毛櫻桃核殼及核仁揮發(fā)油成分分析

孫晶波, 王 潔, 劉春巖, 齊志偉, 曹成文, 喬瑩瑩, 張 菁, 張成義

(北華大學 藥學院, 吉林 吉林 132013)

毛櫻桃(Prunustomentosa), 俗稱山櫻桃、 野櫻桃, 屬薔薇科, 李屬野生或半野生植物[1], 其根、 葉、 核及鮮果均可入藥, 具有調中和益脾的功效, 可治療四肢癱瘓、 風濕腰疼及炎癥性疾病等[2-4]. 本文通過水蒸汽蒸餾法提取毛櫻桃核殼及核仁中的揮發(fā)油, 并利用氣相色譜/質譜(GC-MS)對其成分進行分析對比.

1 儀器與試劑

6890N/5973I型GC-MS(美國安捷侖公司)； BB89-2000型揮發(fā)油提取器(北京中西遠大科技有限公司)； AB135-S型電子天平(美國梅特勒公司)； HHSI1-NI4型調溫電熱套(北京長安公司). 毛櫻桃果核購于吉林市土特產批發(fā)市場, 經北華大學藥學院李鳳麗教授鑒定為長白山脈產毛櫻桃的果核, 經人工破碎篩選出核殼和核仁; 其他試劑均為國產分析純.

2 實 驗

2.1 毛櫻桃核殼及核仁中揮發(fā)油的提取 將常溫干燥的毛櫻桃核殼及核仁粉碎, 過40目篩. 稱取30 g, 置于500 mL圓底燒瓶中, 加入300 mL雙蒸水, 按2010年版《中國藥典》附錄XD揮發(fā)油測定法, 將其連接揮發(fā)油提取器提取揮發(fā)油, 加熱回流6 h, 利用重蒸乙醚萃取揮發(fā)油, 經無水碳酸鈉干燥, 過濾, 除水后的萃取液濃縮為2.0 mL無色油狀液體, 置于冰箱中備用.

2.2 測試條件 氣相色譜條件： 色譜柱為DB-1(30 mm×0.25 mm×0.25 μm)毛細管柱. 升溫程序： 柱溫50 ℃保持2 min, 以10 ℃/min升至180 ℃, 保持1 min, 以6 ℃/min升至280 ℃, 保持10 min； 進樣口溫度為250 ℃； 分流比為40∶1； 載氣為氦氣； 載氣流量為1.0 mL/min； 溶劑延遲為1.9 min. 質譜條件: 離子源為電子轟擊(EI)； 離子化模式為負離子； 電離電壓為70 eV；m/z為35～550； 離子源溫度為250 ℃； MS譜庫為NIST庫.

3 結果與討論

3.1 GC/MS分析鑒定結果 分別取毛櫻桃核殼及核仁揮發(fā)油乙醚液0.2 μL, 采用GC-MS法對其分析檢測, 結果如圖1和圖2所示, 共檢測出68種成分, 通過檢索標準數據庫, 并結合文獻[5-6]解析, 確認了毛櫻桃核殼及核仁揮發(fā)油的化學成分36種. 利用峰面積歸一化法計算求得各化學成分在揮發(fā)油中的相對質量分數, 結果列于表1.

圖1 核殼揮發(fā)油總離子流Fig.1 Total ions flow chart of the shell essential oil

圖2 核仁揮發(fā)油總離子流Fig.2 Total ions flow chart of the kernel essential oil

編號保留時間/min化合物相對質量分數/%核殼核仁編號保留時間/min化合物相對質量分數/%核殼核仁12.081醋酸0.08167.804苯甲醇1.421.6822.216乙酸乙酯0.272.45177.881苯乙醛0.3032.372甲基環(huán)戊烷0.13188.809苯甲酸甲酯0.0242.569苯0.06199.892(+)-二苯甲酰-L-酒石酸酐0.92 52.8403-羥基-2-丁酮0.042010.069苯甲酸2.880.9663.265乙縮醛二乙醇0.192110.058苯甲酸乙酯1.3773.587乳腈0.030.682210.445水楊酸甲酯0.0483.6812,3-丁二醇0.322311.033安息香乙醚0.3538.6294.303四氫異噁唑3.592411.792苯乙醇腈1.61104.310(1)-3-甲基-2-丁醇1.782511.9214,5-二甲基-2-苯基-1,3-二氧戊環(huán)0.07 114.3693-糠醛0.082612.174反,反-2,4-癸二烯醛0.03124.4452-乙氧基-丁烷0.082718.080苯甲酸芐酯0.160.36135.151乙基苯0.022819.586鄰苯二甲酸二苯酯0.03146.610苯甲醛87.7448.752920.944鄰苯二甲酸二丁酯0.02157.5861-五烯-3醇0.02

3.2 討 論 采用GC-MS檢測揮發(fā)油類成分, 并與標準數據庫比較, 不需要標準品, 與其他鑒定方法相比具有簡單、 快速、 準確的優(yōu)點[7-8]. 從毛櫻桃核殼揮發(fā)油中共分離出48種成分, 鑒定了其中的24種成分, 占揮發(fā)油總檢測峰面積的97.45%. 其中質量分數較高的成分是苯甲醛(87.74%)、 苯甲酸(2.88%)、 (1)-3-甲基-2-丁醇(1.78%)、 苯乙醇腈(1.61%)和苯甲醇(1.42%). 從毛櫻桃核仁揮發(fā)油中檢測并鑒定出12種化學成分, 其中質量分數較高的成分是苯甲醛(48.75%)、 安息香乙醚(38.62%)、 四氫異噁唑(3.59%)、 乙酸乙酯(2.45%)、 苯甲醇(1.68%)和苯甲酸乙酯(1.37%). 分析結果表明, 苯甲醛在核殼和核仁揮發(fā)油中的質量分數均較高, 天然苯甲醛對霉菌和細菌均有一定的抑制作用[9]. 在質量分數大于1%的化合物中, (1)-3-甲基-2-丁醇(1.78%)和苯乙醇腈(1.61%)僅存在于毛櫻桃核殼中, 苯甲酸(1.37%)和四氫異噁唑(3.59%)僅存在于核仁中. 可見毛櫻桃核殼與核仁揮發(fā)油中所含成分及各成分的質量分數存在較大差異. 毛櫻桃核殼及核仁揮發(fā)油中以醇、 醛、 酸和酯類成分為主, 與其他揮發(fā)油中常見的檸檬烯、 萜烯和萜醇類成分不同[10], 與田棣等[11]報道的假奓包葉果殼揮發(fā)油成分類型相近, 但各成分的質量分數差異較大.

綜上, 本文通過研究毛櫻桃核殼及核仁的化學成分, 得到了毛櫻桃核殼及核仁揮發(fā)油的成分及質量分數, 為毛櫻桃在藥理和藥效學的研究奠定了理論基礎.

[1] GAO Hai-sheng, XIAO Yue-juan, LIU Xiu-feng, et al. Study on the Nutritive Compositions ofPrunustomentosaThunb Fruit [J]. Food Science, 2002, 23(6): 110-112. (高海生, 肖月娟, 劉秀鳳, 等. 毛櫻桃果實營養(yǎng)成分分析研究 [J]. 食品科學, 2002, 23(6): 110-112.)

[2] GAO Hai-yan, ZHAO Lei, HU Xiao-song, et al. Study on the Extraction and Stability of Cherry Pigment [J]. Food and Fermentation Industries, 2003, 29(4): 54-57. (高海燕, 趙鐳, 胡小松, 等. 櫻桃色素的提取及穩(wěn)定性研究 [J]. 食品與發(fā)酵工業(yè), 2003, 29(4): 54-57.)

[3] XIONG Wei-wei, DING Xue-xing, FU Yao, et al. A Study on Cherry’s Ingredient and Its Pharmacological Effects [J]. Journal of Beihua University: Natural Science, 2010, 11(5): 408-411. (熊蔚蔚, 丁雪馨, 付瑤, 等. 櫻桃成分及其藥理作用的研究 [J]. 北華大學學報: 自然科學版, 2010, 11(5): 408-411.)

[4] Zhang C Y, Shao S H, Chen X, et al. Anti-frostbite Effects ofPrunustomentosaThunb Total Flavone [J]. European Journal of Inflammation, 2011, 9(1): 65-71.

[5] 從浦珠, 李筍玉. 天然有機質譜學 [M]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2002: 783-808.

[6] Heller S R, Milne G W A. EPA/NIH Mass Spectral Data Base [M]. Washington: Government Printing Office, 1978: 125-129.

[7] BAO Yu-min, ZHANG Li, XU Ling, et al. Species Analysis of Five Trace Elements inTroliuschinensis[J]. Journal of Jilin University: Science Edition, 2011, 49(2): 327-330. (包玉敏, 張力, 徐玲, 等. 蒙藥材金蓮花中5種微量元素的形態(tài)分析 [J]. 吉林大學學報: 理學版, 2011, 49(2): 327-330.)

[8] GU Xiao-lin, WANG Lu-li, LI Hong-bin, et al. Chemical Constituents ofClinopodiumchinensisO.Kuntzevar.grandiflorum(Maxim.) Hara [J]. Journal of Jilin University: Science Edition, 2011, 49(4): 772-776. (谷曉琳, 王陸黎, 李洪斌, 等. 風車草的化學成分 [J]. 吉林大學學報: 理學版, 2011, 49(4): 772-776.)

[9] LI Xue-ling, LING Wei-wei. Study on Extraction Technology and Antimicrobial Effects of Benzaldehyde in Peach Kernel [J]. Journal of Biology, 2010, 27(3): 31-33. (李雪玲, 凌瑋瑋. 桃仁中苯甲醛的提取及其抑菌作用研究 [J]. 生物學雜志, 2010, 27(3): 31-33.)

[10] ZHAO Ou, ZHOU Jian-wei, BAN Da-ming. Analysis of Volatile Oil from Different Parts ofLitseacubeba[J]. Journal of Chinese Medicinal Material, 2010, 33(9): 1417-1419. (趙歐, 周建威, 班大明. 山雞椒不同部位揮發(fā)油化學成分的GC/MS分析 [J]. 中藥材, 2010, 33(9): 1417-1419.)

[11] TIAN Di, REN Lu, DOU Fang, et al. GC-MS Analysis of Essential Oil from Different Parts ofDiscocleidionrufesens[J]. Northwest Pharmaceutical Journal, 2011, 26(5): 331-333. (田棣, 任璐, 竇芳, 等. 假奓包葉不同部位揮發(fā)油的分析比較 [J]. 西北藥學雜志, 2011, 26(5): 331-333.)