乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中p53和表皮生長因子受體的表達(dá)及其意義

仇加高

乳腺浸潤性導(dǎo)管癌是女性常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率逐年上升。我們通過研究p53、EGFR在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)，探討兩者與浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)生發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移等臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集本院2006～2011年乳腺浸潤性導(dǎo)管癌標(biāo)本160例，均為女性，年齡30～87歲，中位年齡54歲，同時收集正常乳腺組織30例。p53、EGFR試劑及二抗、DAB顯色劑均購自福州邁新公司。

1.2 方法

所有切除標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林溶液固定24 h。常規(guī)取材，脫水、透明，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，1張行HE染色，在光鏡下進(jìn)行診斷，按WHO浸潤性乳腺癌分級法進(jìn)行分級。另2張采用SP法行免疫組織化學(xué)染色。染色結(jié)果經(jīng)2位有經(jīng)驗的病理醫(yī)師在光鏡下進(jìn)行判定。

1.3 結(jié)果判斷

EGFR為細(xì)胞膜見黃色或棕色染色為陽性，p53為細(xì)胞核見黃色或棕色染色為陽性。細(xì)胞膜、細(xì)胞核染色為淡黃色記1分，黃色或棕黃色記2分，棕黑色記3分；染色細(xì)胞數(shù)在全部細(xì)胞數(shù)中占比<10%記0分，10%～30%記1分，30%～70%記2分，≥70%記3分。將2種得分相乘，分值為0則是陰性(-)，分值為1或2分是弱陽性(+)，分值為3或4分是陽性(++)，分值為6～9分是強陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。p53、EGFR染色在正常乳腺組織、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中陽性表達(dá)強度及兩者在患者年齡、病理分級、臨床分期、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移中表達(dá)的陽性強度根據(jù)數(shù)值的性質(zhì)采用秩和檢驗和χ2檢驗；p53、EGFR在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中表達(dá)的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)性檢驗。

2 結(jié)果

2.1 p53、EGFR在乳腺組織中的表達(dá)

30例正常乳腺組織p53、EGFR均為陰性表達(dá),160例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中p53、EGFR的陽性表達(dá)率分別為40.63%、63.13%，p53、EGFR在正常乳腺組織、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中的陽性表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 p53、EGFR 在正常乳腺組織、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)(例)

2.2 p53、EGFR表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理特征的關(guān)系

160例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中，p53、EGFR的陽性表達(dá)與癌組織病理分級、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，而與患者的年齡、腫塊大小無關(guān)，見表2。

表2 P53、EGFR的陽性表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管的臨床病理特征的關(guān)系(例)

2.3 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中p53與EGFR表達(dá)的相關(guān)性

在160例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中，p53的表達(dá)與EGFR的表達(dá)無相關(guān)關(guān)系(γs=-0.132,P=0.097)，見表3。

表3 p53表達(dá)與EGFR表達(dá)的相關(guān)性(例)

3 討論

3.1 p53、EGFR在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及其意義

p53基因位于17P13.1，全長16～20 kb，編碼的蛋白由393個氨基酸組成，分子量為53000,與同家族的p63、p73都屬于高度保守的DNA序列[1]。野生型p53蛋白的半衰期短，很快被MDM2分解，突變型p53不能有效激活MDM2表達(dá),使p53失去了MDM2的負(fù)調(diào)控,從而導(dǎo)致了突變型p53在腫瘤細(xì)胞核內(nèi)聚集[2]，故在惡性腫瘤組織中用免疫組化方法檢測到的p53蛋白為突變型p53蛋白。p53基因是人類腫瘤突變頻率最高的抑癌基因[3]。野生型p53突變后，誘導(dǎo)某些異常的基因表達(dá)，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，大約有50%的腫瘤都有p53基因突變[4]。

表皮生長因子受體(EGFR)為Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶生長因子受體，是單鏈跨膜糖蛋白，包含1186個氨基酸，由1個胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)、1個跨膜區(qū)和1個胞外配體結(jié)合區(qū)構(gòu)成[5]。EGFR具有酪氨酸激酶活性，能特異性地和EGF、轉(zhuǎn)化生長因子α、B-細(xì)胞素等結(jié)合，形成二聚體，啟動激活一系列的信號傳導(dǎo)通路[6]，如RAS/RAF/MAPK、PTEN/PI3K/AKT等，促進(jìn)細(xì)胞從G期過渡到S期，并降低細(xì)胞的粘附性，從而影響細(xì)胞分化、生存、運動、侵襲和粘附。人們已在較廣泛的腫瘤中發(fā)現(xiàn)EGFR的過度表達(dá)和基因擴(kuò)增，如胃腫瘤、腦腫瘤等，EGFR的過度表達(dá)常與預(yù)后不良、腫瘤血管形成和腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)。

本文采用免疫組化方法檢測p53、EGFR蛋白，兩者的陽性表達(dá)在正常乳腺組織和浸潤性導(dǎo)管癌組織中有顯著差異(P<0.01)，說明p53基因發(fā)生突變，丟失了其抑制細(xì)胞生長、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的功能，反而獲得了新功能，促進(jìn)細(xì)胞增殖，同樣EGFR過表達(dá)促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖、抑制凋亡，促進(jìn)腫瘤的形成，兩者在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)生過程中發(fā)揮了重要作用。p53、EGFR的陽性表達(dá)在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中不同的病理分級、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間有差異(P<0.05)，說明了在浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)展、浸潤、侵襲轉(zhuǎn)移過程中p53、EGFR亦發(fā)揮了一定作用，提示腫瘤細(xì)胞中突變的p53、激活的EGFR促進(jìn)了癌細(xì)胞的浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織的病理分級、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移都與患者的預(yù)后有密切關(guān)系，故p53、EGFR是浸潤性導(dǎo)管癌的重要檢測指標(biāo)，檢測p53、EGFR基因可以提示患者的預(yù)后，和一些學(xué)者的研究結(jié)果相近[7，8]。同時我們通過研究發(fā)現(xiàn)p53、EGFR的陽性表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌腫塊大小、患者年齡無關(guān)。

3.2 p53和EGFR在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中表達(dá)的相關(guān)關(guān)系

本研究發(fā)現(xiàn)在160例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中，p53的表達(dá)強度與EGFR的表達(dá)無相關(guān)性。在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的形成、發(fā)展和浸潤轉(zhuǎn)移過程中p53、EGFR蛋白發(fā)揮了重要作用，但兩者發(fā)揮作用的信號傳導(dǎo)通路可能并不相同，或兩者發(fā)揮作用的某些信號傳導(dǎo)通路相同，但并未達(dá)到足以相互影響的程度，因而我們認(rèn)為p53、EGFR在促進(jìn)乳腺浸潤性導(dǎo)管癌形成、發(fā)展的過程中是相互獨立的因素。

綜上所述，p53和EGFR與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的增殖、粘附、轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，對兩者進(jìn)行檢測有助于判斷患者的預(yù)后，有助于臨床針對表達(dá)陽性的患者進(jìn)行靶向治療。

[1] Marc L,Robert-Alain T,Guy L.p53 and breast cancer,an update〔J〕.Endocrine-Related Cancer,2006,13(2):293.

[2] Kato S,Han SY,Liu W,et al.Understanding the function-structure and function-mutation relationships of p53 tumor suppressor protein by high-resolution missense mutation analysis〔J〕.Proc Natl Acad Sci USA,2003,100(14):8424.

[3] 耿志堅，陳曉峰，喬 慶，等.肺癌中p53及nm23與多藥耐藥基因表達(dá)的相關(guān)分析及預(yù)后意義〔J〕.中國腫瘤臨床與康復(fù)，2005，12(1)：10.

[4] Linksbao G,Yang DQ,Zhou B,et al.Effect of heoadjuvant chemotherapy on estrogen and progesterone receptors and p53 and CerbB-2 in breast cancer〔J〕.Zhong hua Yi Xue Za Zhi,2007,87(40):2843.

[5] Jorissen RN,Walker F,Pouliot N,et al.Epidermal growth f- actor receptor:mechanisms of activation and signaling〔J〕.Exp Cell Res,2003,284(1):31.

[6] Choong NW,Cohen EE.Epidermal growth factor receptor d-eirected therapy in head and neck cancer〔J〕.Crit Rev Oncol Hematol,2006,57(1):25.

[7] 古穎春,蘇天璐,胡詠汶，等.bcl-2、p53蛋白在肺癌組織中的表達(dá)及其意義〔J〕.實用癌癥雜志，2007，22(4)：409.

[8] 谷化平，尚培中.EGFR、VEGF和PTEN在結(jié)直腸癌中表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系〔J〕.實用癌癥雜志,2011,26(3):259.