甘西鼠尾草化學成分研究

朱路平，向 誠，莊文婷，何 靜，李 鵬，2，李寶才*

1昆明理工大學生命科學與技術學院，昆明650500;2 澳門大學中華醫(yī)藥研究院中藥質量研究國家重點實驗室，澳門000856

甘西鼠尾草(Salvia przewalskii Maxim)為唇形科鼠尾草屬弧隔鼠尾草亞屬植物，又名大紫丹參、紫丹參、甘肅丹參、秦紅艽，主要分布于我國甘肅西部、四川西部、云南西北部及西藏等地［1］。甘西鼠尾草在我國是廣泛使用的中草藥，民間多用其根入藥，四川作秦艽的代用品，云南作丹參代用品［2］。其具有與丹參相似的藥理活性，具有抗菌、消炎、擴冠、抗脂質過氧化、抗血小板凝聚等作用［3，4］。研究表明甘西鼠尾草中二萜醌類化合物是產生這些藥理活性的主要物質基礎，所以進一步從甘西鼠尾草中尋找二萜活性成分，對其開發(fā)和利用提供理論依據具有重要意義。為此，筆者對云南麗江產甘西鼠尾草的化學成分進行了研究，初步分離出12 個化合物，分別鑒定為:丹參酮ⅡA(1)、丹參酮Ⅰ(2)、丹參內酯(3)、隱丹參酮(4)、丹參酸甲酯(5)、間羥基苯甲醛(6)、迷迭香酚(7)、異迷迭香酚(8)、紫丹參甲素(9)、紫丹參乙素(10)、二氫丹參酮Ⅰ(11)、丹參新醌甲(12)。其中，化合物7、8 為首次從該植物中分離得到，化合物6 為首次從該屬植物中分離得到。

1 實驗部分

1.1 儀器與材料

Brucker AV-400 和DRX-500 超導核磁共振儀;API QSTAR Pulsar 質譜儀;Agilent 1200 高效液相色譜儀;LC3000 型高效液相色譜儀(北京創(chuàng)新通恒科技有限公司);Sephadex LH-20 (20～100 μm，Pharmacia Fine Chemical Co.，Ltd.);MCI gel CHP20P(75～150 μm，Mitsubishi Chemical Co.，Ltd.);Rp-18(40～50 μm，Merk Co.，Ltd);柱層析硅膠(200～300目)、薄層層析硅膠(GF254)均為青島海洋化工廠產品;顯色劑:5%硫酸-乙醇溶液;柱層析溶劑均為工業(yè)級重蒸溶劑。

甘西鼠尾草藥材于2010 年8 月采自云南省麗江市，由云南省中醫(yī)中藥研究院郭世民研究員鑒定為唇形科植物甘西鼠尾草(Salvia przewalskii)。樣本現(xiàn)存于昆明理工大學生命科學與技術學院天然產物制藥實驗室。

1.2 提取與分離

干燥甘西鼠尾草(全草)藥材7.3 kg，粉碎后過60 目篩，用100%丙酮(每次20 L)室溫下超聲提取三次，每次2 h，提取液減壓濃縮得粗浸膏300 g。所得浸膏經硅膠柱色譜石油醚-乙酸乙酯梯度(1∶0、9∶1、3∶1、1∶1、3∶7)洗脫，TLC 檢測合并得5 個部分Fr.1～5。Fr.2(42 g)經硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯梯度(20∶1、15∶1、10∶1、8∶1、5∶1)洗脫，石油醚-乙酸乙酯(10∶1)洗脫部分反復上硅膠柱得到化合物1(1.8 g)、化合物2(20 mg)，石油醚-乙酸乙酯(8∶1)洗脫部分反復上硅膠柱得到化合物3(10 mg);Fr.3(30 g)經MCI 柱層析MeOH-H2O(65%、75%、85%)梯度洗脫，75%MeOH-H2O 洗脫部分反復硅膠柱色譜和Sephadex LH-20 純化得化合物4(8 g)、化合物5(26 mg);Fr.4(14 g)經MCI 柱層析MeOHH2O(50%、70%、80%、90%)梯度洗脫，50%MeOHH2O 洗脫部分反復硅膠柱色譜得化合物6(10 mg)，70%MeOH-H2O 洗脫部分反復硅膠柱色譜和Sephadex LH-20 純化得化合物7(16 mg)、化合物8(50 mg)，80%MeOH-H2O 洗脫部分反復Sephadex LH-20純化后，利用半制備液相色譜制備得化合物9(200 mg)、化合物10(84 mg);Fr.5(20 g)經Rp-18 反相柱層析MeOH-H2O(40%、70%、80%、90%)梯度洗脫劃分為兩個組分，組分2 經反復硅膠柱色譜、Rp-18 反相柱層析及Sephadex LH-20 純化得化合物11(60 mg)，化合物12(124 mg)。

圖1 化合物1～12 的結構式Fig.1 Chemical structures of compounds 1-12

2 結構鑒定

化合物1 紅色粉末(氯仿)，mp:201～202℃，ESI-MS m/z:295［M+H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:1.80 (2H，m，H-1)，1.66 (2H，m，H-2)，3.19 (2H，m，H-3)，7.64 (1H，d，J =6.4 Hz，H-6)，7.55 (1H，d，J=6.4 Hz，H-7)，7.26 (1H，s，H-16)，2.26 (3H，s，Me-17)，1.31 (6H，s，Me-18，Me-19);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:29.8 (C-1)，19.3(C-2)，37.8 (C-3)，34.9 (C-4)，150.1 (C-5)，133.5 (C-6)，120.2 (C-7)，127.4 (C-8)，126.4 (C-9)，144.6 (C-10)，183.6 (C-11)，175.7 (C-12)，121.1(C-13)，161.7 (C-14)，120.3 (C-15)，141.2(C-16)，8.8 (C-17)，31.8 (C-18，C-19)。以上波譜數(shù)據與文獻［5］報道基本一致，故鑒定化合物1 為丹參酮ⅡA。

化合物2 紫紅色粉末(氯仿)，ESI-MS m/z:277［M +H］+;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:9.26(1H，d，J = 8.8 Hz，H-1)，7.56 (1H，dd，J = 7.0，8.8 Hz，H-2)，7.36 (1H，d，J = 7.0 Hz，H-3)，8.31(1H，d，J = 8.8 Hz，H-6)，7.82 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-7)，7.28 (1H，s，H-16)，2.31 (3H，s，Me-17)，2.70 (3H，s，Me-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:124.7(C-1)，130.6 (C-2)，128.4 (C-3)，135.2(C-4)，133.7 (C-5)，132.8 (C-6)，118.7 (C-7)，129.7 (C-8)，123.2 (C-9)，132.9 (C-10)，183.5(C-11)，175.6 (C-12)，121.7 (C-13)，161.2 (C-14)，120.4 (C-15)，142.0 (C-16)，8.8 (C-17)，19.8 (C-18)。以上波譜數(shù)據與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物2 為丹參酮Ⅰ。

化合物3 無色針狀結晶(氯仿)，EI-MS m/z:264(［M］+，100)，263 (33)，208 (25)，184 (24)，165 (20);1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:8.34 (1H，d，J = 8.2 Hz，H-1)，7.45(1H，dd，J = 8.2，8.2 Hz，H-2)，7.35 (1H，d，J = 8.2 Hz，H-3)，7.80(1H，d，J = 8.8 Hz，H-6)，7.74 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-7)，7.37 (1H，s，H-16)，2.36 (3H，s，Me-17)，2.63 (3H，s，Me-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:120.3 (C-1)，126.9 (C-2)，128.8 (C-3)，134.5(C-4)，123.5 (C-5)，120.7 (C-6)，116.6 (C-7)，110.2 (C-8)，107.9 (C-9)，133.1 (C-10)，158.6(C-11)，158.6 (C-13)，149.5 (C-14)，141.0 (C-15)，120.3 (C-16)，8.5 (C-17)，19.5 (C-18)。以上波譜數(shù)據與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物3 為丹參內酯。

化合物4 紅色粉末(氯仿)，mp:196～197 ℃，ESI-MS m/z:297 ［M + H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:3.15 (2H，m，H-1)，1.73 (2H，m，H-2)，1.65 (2H，m，H-3)，7.64 (1H，d，J = 8.0 Hz，H-6)，7.49 (1H，d，J = 8.0 Hz，H-7)，3.52 (1H，m，H-15)，4.84 (1H，t，J = 9.2 Hz，H-16α)，4.35(1H，dd，J = 6.0，9.2 Hz，H-16β)，1.17 (3H，s，Me-17)，1.32 (3H，s，Me-18)，1.32 (3H，s，Me-19);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:29.6 (C-1)，19.0 (C-2)，37.7 (C-3)，34.7 (C-4)，152.3 (C-5)，132.6(C-6)，122.5 (C-7)，128.3 (C-8)，126.8 (C-9)，143.7 (C-10)，184.2 (C-11)，175.6 (C-12)，118.4(C-13)，170.8 (C-14)，34.5 (C-15)，81.4 (C-16)，18.8 (C-17)，31.9 (C-18)，31.8 (C-19)。以上波譜數(shù)據與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物4 為隱丹參酮。

化合物5 紅色粉末(氯仿)，mp:174～176 ℃，ESI-MS m/z:339［M + H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:3.24 (2H，t，J = 7.6 Hz，H-1)，1.80(2H，m，H-2)，1.74(2H，m，H-3)，7.58 (1H，d，J =8.1 Hz，H-6)，7.49 (1H，d，J = 8.1 Hz，H-7)，7.26(1H，d，J = 8.1 Hz，H-16)，2.26 (3H，s，Me-17)，1.58 (3H，s，Me-18)，3.67 (3H，s，Me-20);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:29.0 (C-1)，19.1 (C-2)，33.9(C-3)，47.1 (C-4)，144.3 (C-5)，134.9 (C-6)，120.3 (C-7)，128.5 (C-8)，126.4 (C-9)，143.0 (C-10)，183.3 (C-11)，175.5 (C-12)，121.2 (C-13)，161.2 (C-14)，120.2 (C-15)，141.5 (C-16)，8.7(C-17)，27.5 (C-18)，177.0 (C-19)，52.5 (C-20)。以上波譜數(shù)據與文獻［7］報道基本一致，故鑒定化合物5 為丹參酸甲酯。

化合物6 白色粉末(氯仿)，mp:103～104 ℃，ESI-MS m/z:107［M + H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:9.86(1H，s，-CHO)，7.33～7.31 (2H，m，H-5，H-6)，7.28(1H，d，J = 1.6 Hz，H-2)，7.07(1H，dd，J = 8.4，1.6 Hz，H-4);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:141.5 (C-1)，119.0(C-2)，149.37(C-3)，126.4(C-4，C-6)，130.1 (C-5)，197.2 (-CHO)。以上波譜數(shù)據與文獻［8］報道基本一致，故鑒定化合物6 為間羥基苯甲醛。

化合物7 白色粉末(甲醇)，mp:240.0～242℃，ESI-MS m/z:347［M+H］+;1H NMR (400 MHz，MeOD)δ:3.15 (1H，br. d，J = 14 Hz，H-1β)，1.95(1H，m，H-1α)，1.57 (1H，m，H-2β)，1.68 (1H，m，H-2α)，1.22 (1H，m，H-3β)，1.45 (1H，br. d，J =14 Hz，H-3α)，2.05 (1H，s，H-5)，4.52 (1H，d，J =3.0 Hz，H-6)，4.40 (1H，d，J = 3.0 Hz，H-7)，6.79(1H，s，H-14)，3.00 (1H，sept，J = 7.0 Hz，H-15)，1.01 (3H，d，J = 7.0 Hz，Me-16)，1.12 (3H，d，J =6.8 Hz，Me-17)，0.91 (3H，s，Me-18)，0.98 (3H，s，Me-19);13C NMR (100 MHz，MeOD)δ:27.1 (C-1)，18.9 (C-2)，37.9 (C-3)，31.6 (C-4)，55.4 (C-5)，74.7 (C-6)，78.2 (C-7)，123.5 (C-8)，127.5(C-9)，47.6 (C-10)，142.8 (C-11)，143.1 (C-12)，134.5 (C-13)，118.5 (C-14)，27.4 (C-15)，22.3(C-16)，22.7 (C-17)，21.9 (C-18)，31.8 (C-19)，178.9 (C-20)。以上波譜數(shù)據與文獻［9］報道基本一致，故鑒定化合物7 為迷迭香酚。

化合物8 白色粉末(吡啶)，1H NMR (400 MHz，C5D5N)δ:3.15 (1H，br. d，J = 14Hz，H-1β)，1.97 (1H，m，H-1α)，1.55 (1H，m，H-2β)，1.69(1H，m，H-2α)，1.21 (1H，m，H-3β)，1.46 (1H，br. d，J = 14 Hz，H-3α)，2.15 (1H，s，H-5)，4.48(1H，d，J = 4.5 Hz，H-6)，5.12 (1H，d，J = 4.5 Hz，H-7)，6.79 (1H，s，H-14)，3.00 (1H，sept，J =7.0 Hz，H-15)，1.01 (3H，d，J = 7.0 Hz，Me-16)，1.13 (3H，d，J = 6.8 Hz，Me-17)，0.92 (3H，s，Me-18)，0.97 (3H，s，Me-19);13C NMR (100 MHz，C5D5N)δ:28.8 (C-1)，20.9 (C-2)，39.5 (C-3)，33.1 (C-4)，56.7 (C-5)，72.0 (C-6)，81.4 (C-7)，132.4 (C-8)，126.6 (C-9)，49.9 (C-10)，146.5 (C-11)，145.5 (C-12)，138.0 (C-13)，120.0 (C-14)，29.8 (C-15)，24.1 (C-16)，24.5 (C-17)，23.4 (C-18)，32.8 (C-19)，180.1 (C-20)。以上波譜數(shù)據與文獻［10］報道基本一致，故鑒定化合物8 為異迷迭香酚。

化合物9 紅色粉末(甲醇)，mp:171～173 ℃，ESI-MS m/z:311 ［M + H］+;1H NMR (400 MHz，CD3OD)δ:3.30 (2H，d，J = 1.45 Hz，H-1)，3.09(2H，t，J = 6.2 Hz，H-2)，4.68 (2H，s，H-3)，7.73(1H，d，J = 8.1 Hz，H-6)，7.57 (1H，s，H-7)，7.51(1H，d，J = 8.1 Hz，H-15)，1.82 (2H，m，J = 6.0 Hz，Me-17)，1.31 (6H，s，Me-18，Me-19);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:31.1(C-1)，20.1 (C-2)，38.9 (C-3)，35.6 (C-4)，151.6 (C-5)，134.9 (C-6)，121.5 (C-7)，128.4 (C-8)，127.6 (C-9)，145.5(C-10)，183.8 (C-11)，176.2 (C-12)，127.4 (C-13)，163.6 (C-14)，143.3 (C-15)，119.4 (C-16)，56.0 (C-17)，32.1 (C-18，C-19)。以上波譜數(shù)據與文獻［11］報道基本一致，故鑒定化合物9 為紫丹參甲素。

化合物10 棕褐色針晶(吡啶)，mp:240～242℃，ESI-MS m/z:293［M+H］+;1H NMR (400 MHz，C5D5N)δ:9.57 (1H，d，J = 8.0 Hz，H-1)，7.75(1H，d，J = 8.8 Hz，H-2)，7.49 (1H，d，J = 6.8 Hz，H-3)，8.25 (1H，d，J = 8.4 Hz，H-6)，7.99(1H，d，J = 8.8 Hz，H-7)，7.25 (1H，s，H-16)，5.21(3H，s，Me-17)，2.51 (3H，s，Me-18);13C NMR (100 MHz，C5D5N)δ:128.4 (C-1)，132.5 (C-2)，130.3(C-3)，133.7 (C-4)，132.8 (C-5)，130.3 (C-6)，118.9 (C-7)，128.8 (C-8)，123.7 (C-9)，129.4 (C-10)，182.9 (C-11)，175.3 (C-12)，119.6 (C-13)，160.9 (C-14)，124.8 (C-15)，142.6 (C-16)，55.7(C-17)，19.4 (C-18)。以上波譜數(shù)據與文獻［7］報道基本一致，故鑒定化合物10 為紫丹參乙素。

化合物11 紅色粉末(氯仿)，mp:215～216℃，ESI-MS m/z:279［M+H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:9.26 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-1)，7.56(1H，t，J = 8.8 Hz，H-2)，7.40 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-3)，8.28 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-6)，7.75(1H，d，J = 8.8 Hz，H-7)，3.63 (1H，m，H-15)，4.96 (1H，t，J = 9.6 Hz，H-16α)，4.44 (1H，dd，J= 6.4，9.6 Hz，H-16β)，1.39 (3H，d，J = 7.0 Hz，Me-17)，2.70 (3H，s，Me-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:124.9 (C-1)，130.4 (C-2)，128.8 (C-3)，134.9 (C-4)，134.7 (C-5)，131.9 (C-6)，122.2(C-7)，130.6 (C-8)，125.9 (C-9)，135.4 (C-10)，184.2 (C-11)，175.9 (C-12)，118.7 (C-13)，170.8(C-14)，34.8 (C-15)，81.5 (C-16)，18.7 (C-17)，19.9 (C-18)。以上波譜數(shù)據與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物11 為二氫丹參酮Ⅰ。

化合物12 紅色粉末(吡啶)，mp:201～203℃，ESI-MS m/z:297［M+H］+;1H NMR (400 MHz，C5D5N)δ:2.55 (3H，s，Me-18)，9.72 (1H，d，J =8.8 Hz，H-1)，8.45 (1H，d，J = 8.7 Hz，H-6)，8.30(1H，d，J = 8.7 Hz，H-7)，7.58 (1H，dd，J = 8.8 Hz，H-2)，7.37 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-3)，1.68(3H，d，J = 7.0 Hz，Me-17)，4.17 (1H，m，H-15)，4.56 (1H，m，H-16α)，4.40 (1H，m，H-16β);13C NMR (100 MHz，C5D5N)δ:126.0 (C-1)，129.9 (C-2)，129.1 (C-3)，135.8 (C-4)，133.8 (C-5)，131.6(C-6)，122.5 (C-7)，130.8 (C-8)，125.4 (C-9)，135.4 (C-10)，185.1 (C-11)，158.5 (C-12)，122.7(C-13)，185.9 (C-14)，34.4 (C-15)，65.3 (C-16)，15.5 (C-17)，19.7 (C-18)。以上波譜數(shù)據與文獻［5］報道基本一致，故鑒定化合物12 為丹參新醌甲。

致謝:波譜數(shù)據由中國科學院昆明植物研究所分析測試中心測定。

1 Delectis Florae Reipublicae Popularis Sinicae Agendae Academiae Sinicae Edita(中國科學院中國植物志編輯委員會).Flora ReipublicaepopularisSinicae(中國植物志). Beijing:Science Press，1977，66:86-89.

2 Yang LX(楊立新)，Li XC(李杏翠)，Liu C(劉超)，et al.Chemical constituents from Salvia przewalskiiMaxim. Acta PharmSin(藥學學報)，2011，46:818-821.

3 Jiang W(江文)，Zhao Y(趙燕)，Zhao BL(趙保路)，et al.Scavenging effect of tanshinone on the lipids radical during the process ofcardiac sarcoplasmic reticulum lipid peroxidatio.ActaBiophy Sin(生物物理學報)，1994，10:685.

4 Yang Y(楊陽)，Wu ZJ(吳志軍)，Yang YB(楊穎博)，et al.Three new terpenoids from Salvia przewalskiiMaxim.Chem J ChinUniv(高等學?；瘜W學報)，2011，32:1318-1322.

5 Yang LX(楊立新).Studies on the chemical constituents and bioactivities of Salvia Przewalskii Maxim. Beijing:Peking Union Medical College(北京協(xié)和醫(yī)學院)，MSc.2011.

6 Xu G(許剛).Study on the chemical constituents of five Salvia species.Kunming:Kunming Institute of Botany，The Chinese Academy of Sciences(中科院昆明植物研究所)，PhD.2005.

7 Xue M(薛明)，Shi YB(史彥斌)，Cui Y(崔穎)，et al.Study on the chemical constituents from Salvia Przewalskii Maxim.Nat Prod Res Dev(天然產物研究與開發(fā))，1999，12:27-32.

8 Yang W(楊薇)，Tang XM(唐長明)，Li X(李顯)，et al.Study on the chemical constituents of Myricaesculenta.J Yunnan Univ(云南大學學報)，2011，33:453-457.

9 Luis JG，Quinones W，Grillo TA，et al. Diterpenes from the aerial part of Salvia columbariae. Phytochemistry，1994，35:1373-1374.

10 Gonzalez AG，Andres LS，Aguiar ZE，et al. Diterpenes from Salvia mellifera and their biogenetic significance.Phytochemistry，1992，31:1297-1305.

11 Luo HW，Wu MY，Yong ZG，et al.Pigments from Salvia miltiorrhiza.Phytochemistry，1985，24:815-817.