胺碘酮對兔心肌缺血再灌注后血清SOD和MDA影響

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(1 邯鄲市第一醫(yī)院心內(nèi)科，河北 邯鄲 056002； 2 河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院)

無復(fù)流是指急性心肌梗死心外膜冠狀動脈再通后，心肌組織水平的再灌注不完全，甚至無再灌注的現(xiàn)象[1]。無復(fù)流發(fā)生機制尚不完全清楚，但有研究結(jié)果表明，氧自由基可能參與無復(fù)流形成[2]。血清超氧化物歧化酶(SOD)是體內(nèi)最重要的自由基清除酶，丙二醛(MDA)是自由基引起的脂質(zhì)過氧化過程中生成的一種醛類物質(zhì)，檢測血清中SOD活性和MDA含量可反映心肌細(xì)胞氧自由基產(chǎn)生和損傷程度[3]。胺碘酮作為抗心律失常藥物臨床應(yīng)用廣泛，它同時具有擴(kuò)張冠狀動脈、抗炎、抗脂質(zhì)過氧化及清除氧自由基等作用[4]。本實驗旨在探討胺碘酮對兔實驗性急性心肌缺血再灌注后SOD和MDA水平的影響及其意義。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

清潔級健康新西蘭大白兔30只，雌雄不限，年齡11～12周，體質(zhì)量(2.5±0.3)kg，由河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。隨機分為假手術(shù)組、正常對照組及胺碘酮組，每組10只。

1.2 試劑及儀器設(shè)備

胺碘酮注射液購自杭州默沙東制藥有限公司。伊文思藍(lán)、硫磺素S購自美國Sigma公司。MDA、SOD試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3 模型的建立及各組處理

[5-6]方法建立缺血再灌注無復(fù)流模型。正常對照組再灌注即刻給予等量的生理鹽水，胺碘酮組再灌注即刻給予胺碘酮3 mg/kg。假手術(shù)組僅開胸不結(jié)扎冠狀動脈。各組于再灌注120 min后取血檢測SOD活性及MDA含量。術(shù)后取心臟進(jìn)行缺血、無復(fù)流面積的評估[5-6]。

1.4 SOD及MDA水平的檢測

于再灌注120 min后分別從耳緣靜脈采血2 mL，置于真空采血管中，于離心機中以3 500 r/min離心15 min，取出血清后置于-20 ℃冰箱中保存，統(tǒng)一采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD活性，硫代巴比妥法測定MDA含量，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 缺血無復(fù)流范圍比較

正常對照組與胺碘酮組缺血范圍比較，差異無顯著性，而胺碘酮組無復(fù)流范圍明顯小于正常對照組(t=4.483,P<0.01)。見圖1、2，表1。

2.2 血清中SOD活性及MDA含量的比較

與假手術(shù)組相比，正常對照組、胺碘酮組再灌注后血清SOD活性明顯降低，MDA含量明顯增高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(F=800.90、1 457.60,q=18.89～73.32,P<0.01)。與正常對照組相比，胺碘酮組再灌注后血清SOD活性明顯增高，MDA含量明顯降低，差異有顯著意義(q=36.76、18.18,P<0.01)。見表2。

2a為正常對照組硫磺素S染色；2b為胺碘酮組硫磺素S染色。

表1 兩組缺血、無復(fù)流范圍比較±s)

表2 各組血清SOD、MDA檢測結(jié)果比較

3 討 論

心肌細(xì)胞缺血再灌注損傷產(chǎn)生大量的氧自由基和過氧化物質(zhì)促進(jìn)無復(fù)流的發(fā)生，ZHAO等[7]研究認(rèn)為，冠狀動脈無復(fù)流是由于再灌注期間黃嘌呤氧化酶代謝產(chǎn)生大量自由基所致，而氧自由基多來源于黃嘌呤氧化酶反應(yīng)及線粒體、多形核細(xì)胞等，同時也發(fā)現(xiàn)SOD途徑在正常時負(fù)責(zé)清除氧自由基，這種功能可能在缺血發(fā)作后發(fā)生了改變，導(dǎo)致無復(fù)流的產(chǎn)生。本研究也得出相似的結(jié)論，正常對照組與假手術(shù)組相比，SOD活性明顯降低，表明發(fā)生無復(fù)流時，心肌細(xì)胞膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化，會產(chǎn)生大量的自由基，使得SOD活性因消耗過多而降低。本研究同時顯示，胺碘酮組與正常對照組相比，SOD活性明顯增高，提示冠狀動脈發(fā)生無復(fù)流后，胺碘酮可能通過抗脂質(zhì)過氧化作用，抑制過多自由基的產(chǎn)生與清除自由基，改善缺血再灌注損傷細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)及其功能，減少脂質(zhì)過氧化物的形成，從而減輕心肌缺血再灌注損傷，改善無復(fù)流狀況。

已有充分依據(jù)表明，再灌注損傷與氧自由基生成有關(guān)，冠狀動脈再灌注期間會產(chǎn)生大量的氧自由基，體內(nèi)的抗氧化酶系統(tǒng)(如SOD等)可清除自由基，使得SOD活性降低，同時產(chǎn)生了大量的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，MDA是脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物，是研究抗氧化能力的常用指標(biāo)之一。通過測定體內(nèi)MDA含量，可間接反映體內(nèi)冠狀動脈無復(fù)流時自由基對機體的損傷程度[8]。本研究結(jié)果顯示，與對照組相比，胺碘酮組血清MDA含量明顯降低，提示胺碘酮可能通過增加SOD活性，明顯減輕缺血再灌注損傷，使脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物生成減少，進(jìn)而減少血清MDA的產(chǎn)生。有研究顯示，胺碘酮增加SOD活性及降低血清中MDA含量，可能與減少氧自由基的產(chǎn)生密切相關(guān)[9]，進(jìn)而改善冠狀動脈無復(fù)流的嚴(yán)重程度。

總之，本文的研究結(jié)果顯示，急性心肌缺血時應(yīng)用胺碘酮可以通過增加SOD的活性及降低血清中MDA含量，減輕缺血再灌注損傷，改善無復(fù)流狀況，在預(yù)防無復(fù)流治療中有重要的參考價值。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 騰軍,宋玲,尹作民. AMI病人冠狀動脈內(nèi)支架安置術(shù)的無復(fù)流現(xiàn)象分析[J]. 齊魯醫(yī)學(xué)雜志, 2005,20(4):54-81.

[2] BOLOGNESE L, CARRABBA N, PARODI G, et al. Impact of microvascular dysfunction on left ventricular remodeling and long-term clinical outcome after primary coronary angioplasty for acute myocardial infarction[J]. Circulation, 2004,109(9):1121-1126.

[3] JIANG B, CHEN Q, LIU X, et al. Ischemic postconditioning protects renal function after 24 hours of cold preservation in a canine autotransplantation model[J]. Transplant Proc, 2012,44(6):1776-1781.

[4] MAREN L, NELE B A, UWE J F, et al. Amiodarone has anti-inflammatory and anti-oxidative properties: an experimental study in rats with carrageenan-induced paw edema[J]. European Journal of Pharmacology, 2007,566(1-3):215-221.

[5] KLONER R A, GANOTE C E, JENNINGS R B. The “no-reflow” phenomenon after temporary coronary occlusion in the dog[J]. J Clin Invest, 1974,54(6):1496-1508.

[6] REFFELMANN T, KLONER R A. Microvascular reperfusion injury: rapid expansion of anatomic no reflow during reperfusion in the rabbit[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2002,283(3):1099-1107.

[7] ZHAO J, YANG Y, YOU S, et al. Carvedilol preserves endothelial junctions and reduces myocardial no-reflow afteracute myocardial infarction and reperfusion[J]. Int J Cardiol, 2007, 115(3):334-341.

[8] GAO Y H, CHEN L, MA Y L, et al. Chronic intermittent hypoxia aggravates cardiomyocyte apoptosis in rat ovariectomized model.[J]. Chin Med J (Engl), 2012,125(17):3087-3092.

[9] DOMENICO L, GIULIANO C, SANTE D P, et al. Amiodarone inhibits tocopherol-mediate human lipoprotein peroxidatio biochemical[J]. Pharmacology, 2007,74(2):265-272.