏色的黃色熒光主斑點(diǎn)，陰性對(duì)照僅在對(duì)照藥材其中一個(gè)斑點(diǎn)相應(yīng)位置有微弱的斑點(diǎn)，不干擾其他3個(gè)斑點(diǎn)的檢視。結(jié)果見圖1。

22大黃的薄層鑒別取本品1貼，剪成小塊，除去蓋襯，加甲醇50 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸至體積不再減少，殘?jiān)?%氫氧化鈉溶液10 mL使溶解，移至分液漏斗中，用乙醚10 mL萃取一次，分取堿水層，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6～7，加鹽酸1 mL，置水浴上加蓋加熱30 min，立即冷卻，用乙醚分兩次振搖提取，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥材01 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含02 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。按處方比

例稱取缺大黃的各藥材，按工藝制成不含大黃的陰性樣品，同供試品溶液制備方法制成缺大黃陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，分別吸取上述四種溶液各2 μL，點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠H薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（30∶10∶05）為展開劑[3]，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖2。

23梔子的薄層鑒別取本品2貼，剪成小塊，除去蓋襯，加水100 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液用乙醚洗滌2次，每次30 mL，棄去乙醚液，再用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。另取梔子對(duì)照藥材05 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取梔子苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含4 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。按處方比例稱取缺梔子的各藥材，按工藝制成不含梔子的陰性樣品，同供試品溶液制備方法制成缺梔子陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，分別吸取上述供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各5 μL，對(duì)照藥材及對(duì)照品溶液各3 μL，點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5∶5∶1∶1）為展開劑[4]，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在110℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖3。

24地榆的薄層鑒別取本品2貼，剪成小塊，除去蓋襯，加10%鹽酸溶液100 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液用鹽酸飽和的乙醚萃取2次，每次30 mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。另取地榆對(duì)照藥材1 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取沒食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含05 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。按處方比例稱取缺地榆的各藥材，按工藝制成不含地榆的陰性樣品，同供試品溶液制備方法制成缺地榆陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，分別吸取上述供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各5 μL，對(duì)照藥材及對(duì)照品溶液各3 μL，點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯（用水飽和）-乙酸乙酯-甲酸（6∶3∶1）[4]為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖4。

3討論

[KG（0.1mm]熱熔壓敏膠是目前研發(fā)成功的代替天然橡膠的新型膠黏劑，以苯乙烯-異戊二烯-苯乙烯（SIS）嵌段聚合物為主體成分[5]，以此為基質(zhì)制備的貼膏劑既能保持傳統(tǒng)橡膠膏劑的特性又能減少對(duì)皮膚的刺激從而降低不良反應(yīng)，同時(shí)也克服了中藥制成巴布劑用于人體時(shí)遇水易脫色、粘貼不牢的缺點(diǎn)，是極有發(fā)展前景的貼膏劑基質(zhì)，也是“十一五”發(fā)展重點(diǎn)。在以其為基質(zhì)的貼膏劑的質(zhì)量控制中，如何有效地提取出藥物成分而不帶入基質(zhì)或?qū)⒒|(zhì)分離是關(guān)鍵，在實(shí)驗(yàn)過程中利用超聲方法對(duì)樣品進(jìn)行提取不但簡便快捷，還可減少基質(zhì)的引入，再分別采用萃取、使用酸或堿提取等方法可減少其他成分的干擾。[KG）]

由于傷科貼膏中同時(shí)有黃連、黃柏兩味中藥，黃連含有黃連堿、表小檗堿、小檗堿、巴馬汀（圖1中自上而下4個(gè)熒光斑點(diǎn)），黃柏則含有小檗堿、巴馬汀[2]，兩者含相同的化學(xué)成分——小檗堿、巴馬汀，故在黃連的薄層鑒別中采用對(duì)照藥材作對(duì)照，其中的黃連堿、表小檗堿陰性對(duì)照無干擾，仍可鑒別出黃連；若鑒別黃柏則有干擾。黃連的薄層鑒別曾采用《中國藥典》2010版一部該品種項(xiàng)下規(guī)定的展開劑，但效果不理想，經(jīng)試驗(yàn)，采用甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-濃氨溶液（6∶3∶15∶15∶05）展開，斑點(diǎn)分離效果滿意。

鑒別地榆時(shí)供試品的提取曾采用《中國藥典》2010年版一部地榆項(xiàng)下的提取方法：10%鹽酸的50%甲醇溶液提取，濾過，濾液用鹽酸飽和的乙醚萃取，發(fā)現(xiàn)液體不能分層，后根據(jù)需鑒別成分的性質(zhì)采用10%鹽酸溶液對(duì)其進(jìn)行提取，效果理想。另有報(bào)道以沒食子酸作為對(duì)照品對(duì)地榆進(jìn)行鑒別，由于沒食子酸也存在于其他藥材，故專屬性不高，轉(zhuǎn)而采用自制的地榆苷-I作為對(duì)照品[6]。對(duì)傷科貼膏來說，由于陰性對(duì)照無干擾，且地榆苷-I對(duì)照品較難購得，故仍采用沒食子酸作為對(duì)照品。

大黃的薄層鑒別曾采用《中國藥典》2010版一部該品種項(xiàng)下規(guī)定的展開劑，但效果不理想，經(jīng)試驗(yàn)，采用正己烷-乙酸乙酯-甲酸（30：10：05）展開，斑點(diǎn)分離效果滿意。另外筆者分別在紫外光燈365nm及254nm下對(duì)大黃薄層色譜進(jìn)行檢視，發(fā)現(xiàn)在254nm下的熒光斑點(diǎn)更清晰明亮，對(duì)比度更高，已可清晰地對(duì)大黃進(jìn)行鑒別，可省卻氨熏這一步驟。

參考文獻(xiàn)：

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