過敏性紫癜患兒血清和尿液sICAM－1、sVCAM－1水平檢測*

黃巖杰，李玉蕊，趙麗麗，張 建，梅曉峰，丁 櫻，翟文生，任獻(xiàn)青

河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科鄭州450000

△女，1969年5月生，博士，教授，副主任醫(yī)師，研究方向:小兒腎臟病和結(jié)締組織病的防治，E-mail:huangyanjie69@hotmail.com

過敏性紫癜(Henoch-schonlein purpura，HSP)是兒科一種常見的血管變態(tài)反應(yīng)性疾病，以皮膚紫癜、消化道黏膜出血、關(guān)節(jié)腫痛及血尿、蛋白尿等癥狀為主要臨床表現(xiàn)。據(jù)國內(nèi)報(bào)道［1-2］25%～60%HSP 患兒病程中出現(xiàn)尿檢異常，如以腎活檢為準(zhǔn)，則90%以上有不同程度的腎受累，嚴(yán)重者會發(fā)生過敏性紫癜性腎炎(Henoch-schonlein purpura nephritis，HSPN)。腎臟受損的程度是決定HSP 遠(yuǎn)期預(yù)后的主要因素［1-2］。已有研究［3］發(fā)現(xiàn)，單側(cè)輸尿管梗阻(unilateral ureteral occlusion，UUO)大鼠尿液和腎臟組織中細(xì)胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)水平增高，腎組織ICAM-1 水平與炎細(xì)胞浸潤、腎小管間質(zhì)損傷病理評分呈正相關(guān)，提示由ICAM-1 介導(dǎo)的炎細(xì)胞在腎小管間質(zhì)的浸潤與腎組織損傷關(guān)系密切。該研究應(yīng)用ELISA 法測定HSP 患兒血清和尿液中可溶性ICAM-1(sICAM-1)和可溶性血管細(xì)胞黏附分子-1(soluble vascular cellular adhesion molecule-1，sVCAM-1)水平，探討?zhàn)じ椒肿釉谛篐SP 發(fā)病及病情監(jiān)測中的作用。

1 對象與方法

1.1 診斷標(biāo)準(zhǔn) HSP 的診斷參照諸福棠《實(shí)用兒科學(xué)》第7 版及1990年美國風(fēng)濕病學(xué)會診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。HSPN 的診斷參照中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會腎臟病學(xué)會組2009年制定的兒童《紫癜性腎炎的診斷循證指南(試行)》的診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］。

1.2 臨床資料 病例入選及排除標(biāo)準(zhǔn):①符合上述HSP 或HSPN 診斷標(biāo)準(zhǔn)，年齡2～18 歲。②初發(fā)病例，收集血、尿標(biāo)本前2 周內(nèi)未使用過糖皮質(zhì)激素、非甾體類抗炎藥物或免疫抑制劑、抗凝劑、止血劑。③排除血小板減少性紫癜、紅斑狼瘡、川崎病及合并急性感染等。④家屬知情同意。根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)，選擇2011年3月至2012年3月河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科腎臟病區(qū)的67例住院HSP 患兒為病例組，其中無腎損傷37例(NO-HSPN組)，存在腎損傷30例(HSPN組)。HSPN組30例中單純鏡下血尿4例，血尿伴持續(xù)蛋白尿13例，腎病綜合征1例，血尿及腎病綜合征者12例;19例行腎穿刺活檢，Ⅱa 型2例，Ⅱb 型4例，Ⅲa 型9例，Ⅲb 型4例。隨機(jī)選擇同期河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院體檢中心體檢的健康兒童20例為正常對照組，既往無血液、肝臟、腎臟及心臟病等病史。常規(guī)方法檢測24 h 尿蛋白定量。

1.3 血清和尿液sICAM-1、sVCAM-1 的檢測 病例組均在入院后第2 天清晨空腹抽取肘靜脈血2 mL，留取晨尿2 mL，1 000 r/min 離心10 min 后，取上清液，于－70℃冷凍保存以備統(tǒng)一檢測。健康兒童體檢當(dāng)日晨起空腹采血，并留取尿液標(biāo)本，標(biāo)本處理同上。采用ELISA 法檢測血清和尿液sICAM-1、sVCAM-1，ELISA 試劑盒均購自法國DIACLONE 公司，檢測步驟嚴(yán)格按說明書執(zhí)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。3組血清和尿液sICAM-1、sVCAM-1 水平的比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)，對HSPN組尿液黏附分子水平與24 h 尿蛋白定量進(jìn)行直線相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 3組血清和尿液sICAM-1 、sVCAM-1 水平的比較 見表1。

2.2 HSPN組尿液黏附分子水平與24 h 尿蛋白定量的相關(guān)性分析 HSPN組24 h 尿蛋白定量為(1.19±1.00)g/L，其與尿液sVCAM-1 水平呈線性正相關(guān)(r =0.625，P =0.003)，與sICAM-1 無線性相關(guān)關(guān)系(r=0.025，P=0.920)。

表1 3組血清和尿液sICAM-1 和sVCAM-1 水平的比較

3 討論

黏附分子介導(dǎo)炎性細(xì)胞向特異組織、器官定向轉(zhuǎn)移、浸潤，在炎癥的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用［6］。ICAM-1 屬于免疫球蛋白超家族，是誘導(dǎo)炎性細(xì)胞向腎間質(zhì)組織浸潤的主要黏附分子，在腎小管間質(zhì)纖維化早期發(fā)揮重要作用［7］。有研究［8］發(fā)現(xiàn)糖尿病大鼠尿和腎組織ICAM-1 表達(dá)均增加，尿ICAM-1 排泄率與尿白蛋白及視黃醇結(jié)合蛋白、腎臟指數(shù)成正相關(guān)。作者前期對UUO 大鼠模型的研究［3］發(fā)現(xiàn)，正常大鼠腎臟和尿液ICAM-1 不表達(dá)或者低表達(dá)，造模后第7、14 天UUO 大鼠腎組織和尿液ICAM-1 水平及腎間質(zhì)損傷指數(shù)均較假手術(shù)組明顯增高，且腎組織ICAM-1 水平與尿液ICAM-1 水平、腎間質(zhì)損傷指數(shù)均呈明顯正相關(guān)。該研究發(fā)現(xiàn)HSP 患兒血清sICAM-1 水平在NO-HSPN組、HSPN組及正常對照組之間無明顯差異，而NO-HSPN組和HSPN組尿液sICAM-1 水平明顯高于正常對照組。結(jié)合既往的研究結(jié)果，作者認(rèn)為HSP 患兒尿液中sICAM-1 濃度的增加并非來自血液循環(huán)，而是來自腎組織的高表達(dá)。

HSP 是由各種原因所致的血管炎癥、壞死為主要病理特征的一組疾病，可引起相應(yīng)器官和組織免疫炎性損傷，腎臟是較常受累的器官之一。正常腎組織不表達(dá)或少量表達(dá)VCAM-1，有報(bào)道［9］提示HSPN 患兒腎小管上皮細(xì)胞VCAM-1 表達(dá)明顯增多。該研究中作者發(fā)現(xiàn)HSP 患兒血清sVCAM-1 水平并未較正常對照組明顯增高，但尿中明顯增高，尤其HSPN 患兒，尿液中sVCAM-1 水平明顯高于NOHSPN組和正常對照組。該研究還發(fā)現(xiàn)HSPN 患兒尿液sVCAM-1 水平與24 h 尿蛋白定量呈線性正相關(guān)。上述結(jié)果說明HSPN 患兒尿液中sVCAM-1 水平增高可能源于腎組織中sVCAM-1 的高表達(dá)，提示黏附分子sVCAM-1 參與了腎組織的免疫炎性病變和由此介導(dǎo)的腎損傷。

綜上所述，在HSPN 患兒血清sICAM-1 和sVCAM-1 水平無明顯變化的情況下，尿液sICAM-1、sVCAM-1 水平增高，尤其是HSPN 患兒尿液sVCAM-1 水平增加明顯，并與腎損傷相關(guān)。因此，作者認(rèn)為尿液sVCAM-1 水平可以作為免疫炎性損傷的指標(biāo)，協(xié)助用于HSPN 臨床抗炎治療效果的動態(tài)評價(jià)。

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