產(chǎn)后抑郁癥與雌激素受體β基因的多態(tài)性

汪廣劍，瞿發(fā)林，仲愛(ài)芳，卜 瑩，閆同軍

抑郁癥是嚴(yán)重困擾人類(lèi)的精神疾病，女性比男性更容易罹患抑郁癥［1］。在產(chǎn)后與圍絕經(jīng)期這段時(shí)期里，卵巢功能減退導(dǎo)致各種激素的分泌減少，尤其是雌激素的減少，從而出現(xiàn)一系列諸如記憶減退、潮熱、失眠、抑郁、焦慮等方面的癥狀。女性對(duì)低激素水平或者激素水平起伏的敏感性高于男性，導(dǎo)致女性發(fā)病率高于男性［2］。雌激素受體［3］(estrogen receptor，ER)，可分為兩種亞型，即ERα和ERβ。人ERβ基因5號(hào)外顯子的配體結(jié)合區(qū)(1082號(hào)核苷酸)可發(fā)生G→A點(diǎn)突變。8號(hào)外顯子的3＇端非編碼區(qū)(1730號(hào)核苷酸)可發(fā)生A→G點(diǎn)突變。當(dāng)這兩處點(diǎn)突變發(fā)生后則分別出現(xiàn)限制性內(nèi)切酶Rsa-Ι和Alu-Ι的識(shí)別位點(diǎn)，因此酶切ERβ的酶切片段就能區(qū)分ERβ的不同基因型。ERβ的這種基因多態(tài)性可能會(huì)影響不同個(gè)體ERβ的表達(dá)水平和功能，進(jìn)而影響體內(nèi)雌激素生物學(xué)效應(yīng)的發(fā)揮。本文以ERβ基因的兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)作為研究對(duì)象，以探討我國(guó)漢族人群中ERβ基因多態(tài)性與女性產(chǎn)后抑郁癥的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 觀察組:選取2000年1月－2010年12月在本院住院治療的常州本地漢族女性抑郁癥124例，年齡21～35歲，病程6周～6個(gè)月，均符合中國(guó)精神障礙分類(lèi)與診斷標(biāo)準(zhǔn)中抑郁癥診斷標(biāo)準(zhǔn)(產(chǎn)后抑郁癥，產(chǎn)后6月內(nèi)發(fā)生)。對(duì)照組:選取同期體檢健康的文化水平、年齡相匹配的女性144例。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 DNA制備:抗凝管抽取靜脈血3 ml，采用德國(guó)QIAGEN公司的基因組DNA試劑盒提取DNA。用軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生產(chǎn)的PCR儀擴(kuò)增DNA。引物由大連寶生物有限公司合成。用于擴(kuò)增Alu-Ι基因的上游引物是5＇-TTTTTGTCCCCATAGTAACA-3＇，下游引物是 5＇-AATGAGGGACCACAGCA-3＇用于擴(kuò)增 RSA-Ι基因的上游引物是 5＇-TCTTGCTTTCCCCAGGCTTT-3＇下游引物是 5 ＇-ACCTGTCCAGAACAAGATCT-3＇，PCR擴(kuò)增及酶切 PCR試劑盒由寶生物(大連)有限公司生產(chǎn)。反應(yīng)條件為:94℃變性30 s，55℃退火50 s，72℃延伸10 min，循環(huán)35次。分別取 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物10 μl，用10 U Rsa-Ι、8 U Alu-Ι于37℃酶切3 h后電泳，用凝膠成像儀觀察電泳結(jié)果。ERβ基因型判定參照相關(guān)文獻(xiàn)［4］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，基因型和等位基因頻率采用基因直接計(jì)數(shù)計(jì)算，應(yīng)用擬合優(yōu)度檢驗(yàn)計(jì)算基因型分布是否符合Hardy-Weinberg(H-W)平衡;組間基因型及等位基因頻率比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基因分析結(jié)果 使用Alu-Ι酶切可區(qū)分出3種基因型:aa型(307 bp)、Aa 型(307、240、67 bp)、AA型(240、67 bp);使用Rsa-Ι酶切可區(qū)分出3種基因型:rr型(156 bp)、Rr型(156、125、31 bp)、RR型(125、31 bp)。

2.2 多態(tài)性分析結(jié)果 兩組Rsa-Ι多態(tài)性分析:觀察組和對(duì)照組均符合H-W平衡定律(P＞0.05);兩組基因型rr、Rr、RR分布的比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);兩組等位基因r和R頻率的比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，表1)。兩組Alu-Ι多態(tài)性分析:產(chǎn)后抑郁癥組和對(duì)照組均符合H-W平衡定律(P ＞0.05);兩組基因型 aa、Aa、AA 分布的比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，兩組等位基因a和A頻率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，表2)。

表1 兩組ERβ Rsa-Ι基因型和等位基因頻率的分析［n(%)］

表2 兩組ERβ Alu-Ι基因型和等位基因頻率的分析［n(%)］

3 討論

抑郁癥是指育齡婦女在產(chǎn)后6周～6個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)抑郁癥狀，其發(fā)生率高于非妊娠期婦女，產(chǎn)后6～12周發(fā)生率為10% ～16%，產(chǎn)后6個(gè)月內(nèi)發(fā)生率為22%。有研究表明雌二醇對(duì)中樞調(diào)節(jié)情緒和認(rèn)知功能有多重影響，雌二醇可增強(qiáng)單胺類(lèi)物質(zhì)活性和突觸后5羥色胺能效應(yīng)，增加5羥色胺能受體數(shù)量和神經(jīng)遞質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收。妊娠后體內(nèi)雌激素水平過(guò)快下降，使腦內(nèi)多巴胺D2受體的超敏和多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)增加亦引起相應(yīng)的抑郁情緒和行為改變。雌激素的最終效應(yīng)不僅取決于雌激素本身的分泌與代謝，還與ER的表達(dá)及功能密切相關(guān)。研究ER的基因多態(tài)性與疾病間的關(guān)系有助于從基因水平闡明這些疾病的發(fā)病機(jī)制。

ERβ基因參與雌激素相關(guān)的基因效應(yīng)近年來(lái)成為研究熱點(diǎn)。Bekku等［5］采用雙側(cè)卵巢切除的雌性大鼠，以其在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)抑郁樣行為(長(zhǎng)時(shí)間的懸浮不動(dòng)-絕望行為)作為絕經(jīng)后抑郁的動(dòng)物模型。并在此抑郁模型的基礎(chǔ)之上，對(duì)抑郁的大鼠分別給予15～30 mg/(kg·d)的雌二醇、丙咪嗪等藥物，發(fā)現(xiàn)雌二醇、丙咪嗪、米那普倫和氟西汀都能夠明顯減少大鼠懸浮的時(shí)間，而東莨菪堿和地西泮無(wú)此作用。證明雌激素的撤退理論是產(chǎn)后，絕經(jīng)期抑郁的一個(gè)重要病因假說(shuō)［4］。有文獻(xiàn)［6］報(bào)道ERβ存在基因多態(tài)性，其中 D14S1026、rs1256031、rs1256112、rs3020444和rs1152588與無(wú)卵癥和貪食癥存在關(guān)聯(lián)。說(shuō)明ERβ基因參與了雌激素撤退引發(fā)的一系列基因效應(yīng)，但對(duì)雌激素減少或撤退引發(fā)的抑郁癥狀的研究甚少。Takeo等［4］則發(fā)現(xiàn)D14S1026與更年期綜合征的抑郁癥存在關(guān)聯(lián)，51例更年期綜合征D14S1026存在14～25個(gè)高度重復(fù)CA序列，并可分成EL、SS、SL和LL4種基因型，其中SS型患者血管運(yùn)動(dòng)癥狀、精神癥狀和經(jīng)前期癥狀與其他幾型相比風(fēng)險(xiǎn)系數(shù)明顯增高，達(dá)7～13倍。Yu等［7］則發(fā)現(xiàn)ERβ Rsa-Ι多態(tài)性與圍絕經(jīng)期女性抑郁癥無(wú)相關(guān)性。

基因多態(tài)性存在種族、民族和地域的差異，本研究選取常州本地漢族婦女，發(fā)現(xiàn)ERβ Alu-Ι多態(tài)性可能與常州地區(qū)漢族女性產(chǎn)后抑郁癥的易感性相關(guān)，含等位基因A的基因型可能增加患抑郁癥的風(fēng)險(xiǎn)，但未發(fā)現(xiàn)含R等位基因的基因型與患產(chǎn)后抑郁癥的關(guān)系。不排除因科研設(shè)計(jì)不完善導(dǎo)致結(jié)果有所偏差，應(yīng)全面考慮、進(jìn)一步驗(yàn)證ERβ基因與產(chǎn)后抑郁癥的關(guān)系。

［1］ 翟書(shū)濤.婦女精神衛(wèi)生［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1999:192.

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