東莨菪內(nèi)酯的生物活性研究進(jìn)展

侯秋莉，楊振國，丁 偉，2，張永強(qiáng)，2*

1西南大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院2西南大學(xué)農(nóng)藥研究所，重慶400716

東莨菪內(nèi)酯(scopoletin)又稱東莨菪素、莨菪亭、莨菪酚，是一種重要的香豆素類化合物，其化學(xué)名稱為7-羥基-6 甲氧基香豆素(化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖1)。其在氯仿或乙酸中的結(jié)晶體為淺黃色或白色針狀，熔點(diǎn)為205～207 ℃［1］，易溶于氯仿、熱乙醇、熱乙酸、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亞砜等高極性有機(jī)溶劑中，微溶于水，其溶液在365 nm 的紫外光下顯示藍(lán)色熒光［2］。由于東莨菪內(nèi)酯的良好殺螨活性，全國農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)于2012 年正式將其通用名稱定為“甲氧香螨酯”(農(nóng)標(biāo)字2012 第005號(hào))。

圖1 東莨菪內(nèi)酯化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1 Chemical structural formula of scopoletin

植物受到外界生物及非生物不良環(huán)境的刺激后，會(huì)產(chǎn)生一些次生代謝物抵御干擾。東莨菪內(nèi)酯是植物體內(nèi)的一種重要的酚類植物抗毒素，當(dāng)植物受到病原菌、害蟲或其他植物及環(huán)境變化等因素的干擾時(shí)，能夠大量合成和累積東莨菪內(nèi)酯，用于防御不良因素的干擾。東莨菪內(nèi)酯存在于多個(gè)科的110000 余種［3，4］植物中，主要分布于菊科(Asteraceae)、旋花科(Convolvulaceae)、十字花科(Cruciferae)、杜鵑花科(Ericaceae)、大戟科(Euphorbiaceae)、豆科(Fabaceae)、楝科(Meliaceae)、桑科(Moraceae)、茜草科(Rubiaceae)、蕓香科(Rutaceae)、茄科(Solanaceae)、傘形科(Umbelliferae)等多個(gè)科的多種植物中，其中在黃花蒿(Artemisia annua)莖葉、茵陳蒿(A. capillaris)葉、丁公藤(Erycibe obtusifolia)莖、擬南芥(Arabidopsis thaliana)全株、諾麗(Morinda citrifolia)果實(shí)、苦楝(Melia azedarach)種子等多種植物中的含量相對(duì)較高。因此，東莨菪內(nèi)酯也被賦予了多種藥理活性以及殺蟲、抗菌殺菌、殺螨、化感等農(nóng)用生物活性?，F(xiàn)就近年來國內(nèi)外對(duì)東莨菪內(nèi)酯這一天然活性化合物的生物活性研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 東莨菪內(nèi)酯的藥理活性及藥動(dòng)學(xué)研究

1.1 抗腫瘤活性

東莨菪內(nèi)酯的抗腫瘤活性一直備受醫(yī)學(xué)界的關(guān)注，狗骨柴(Tricalysia dubia)［5］、紅果小蕓木(Micromelum minutum)［6］、黃花蒿［7］等植物中具有較強(qiáng)細(xì)胞毒素活性的物質(zhì)即為東莨菪內(nèi)酯。目前報(bào)道較多的是東莨菪內(nèi)酯對(duì)前列腺癌PC3 細(xì)胞以及T 淋巴瘤細(xì)胞的抗腫瘤活性［8，9］。東莨菪內(nèi)酯能阻斷腫瘤細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子受體-2 的自身磷酸化及下游信號(hào)通路，抑制纖維母細(xì)胞生長因子(FGF-2)及細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)的活性，從而使腫瘤細(xì)胞血管生成受阻，抑制原發(fā)腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移，并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡［10］。研究表明，東莨菪內(nèi)酯的抗腫瘤活性位點(diǎn)主要為C-6 的酚羥基和C-7 的甲氧基，對(duì)其C-6 的酚羥基引入烷氧基后，其衍生物對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7 和MDA-MB231 及結(jié)腸癌HT-29 的抑制活性比東莨菪內(nèi)酯提高10 余倍［11，12］。此外，其4-烷氧基衍生物也具有顯著地細(xì)胞毒素活性［13］。目前，Khuda-Bukhsh 等［14］研制了東莨菪內(nèi)酯聚合物納米膠囊，可增強(qiáng)人體黑色素腫瘤細(xì)胞A375 對(duì)東莨菪內(nèi)酯的吸收和利用，顯著提高其抗腫瘤活性。

1.2 降血壓、血脂活性

東莨菪內(nèi)酯能夠調(diào)節(jié)Fe3+與活性氧(ROS)螯合，減弱及清除ROS 產(chǎn)生，從而表現(xiàn)出調(diào)節(jié)心血管疾病的作用［15］。高甘油三酯血癥是重要的心血管疾病，其中脂蛋白脂酶(LPL)是重要的致病因素，而東莨菪內(nèi)酯具有提高LPL 活性的作用，從而表現(xiàn)出治療高甘油三酯血癥的作用，其機(jī)制是在通過增加LPL 的mRNA 的合成，從而增加了LPL［16］。此外，在心血管疾病方面，東莨菪內(nèi)酯具有誘導(dǎo)人體骨髓性白血病細(xì)胞的凋亡，并激活細(xì)胞核因子κB 及抗血小板凝聚的作用［17］。Olivera 等［18］報(bào)道，東莨菪內(nèi)酯具有抑制大鼠離體主動(dòng)脈環(huán)收縮的作用，很可能緩解動(dòng)脈粥樣硬化所導(dǎo)致的心肌缺血。

1.3 解痙活性

Ca2+在痙攣中具有重要的作用，東莨菪內(nèi)酯可調(diào)控Ca2+平衡而具有解痙攣活性［19］。0.1 μM 東莨菪內(nèi)酯能顯著激活紅細(xì)胞膜的Ca2+-ATP 酶和Mg2+-ATP 酶，0. 25 μM 東莨菪內(nèi)酯能顯著激活Na+-K+-ATP 酶，可有效調(diào)節(jié)機(jī)體的離子平衡［20］，且對(duì)GH4C1細(xì)胞誘導(dǎo)的Ca2+上調(diào)抑制率為15.2%，即東莨菪內(nèi)酯具有調(diào)節(jié)Ca2+平衡的作用［21］。Oliveira 等［22］發(fā)現(xiàn)東莨菪內(nèi)酯能有效抑制苯腎上腺素的活性，增強(qiáng)肌鈣蛋白與Ca2+的親和力，從而起到解痙攣的作用。

1.4 抗炎及鎮(zhèn)痛活性

東莨菪內(nèi)酯是藥用植物藏藥雪蓮(Saussurea involucrata)［23］、紫花前胡(Angelica decursiva)［24］、月桂(Litsea guatemalensis)［25］等抗炎和鎮(zhèn)痛的主要活性物質(zhì)。東莨菪內(nèi)酯主要通過抑制一氧化氮(NO)合酶和環(huán)氧化酶(COX-2)的活性，抑制炎癥過程中產(chǎn)生的NO 對(duì)機(jī)體的危害［26］。Mahattanadul 等［27］的東莨菪內(nèi)酯對(duì)小鼠反流性食管炎和慢性胃潰瘍的調(diào)控作用研究也證明了這一點(diǎn)。中藥丁公藤注射液的主要活藥理活性物質(zhì)為東莨菪內(nèi)酯，臨床上用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。研究表明，東莨菪內(nèi)酯可降低大鼠的關(guān)節(jié)炎指數(shù)，減少滑膜組織中血管的生成［28］。此外，東莨菪內(nèi)酯能夠競爭性的抑制高尿酸血癥小鼠中黃嘌呤氧化酶的活性，減少尿酸的產(chǎn)生，進(jìn)而對(duì)抗由高尿酸血癥引起的痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎［29］。

1.5 保肝作用

含有東莨菪內(nèi)酯的藥用植物對(duì)肝炎、肝硬化及肝臟損傷具有良好的保護(hù)作用［30］。Chang 等［31］發(fā)現(xiàn)芙蓉菊(C. chinensis)水提取物對(duì)CCl4致?lián)p的小鼠肝臟具有顯著地保護(hù)和治療作用的活性物質(zhì)為東莨菪內(nèi)酯;Han 等［32］報(bào)道在膽汁導(dǎo)管結(jié)扎的小鼠模型中，東莨菪內(nèi)酯使淤膽型肝纖維化變?nèi)酰Ｗo(hù)肝臟的功能;Yin 等［33］發(fā)現(xiàn)刺天茄(S.indicum)種子提取物中具有抗乙型肝炎病毒及細(xì)胞毒素活性的活性成分為東莨菪內(nèi)酯;Noh 等［34］報(bào)道日本栗(Castanea crenata)內(nèi)殼提取物含有東莨菪內(nèi)酯，其對(duì)乙醇誘導(dǎo)慢性氧化效應(yīng)的小鼠肝臟細(xì)胞具有較強(qiáng)的保護(hù)作用，可抑制乙醇誘導(dǎo)產(chǎn)生的氧化酶(CAT、SOD、GPx、GR)活性。另外，日本栗內(nèi)殼提取物對(duì)飼喂高脂肪的小鼠的肝脂質(zhì)沉著癥也具有較強(qiáng)地抑制作用［35］。

1.6 增強(qiáng)記憶活性

東莨菪內(nèi)酯是一種有效的天然乙酰膽堿酯酶抑制劑［3］，在老年性癡呆癥模型小鼠中，東莨菪內(nèi)酯可抑制大腦海馬體突觸體的AChE 作用于煙堿乙酰膽堿受體，促進(jìn)乙酰膽堿的釋放，提高了老年性癡呆癥患者的學(xué)習(xí)和記憶能力［4，36］。東莨菪內(nèi)酯及其衍生物對(duì)AChE 的抑制作用，主要通過C-6 和C-7 上的的官能團(tuán)作用于AChE 的Trp286、Tyr124、Tyr341和Phe295 等氨基酸殘基而發(fā)揮抑制活性［37］。此外，諾麗果的果實(shí)富含東莨菪內(nèi)酯，其氯仿提取物對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制活性最強(qiáng)，對(duì)莨菪堿導(dǎo)致小鼠記憶損失的保護(hù)作用，且提取物與東莨菪內(nèi)酯對(duì)小鼠的行為、生物化學(xué)及大腦血液流動(dòng)的影響相似［38］。

1.7 其他藥理活性

東莨菪內(nèi)酯還具有其他藥理活性，例如東莨菪內(nèi)酯具有降溫作用，能顯著地降低正常活動(dòng)家兔及由大腸桿菌內(nèi)毒素致熱的家兔的體溫［39］;東莨菪內(nèi)酯可通過抑制酪氨酸酶活性，進(jìn)而抑制黑色素的合成，具有美白功能;東莨菪內(nèi)酯的乙酰膽堿酯酶抑制作用，在臨床上有應(yīng)用于縮瞳和降眼壓［40］。

1.8 藥動(dòng)學(xué)研究

東莨菪內(nèi)酯的藥動(dòng)力學(xué)研究主要集中在大鼠腸道、體胃的吸收和滲透方面。在大鼠體內(nèi)，東莨菪內(nèi)酯口服吸收快，在10 min 左右即可達(dá)峰，口服后血漿半衰期t1/2=(14.1 ±0.6)min。東莨菪素在大鼠胃中2 h 的吸收百分率為76.3l%，在結(jié)腸、十二指腸、回腸、空腸的吸收率分別為46.25%，40.54%，38.21%，32.77%;不同質(zhì)量濃度、pH 值對(duì)東莨菪素在大鼠全腸道的吸收沒有顯著性影響，藥物的吸收呈一級(jí)動(dòng)力學(xué)過程，吸收機(jī)制主要為被動(dòng)擴(kuò)散，這與體外試驗(yàn)相一致;東莨菪素在胃腸道均有較好的吸收［41］。Galkin 等［42］通過Caco-2 模型對(duì)香豆素類口服藥物的膜透性和細(xì)胞毒性進(jìn)行了評(píng)估，結(jié)果表明該類藥物的有很好的滲透性，在腸道內(nèi)的吸收較好，但又不只局限于吸收，對(duì)線粒體功能也有一定影響。

2 東莨菪內(nèi)酯的殺蟲活性

東莨菪內(nèi)酯對(duì)昆蟲的生物活性主要表現(xiàn)為拒食、抑制生長、觸殺、胃毒等方面，其中在拒食和抑制生長的研究較多。Leszcynski 等［43］發(fā)現(xiàn)小麥葉中東莨菪內(nèi)酯等甲氧基酚類化合物對(duì)麥長管蚜(Sitobion avenae)具有顯著的拒食活性。據(jù)此，有學(xué)者將小麥低溫馴化后，使得小麥葉中東莨菪內(nèi)酯等酚類化合物的含量顯著提高，表現(xiàn)出良好的抗蟲和抗病性［44］。甘薯(Ipomoea batatas)塊根富含東莨菪內(nèi)酯，對(duì)小菜蛾(Plutella xylostella)幼蟲具有顯著地生長抑制作用和胃毒作用［45］，其塊根被金針蟲(Conoderus spp.和Systena elongata)、玉米根蟲(Diabrotica balteata)、甘薯跳甲(Chaetocnema confinis)、白蠐螬(Phyllophaga spp.)等地下害蟲的危害率與其東莨菪內(nèi)酯的含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系［46］。Vera 等［47］報(bào)道了含200 μg/g 的東莨菪內(nèi)酯飼料對(duì)草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)幼蟲的選擇性拒食率為61%;源于黃花蒿的東莨菪內(nèi)酯與人工飼料混合對(duì)塵污燈蛾(Spilarctia oblique)幼蟲具有明顯的拒食和抑制生長作用，東莨菪內(nèi)酯(＞100 μg/g)對(duì)塵污燈蛾幼蟲的生物活性與印楝素(50 μg/g)無顯著性差異［48］。

東莨菪內(nèi)酯不僅對(duì)同翅目、鞘翅目及鱗翅目的昆蟲具有拒食及抑制生長作用，其對(duì)等翅目和雙翅目的昆蟲也具有拒食及毒殺活性。Adfa 等［49］發(fā)現(xiàn)東莨菪內(nèi)酯對(duì)臺(tái)灣乳白蟻(Coptotermes formosanus)表現(xiàn)出顯著的拒食活性，同時(shí)發(fā)現(xiàn)，其抗白蟻的活性位點(diǎn)主要為C-6 和C-7 的烷氧基。據(jù)此，Adfa 等［50］將香豆素修飾為6-烷氧基香豆素和7-烷氧基香豆素，且不飽和烷氧基及環(huán)烷氧基能顯著提高抗白蟻活性。Tunón 等［51］發(fā)現(xiàn)南木蒿(A. abrotanum)的細(xì)枝和葉的甲苯提取物對(duì)埃及伊蚊(Aedes aegypti)具有顯著地驅(qū)避活性，其提取物中主要含有東莨菪內(nèi)酯和香豆素。此外，東莨菪內(nèi)酯為諾麗果葉甲醇提取物主要活性物質(zhì)，提取物對(duì)斯氏按蚊(Anopheles stephensi)、致倦庫蚊(Culex quinquefasciatus)及埃及伊蚊幼蟲具有顯著地觸殺活性［52］。

3 東莨菪內(nèi)酯的殺螨活性

東莨菪內(nèi)酯對(duì)植食性螨類的生物活性研究起始于黃花蒿殺螨活性的研究，張永強(qiáng)等［53］系統(tǒng)研究了黃花蒿不同月份及其不同部位的不同溶劑提取物對(duì)朱砂葉螨(Tetranychus cinnabarinus)的觸殺活性，結(jié)果表明:黃花蒿七月份葉的丙酮提取物中東莨菪內(nèi)酯含量最高，對(duì)朱砂葉螨的LC50值(48h)為0.105 mg/mL，并且對(duì)柑桔全爪螨(Panonychus citri)和酢漿草巖螨(Petrobia harti)也表現(xiàn)出強(qiáng)烈的觸殺活性，對(duì)朱砂葉螨還具有一定的產(chǎn)卵抑制活性［54］。Tunón 等［51］發(fā)現(xiàn)南木蒿地上部分乙醇提取物主要為東莨菪內(nèi)酯和香豆素，對(duì)蓖子硬蜱(Ixodes ricinus)有較好的驅(qū)避作用。

東莨菪內(nèi)酯的殺螨活性具有明顯的溫度效應(yīng)和亞致死效應(yīng)，其對(duì)朱砂葉螨雌成螨的最佳毒力溫度為23.2 ℃，在亞致死劑量下能使朱砂葉螨種群的發(fā)育和繁殖速率降低，且不易產(chǎn)生抗藥性［55，56］，原因可能與東莨菪內(nèi)酯對(duì)朱砂葉螨的多靶標(biāo)作用機(jī)理有關(guān)［56］。東莨菪內(nèi)酯處理朱砂葉螨后，能夠顯著抑制螨體內(nèi)超過氧化物岐化酶(superoxide dismutase，SOD)和過氧化物酶(peroxidase，POD);對(duì)過氧化氫酶(catalase，CAT)、羧酸酯酶(carboxylesterase，CarE)和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(gultathione S transferases，GSTs)表現(xiàn)為激活作用;對(duì)螨體的神經(jīng)系統(tǒng)靶標(biāo)——乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase，AChE)、單胺氧化酶(monoamine oxidase，MAO)、Na+-K+-ATP 酶及Ca2+-Mg2+-ATP 酶的酶活性也表現(xiàn)為抑制作用，并推測(cè)東莨菪內(nèi)酯可能是一種神經(jīng)毒劑［53，57］。

4 東莨菪內(nèi)酯的抑菌活性

4.1 東莨菪內(nèi)酯的誘導(dǎo)抗菌活性

植物在受到病原菌或外來物質(zhì)的刺激時(shí)，可誘導(dǎo)合成更多的東莨菪內(nèi)酯，提高其抵抗能力［58］。2，4-D［59］、茉莉酸甲酯［60］、細(xì)胞分裂素［61］、阿氟曼鏈霉菌(Streptomyces scabiei)及其毒素thaxtomin A［62］等均可誘導(dǎo)煙草細(xì)胞中東莨菪內(nèi)酯的含量增加，提高其抗菌活性。源于疫酶根腐病(Phytophthora megasperma)的無致病性糖蛋白也能誘導(dǎo)煙葉中東莨菪內(nèi)酯含量的增加，顯著增強(qiáng)煙株對(duì)煙草花葉病毒(TMV)的抗性［63］。東莨菪內(nèi)酯在煙草中的抗菌活性需要通過轉(zhuǎn)化為東莨菪苷，才能有效發(fā)揮作用［64］，此過程需要煙草葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(TOGTs)的協(xié)助，其主要調(diào)控基因是Togt1 和Togt2，且基因的表達(dá)受水楊酸(SA)信號(hào)系統(tǒng)的調(diào)控［65，66］。但過度使東莨菪內(nèi)酯轉(zhuǎn)化為東莨菪苷，對(duì)煙草的組織也是有害的［67］。此外，核黃素(維生素B2)也能誘導(dǎo)煙草細(xì)胞中東莨菪內(nèi)酯的合成，其作用機(jī)理不屬于水楊酸信號(hào)系統(tǒng)控制，而是依賴于磷脂酶C (PLC)和磷脂酶D (PLD)的表達(dá)［68］。

東莨菪內(nèi)酯也是巴西橡膠樹(Hevea brasiliensis)的一種重要植物抗毒素，棕櫚疫霉分泌蛋白質(zhì)激發(fā)子elicitin 可誘導(dǎo)橡膠樹葉東莨菪內(nèi)酯的累積，能有效提高其對(duì)橡膠南美葉疫病菌(Microcyclus ulei)等的抗性［69］。

4.2 東莨菪內(nèi)酯的殺菌活性

東莨菪內(nèi)酯不僅可提高植物的抗菌作用，也具有殺菌或抑菌作用。0.5 mg/mL 的東莨菪內(nèi)酯能夠完全抑制煙草灰霉病菌的孢子萌發(fā)和菌絲生長［70］;東莨菪內(nèi)酯(＞0.4 mg/mL)能有效抑制腐皮鐮刀菌(Fusarium solani)、尖孢鐮刀菌(F.oxysporum)、根霉病菌(Rhizopus stolonifer)和焦腐病菌(Lasiodiplodia theobromae)的菌絲生長［45］。東莨菪內(nèi)酯對(duì)梭形桿菌(F.fusiformis)、半裸鐮刀菌(F.semitectum)和鏈格胞菌(Alternaria alternata)也具有顯著的抑制作用［71］。此外，東莨菪內(nèi)酯對(duì)蘋果擴(kuò)展青霉(Penicillium expansum)及其擴(kuò)展青霉素的累積具有良好的控制作用［72］;對(duì)侵染白榆(Ulmus pumila)的長喙殼科真菌Ophiostoma ulmi 具有抑制孢子萌發(fā)和菌絲生長的活性［73］。Carpinella 等［74］將東莨菪內(nèi)酯分別與代森鋅和萎銹靈復(fù)配，可有效減少兩者的用量，顯著提高了對(duì)鐮刀菌(F.verticillioides)的抑制效果。

5 東莨菪內(nèi)酯的化感作用

香豆素類化合物可作用于植物的細(xì)胞膜，致使胞內(nèi)離子平衡紊亂、激素變化、代謝異常等，從而擾亂植物的平衡和光合作用，調(diào)控植物的生長［75］。Kim 等［76］發(fā)現(xiàn)東莨菪內(nèi)酯是多種入侵植物的化感物質(zhì)。在多種雜草中，東莨菪內(nèi)酯也發(fā)揮著化感作用的特性［77］。

東莨菪內(nèi)酯可調(diào)節(jié)禾本科植物燕麥(Avena sativa)和梯牧草(Phleum pratense)幼苗根的生長，且高濃度表現(xiàn)為抑制作用，而低濃度則表現(xiàn)為促進(jìn)作用，其調(diào)控作用主要作用于根尖，使根尖分生組織壞死，分泌黑色物質(zhì)堵塞導(dǎo)管，進(jìn)而調(diào)控植物的生長［78，79］，其作用機(jī)理主要是保護(hù)吲哚乙酸(IAA)免受吲哚乙酸氧化酶的氧化作用，使生長點(diǎn)IAA 含量過高［80］。此外，東莨菪內(nèi)酯(＞0.019 mg/mL)也能顯著抑制紅根莧(Amaranthus palmeri)和芥菜(Brassica juncea)根的生長，且破壞細(xì)胞胚植［81］。另外，東莨菪內(nèi)酯對(duì)雙子葉植物的幼苗根抑制較弱，但對(duì)葉的抑制作用也較為顯著，其化感活性主要通過調(diào)節(jié)植物體內(nèi)的相關(guān)酶系和氣孔的開度，影響其光合作用，從而調(diào)節(jié)植物的生長［82，83］。

6 結(jié)語

東莨菪內(nèi)酯存在于多個(gè)科的多種植物體內(nèi)，其臨床應(yīng)用十分廣泛，但是其研究主要集中在藥理學(xué)方面，藥動(dòng)力學(xué)方面的研究報(bào)道較少。在農(nóng)業(yè)應(yīng)用上，東莨菪內(nèi)酯對(duì)多種農(nóng)業(yè)害蟲及害螨具有作用方式多樣性和作用靶標(biāo)多樣性的特點(diǎn)，能夠減緩或者避免抗藥性的產(chǎn)生，具有很好的開發(fā)利用價(jià)值。但是，現(xiàn)階段對(duì)東莨菪內(nèi)酯的研究還不是很深入，其殺蟲殺螨作用機(jī)理尚不清楚，而且目前還沒有一個(gè)成熟的劑型可以應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)。因此，要實(shí)現(xiàn)東莨菪內(nèi)酯這一植物源物質(zhì)的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，首先，在醫(yī)學(xué)上需要對(duì)其藥動(dòng)力學(xué)進(jìn)行進(jìn)一步的研究;第二，在農(nóng)業(yè)應(yīng)用上，需明確東莨菪內(nèi)酯的殺蟲殺螨作用機(jī)理，以期發(fā)現(xiàn)新的作用靶標(biāo)，減緩抗性的產(chǎn)生;第三，研究東莨菪內(nèi)酯的毒力與藥劑本身、受體生理代謝、環(huán)境條件等多方面因素的關(guān)系，為制劑的研發(fā)和有效利用提供理論依據(jù)。

1 Vasconcelos JMJ，et al.Chromones and flavanones from Artemisia campestris subsp. maritima. Phytochemistry，1998，49:1421-1424.

2 de Sandra V，et al. A method for measuring H2O2based on the potentiation of peroxidative NADPH oxidation by superoxide dismutase and scopoletin. Anal Biochem，1992，206:408-413.

3 Rollinger JM，et al.Acetylchinesterase inhibitory activities of scopoltin and scopoletin discovered by virtual screening of natural products.J Med Chem，2004，47:6248-6254.

4 Hornick A，et al.The coumarin scopoletin potentiates acetylcholine release from synaptosomes，amplifies hippocampal long-term potentiation and ameliorates anticholinergic-and age-impaired memory.Neuroscience，2011，197:280-292.

5 Tamaki N，et al. Rearranged ent-kauranes from the stems of Tricalysia dubia and their biological activities. J Nat Med，2008，62:314-320.

6 Lekphrom R，et al.C-7 oxygenated coumarins from the fruits of Micromelum minutum. Arch Pharm Res，2011，34:527-531.

7 Efferth T，et al. Cytotoxic activity of secondary metabolites derived from Artemisia annua L.towards cancer cells in comparison to its designated active constituent artemisinin.Phytomedicine，2011，18:959-969.

8 Happi EN，et al.Tirucallane triterpenoids from the stem bark of Araliopsis synopsis.Phytochem Lett，2012，5:423-426.

9 Manuele MG，et al.Comparative immunomodulatory effect of scopoletin on tumoral and normal lymphocytes. Life Sci，2006，79:2043-2048.

10 Pan R，et al. Prevention of FGF-2-induced angiogenesis by scopoletin，a coumarin compound isolated from Erycibe obtusifolia Benth，and its mechanism of action. Int Immunopharmacol，2011，11:2007-2016.

11 Zhou JP，et al.Synthesis and antitumor activity of scopoletin derivatives.Lett Drug Des Discov，2012，9:397-401.

12 Liu W，et al.Synthesis and in vitro antitumor activity of novel scopoletin derivatives. Bioorg Med Chem Lett，2012，22:5008-5012.

13 Serra S，et al.Synthesis and cytotoxic activity of non-naturally substituted 4-oxycoumarin derivatives. Bioorg Med Chem Lett，2012，22:5791-5794.

14 Khuda-Bukhsh AR，et al. Polymeric nanoparticle encapsulation of a naturally occurring plant scopoletin and its effects on human melanoma cell A375.Chin J Integr Med，2010，8:853-862.

15 Mladenka P，et al. In vitro interactions of coumarins with iron.Biochimie，2010，92:1108-1114.

16 Yang JY，et al. Effect of scopoletin on lipoprotein lipase activity in 3T3-L1 adipocytes. Int J Mol Med，2007，20:527-531.

17 Kim EK，et al.Scopoletin induces apoptosis in human promyeloleukemic cells，accompanied by activations of nuclear factor kappaB and caspase-3.Life Sci，2005，77:824-836.

18 Oliveria EJ，et al.Intracellular calcium mobilization as a target for the spasmolytic action of scopoletin. Planta Med，2001，67:605-608.

19 Mishra N，et al.Anticonvulsant activity of Benkara malabarica (Linn.)root extract:In vitro and in vivo investigation.J Ethnopharmacol，2010，128:533-536.

20 Ezeokonkwo CA，Obidoa O.Effect of scopoltin on erythrocyte membrane ion motive atpases.Nig J Nat Prod Med，2001，5:37-40.

21 Tammela P，Vuorela P. Miniaturisation and validation of a cell-based assay for screening of Ca2+channel modulators.J Biochem Bioph Meth，2004，59:229-239.

22 Oliveira EJ，et al.Intracellular calcium mobilization as a target for the spasmolytic action of scopoletin. Planta Med，2001，67:605-608.

23 Yi T，et al.Comparison of the anti-inflammatory and anti-nociceptive effects of three medicinal plants known as“Snow Lotus”herb in traditional Uighur and Tibetan medicines. J Ethnopharmacol，2010，128:405-411.

24 Zhao D，et al.In vitro antioxidant and anti-inflammatory activities of Angelica decursiva.Arch Pharm Res，2012，35:179-192.

25 Sim?o da Silva KAB，et al.Anti-inflammatory and anti-hyperalgesic evaluation of the condiment laurel (Litsea guatemalensis Mez.)and its chemical composition. Food Chem，2012，132:1980-1986.

26 Ding Z，et al.Anti-Inflammatory effects of scopoletin and underlying mechanisms.Pharm Biol，2008，46:854-860.

27 Mahattanadul S，et al. Effects of Morinda citrifolia aqueous fruit extract and its biomarker scopoletin on reflux esophagitis and gastric ulcer in rats. J Ethnopharmacol，2011，134:243-250.

28 Pan R，et al. Anti-arthritic effect of scopoletin，a coumarin compound occurring in Erycibe obtusifolia Benth stems，is associated with decreased angiogenesis in synovium. Fundam Clin Pharmacol，2010，24:477-490.

29 Ding Z，et al.Hypouricemic action of Scopoletin arising from xanthine oxidase inhibition and uricosuric activity. Planta Med，2005，71:183-185.

30 Ezzat SM，et al.Hepatoprotective constituents of Torilis radiata Moench (Apiaceae).Nat Prod Res，2012，26:282-285.

31 Chang TN，et al. Hepatoprotective effect of Crossostephium chinensis(L.)Makino in rats.The Am J Chinese Med，2011，39:503-521.

32 Han JM，et al.Aqueous extract of Artemisia iwayomogi Kitamura attenuates cholestatic liver fibrosis in a rat model of bile duct ligation.Food Chem Toxicol，2012，50:3505-3513.

33 Yin HL，et al.Four new coumarinolignoids from seeds of Solanum indicum.Fitoterapia，2012，84:360-365.

34 Noh JR，et al.Hepatoprotective effects of chestnut (Castanea crenata)inner shell extract against chronic ethanol-induced oxidative stress in C57BL/6 mice .Food chem toxicol，2011，49:1537-1543.

35 Noh JR，et al. Chestnut (Castanea crenata)inner shell extract inhibits development of hepatic steatosis in C57BL/6 mice fed a high-fat diet.Food Chem，2010，121:437-442.

36 Hornick A，et al.Effects of the coumarin scopoletin on learning and memory，on release of acetylcholine from brain synaptosomes and on long-term potentiation in hippocampus.BMC Pharmacology，2008，8:A36.

37 Anand P，et al.A review on coumarins as acetylcholinesterase inhibitors for Alzheimer's disease. Bioorgan Med Chem，2012，20:1175-1180.

38 Pachauri SD，et al.Protective effect of fruits of Morinda citrifolia L.on scopolamine induced memory impairment in mice:a behavioral，biochemical and cerebral blood flow study. J Ethnopharmacol，2012，139:34-41.

39 Yang K，Zeng CH. Experimental Studies on Antipyretic Mechanisms of Scpoletin. Chin J Drug Appli and Monitor，2006，3:24-29.

40 Thuong PT，et al. Antioxidant activities of coumarins from Korean medicinal plants and their structure-activity relationships.Phytother Res，2010，24:101-106.

41 Xia YF(夏玉鳳)，et al. Studies on absorption kinetics of scopoletin in rat stomachs and intestines.Chin J Chin Mater Med(中國中藥雜志)，2008，33:1890-1896.

42 Galkin A，et al.Coumarins permeability in Caco-2 cell model.J Phar Pharmacol，2009，61:177-184.

43 Leszczynski B，et al.Effect of methoxyphenols on grain aphid feedingbehaviour.Entomol Exp Appl，1995，76:157-162.

44 Moheb A，et al.Changes in wheat leaf phenolome in response to cold acclimation.Phytochemistry，2011，72:2294-2307.

45 Peterson JK，et al.Biological activities and contents of scopolin and scopoletin in sweetpotato clones. Hortscience，2003，36:1129-1133.

46 Jackson DM，Bohac JR.Resistance of sweet potato genotypes to adult Diabrotica beetles.J Econ Entomol，2007，100:566-572.

47 Vera N，et al. Toxicity and synergism in the feeding deterrence of some coumarins on Spodoptera frugiperda Smith(Lepidoptera:Noctuidae).Chem Biodivers，2006，3:21-26.

48 Tripathi AK，et al.Insect feeding deterrent and growth inhibitory activities of scopoletin isolated from Artemisia annua against Spilarctia obliqua (Lepidoptera:Noctuidae). Insect Sci，2011，18:189-194.

49 Adfa M，et al. Antitermite activities of coumarin derivatives and scopoletin from Protium javanicum Burm. f.. J Chem Ecol，2010，36:720-726.

50 Adfa M，et al. Antitermite activity of 7-alkoxycoumarins and related analogs against Coptotermes formosanus Shiraki. Int Biodeter Biodegr，2012，74:129-135.

51 Tunon H，et al.Arthropod repellency，especially tick (Ixodes ricinus)，exerted by extract from Artemisia abrotanum and essential oil from flowers of Dianthus caryophyllum. Fitoterapia，2006，77:257-261.

52 Kovendan K，et al.Larvicidal activity of Morinda citrifolia L.(Noni)(Family:Rubiaceae)leaf extract against Anopheles stephensi，Culex quinquefasciatus，and Aedes aegypti.Parasitol Res，2012，111:1481-1490.

53 Zhang YQ(張永強(qiáng)).Studies on acaricidal action mechanism and bio-guided isolation of bioactive substance from Artemisia annua L.(Compositae:Artemisia).Chongqing:Southwest University(西南大學(xué))，PhD.2008.

54 Zhang YQ，et al.Studies on acaricidal bioactivities of Artemisia annua L.extracts against Tetranychus cinnabarinus Bois.(Acari:Tetranychidae).Agr Sci China，2008，7:577-584.

55 Yang ZG(楊振國)，et al.Effect of temperature on toxicities of scopoletin and bisdemethoxycurcumin against Tetranychus cinnabarinus (Acari:Tetranychidae).Acta Entom Sin (昆蟲學(xué)報(bào))，2012，54:420-425.

56 Yong XJ(雍小菊)，et al. Sublethal effects of scopoletin on the experimental population of the carmine spider mite，Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)(Acari:Tetranychidae).Acta Entom Sin(昆蟲學(xué)報(bào))，2011，54:1377-1383.

57 Liang W(梁為)，et al.Preliminary study on scopoletin toxicity to Tetranychus cinnabarinus and its acaricidal mechanism.Guangdong Agric Sci(廣東農(nóng)業(yè)科學(xué))，2011，38:68-71.

58 Gnonlonfin GJB，et al.Review Scopoletin – A coumarin phytoalexin with medicinal properties.Crit Rev Plant Sci，2012，31:47-56.

59 Hino F，et al. Effect of 2，4-Dichlorophenoxyacetic acid on glucosylation of scopoletin to scopolin in tobacco tissue culture.Plant Physiol，1982，69:810-813.

60 Sharan M，et al. Effects of methyl jasmonate and elicitor on the activation of phenylalanine ammonia-lyase and the accumulation of scopoletin and scopolin in tobacco cell cultures.Plant Sci，1998，132:13-19.

61 Grosskinsky DK，et al.Cytokinins mediate resistance against Pseudomonas syringae in tobacco through increased antimicrobial phytoalexin synthesis independent of salicylic acid signaling.Plant Physiol，2011，157:815-830.

62 Lerat S，et al.Streptomyces scabiei and its toxin thaxtomin A induce scopoletin biosynthesis in tobacco and Arabidopsis thaliana.Plant Cell Rep，2009，28:1895-1903.

63 Chaerle L，et al.Multicolor fluorescence imaging for early detection of the hypersensitive reaction to tobacco mosaic virus.J Plant Physiol，2007，164:253-262.

64 Taguchi G，et al.Scopoletin uptake from culture medium and accumulation in the vacuoles after conversion to scopolin in 2，4-D-treated tobacco cells.Plant Sci，2000，151:153-161.

65 Chong J. Downregulation of a pathogen-responsive tobacco UDP-Glc:Phenylpropanoid glucosyltransferase reduces scopoletin glucoside accumulation，enhances oxidative stress，and weakens virus resistance. Plant Cell，2002，14:1093-1107.

66 Fraissinet-Tachet L，et al.Two tobacco genes induced by infection，elicitor and salicylic acid encode glucosyltransferases acting on phenylpropanoids and benzoic acid derivatives，including salicylic acid.FEBS lett，1998，43:319-323.

67 Gachon C，et al. Over-expression of a scopoletin glucosyltransferase in Nicotiana tabacum leads to precocious lesion formation during the hypersensitive response to tobacco mosaic virus but does not affect virus resistance.Plant Mol Biol，2004，54:137-146.

68 Shirron N，Yaron S. Active suppression of early immune response in tobacco by the human pathogen Salmonella Typhimurium.PloS One，2011，6:e18855.

69 Dutsadee C，Nunta C. Induction of peroxidase，scopoletin，phenolic compounds and resistance in Hevea brasiliensis by elicitin and a novel protein elicitor purified from Phytophthora palmivora.Physiol Mol Plant P，2008，72:179-187.

70 El Oirdi M，et al. The nature of tobacco resistance against Botrytis cinerea depends on the infection structures of the pathogen.Environ Microbiol，2010，12:239-253.

71 Goy PA，et al. Accumulation of scopoletin is associated with the high disease resistance of the hybrid Nicotiana glutinosa× Nicotiana debneyi.Planta，1993，191:200-206.

72 Sanzani SM，et al.Control of Penicillium expansum and patulin accumulation on apples by quercetin and umbelliferone.Eur Food Res Technol，2008，228:381-389.

73 Valle T，et al.Antifungal activity of scopoletin and its differential accumulation in Ulmus pumila and Ulmus campestris cell suspension cultures infected with Ophiostoma ulmi spores.Plant Sci，1997，125:97-101.

74 Carpinella MC，et al.Antifungal synergistic effect of scopoletin，ahydroxycoumarin isolated from Melia azedarach L.fruits.J Agr Food Chem，2005，53:2922-2927.

75 Einhellig FA.Mode of Allelochemical action of phenolic compounds.In allelopathy:chemistry and mode of action of allelochemicals.Boca Raton:CRC Press，2004.217-238.

76 Kim YO，Lee EJ.Comparison of phenolic compounds and the effects of invasive and native species in East Asia:support for the novel weapons hypothesis.Ecol Res，2011，26:87-94.

77 Bhowmik PC，Inderjit.Challenges and opportunities in implementing allelopathy for natural weed management.Crop Prot，2003，22:661-671.

78 Pollock BM，et al. Studies on roots. II. Effects of coumarin，scopoletin and other substances on growth. Am J Bot，1954，41:521-529.

79 Avers CJ，Goodwin RH. Studies on roots. IV. Effects of coumarin and scopoletin on the standard root growth pattern of Phleum pretense.Am J Bot，1956，43:612-620.

80 Andreae WA.Effect of scopoletin on indoleacetic acid metabolism.Nature，1952，70:83-84.

81 Fay PK，Duke WB.An Assessment of allelopathic potential in Avena germ plasm.Weed Sci，1977，25:224-228.

82 del Corral S，et al. Phytotoxic halimanes isolated from Baccharis salicifolia (Ruiz ＆ Pad.)Pers.Phytochem Lett，2012，5:280-283.

83 Hossain MD，F(xiàn)ujita M. Effect of esculetin on activities of pumpkin glutathione S-transferases and growth of pumpkin seedlings.Biol Plantarum，2009，53:565-568.