E-cadherin和CD44V6對(duì)乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測價(jià)值

孟 新，張程達(dá)，牛雅萱，劉秀瑋，王 蒙，張衛(wèi)東#

1)鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病學(xué)教研室 鄭州 450001 2)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院；北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京 100000 3)河南省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 鄭州 450000

乳癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是乳癌治療中的難題，及早發(fā)現(xiàn)對(duì)乳癌的早日康復(fù)有深遠(yuǎn)意義。許多研究[1-3]表明E-cadherin表達(dá)降低和CD44V6表達(dá)增強(qiáng)與乳癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。該研究對(duì)98例乳癌患者術(shù)后存檔組織蠟塊進(jìn)行E-cadherin、CD44V6檢測，以術(shù)后病理診斷作為腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)用這兩個(gè)指標(biāo)預(yù)測乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的價(jià)值。

1 材料與方法

1.1臨床資料收集河南省人民醫(yī)院2010年10月至2011年10月期間收治的98例患者的乳腺組織存檔蠟塊，經(jīng)病理證實(shí)均為浸潤性導(dǎo)管癌?；颊呔鶠榕?，年齡28～85歲，中位年齡49歲；有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移56例，無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例；臨床TNM分期Ⅰ期4例，Ⅱ期69例，Ⅲ期25例；腫瘤直徑≤2 cm 30例，2～5 cm 60例，>5 cm 6例，直接侵犯胸壁或皮膚2例?；颊咝g(shù)前均未進(jìn)行放療或者化療，均行改良根治術(shù)。

1.2乳癌組織中E-cadherin、CD44V6蛋白檢測標(biāo)本經(jīng)福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋切片，用免疫組化SABC法檢測E-cadherin、CD44V6蛋白。鼠抗人E-cadherin單克隆抗體、鼠抗人CD44V6單克隆抗體、免疫組化試劑盒均購于上海長嘉公司。實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。最后經(jīng)顯色、復(fù)染、脫水、透明和封片后，光鏡下觀察。E-cadherin陽性表現(xiàn)為胞膜或細(xì)胞連接部位出現(xiàn)棕黃色顆粒，高倍鏡下共計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，陽性細(xì)胞百分率>90%為陽性，≤90%或僅為胞質(zhì)染色或無染色為陰性。CD44V6陽性表現(xiàn)為胞膜出現(xiàn)棕色顆粒，高倍鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，陽性細(xì)胞百分率≥10%為陽性，<10%為陰性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以術(shù)后病理診斷作為腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的金標(biāo)準(zhǔn)，分別計(jì)算E-cadherin和CD44V單獨(dú)或聯(lián)合預(yù)測的靈敏度、特異度、誤診率、漏診率，進(jìn)行真實(shí)性評(píng)價(jià)；計(jì)算一致率和Kappa指數(shù)，進(jìn)行可靠性評(píng)價(jià)；檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1E-cadherin和CD44V6在乳癌組織中的表達(dá)98例標(biāo)本中，E-cadherin陽性61例，陰性37例。CD44V6陽性52例，陰性46例。

2.2E-cadherin和CD44V6表達(dá)對(duì)乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測結(jié)果E-cadherin、CD44V6單獨(dú)及聯(lián)合診斷結(jié)果見表1～4，預(yù)測結(jié)果見表5。

表1 E-cadherin對(duì)乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷結(jié)果

Kappa=0.507,P=0.001。

表2 CD44V6對(duì)乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷結(jié)果

Kappa=0.259,P=0.010。

表3 E-cadherin/CD44V6串聯(lián)診斷結(jié)果

Kappa=0.332,P<0.001。

表4 E-cadherin/CD44V6并聯(lián)診斷結(jié)果

Kappa=0.445，P<0.001。

表5 E-cadherin、CD44V6單獨(dú)及聯(lián)合預(yù)測結(jié)果

3 討論

臨床上篩查乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)的方法比較多，主要是影像學(xué)診斷，如超聲、MR以及鉬靶X線結(jié)合彩超，還有近年來發(fā)展起來的成本較高的PET-CT等分子顯像方法。如果要對(duì)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)價(jià)，需要依賴腋窩清掃篩選和病理檢查結(jié)果。目前對(duì)于腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)仍然存在爭議，其對(duì)患者的主要?jiǎng)?chuàng)傷是上肢水腫，可引起患者不同程度的并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[4]。有些分子生物學(xué)指標(biāo)與乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，可以用來預(yù)測淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)，而且不會(huì)對(duì)患者產(chǎn)生任何影響。E-cadherin是鈣離子介導(dǎo)的黏附調(diào)節(jié)分子，廣泛分布于上皮組織中，細(xì)胞上E-cadherin表達(dá)水平降低或活性受到抑制會(huì)使正常細(xì)胞與細(xì)胞間的黏附減弱，影響細(xì)胞分化和黏著，腫瘤細(xì)胞間的連接也降低，腫瘤細(xì)胞易從母體脫離，從而發(fā)生轉(zhuǎn)移[5-6]。因此E-cadherin表達(dá)下降或者活性受到抑制，會(huì)增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移。CD44V6蛋白是一種跨膜性糖蛋白黏附分子，CD44V6表達(dá)水平可以用作判斷乳癌轉(zhuǎn)移傾向的臨床參考指標(biāo)[7]。

該研究采用單一因素和聯(lián)合模式評(píng)價(jià)E-cadherin和CD44V6對(duì)乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測價(jià)值。在單一因素模式中，E-cadherin預(yù)測淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的特異度達(dá)92.86%，誤診率為7.14%，而且一致率為74.49%，說明用E-cadherin預(yù)測無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的特異性很強(qiáng)，這對(duì)乳癌的研究有很大價(jià)值。有文獻(xiàn)[8]報(bào)道有70%～75%的患者實(shí)際無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，但目前因缺乏無創(chuàng)傷診斷的檢測方法，這些患者也接受了腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)的過度治療，嚴(yán)重影響了患者術(shù)后的生活質(zhì)量。因此對(duì)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)進(jìn)行相對(duì)準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)而使無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者免于淋巴結(jié)清掃將極大改善患者的預(yù)后。E-cadherin的高特異度且簡單無創(chuàng)傷的特點(diǎn)有望用于解決這個(gè)問題。

單一模式CD44V6預(yù)測淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的靈敏度和特異度分別為64.29%和61.91%，其預(yù)測乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的特異度不及E-cadherin。Jansen等[9]認(rèn)為CD44V6不能成為乳癌預(yù)后的獨(dú)立因素,尚無充足的證據(jù)可以肯定CD44 變異型與腫瘤進(jìn)展密切相關(guān)。但CD44V6是黏附分子，其過度表達(dá)是乳癌浸潤轉(zhuǎn)移的一個(gè)重要因素[10]。作者又研究了E-cadherin和CD44V6聯(lián)合模式，發(fā)現(xiàn)串聯(lián)模式預(yù)測淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)的特異度高達(dá)95.24%，說明把E-cadherin和CD44V6結(jié)合起來預(yù)測腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比單以E-cadherin預(yù)測的特異度要高，可據(jù)此較為準(zhǔn)確地判定無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，為腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)的取舍和術(shù)后治療方案的選擇提供有益的參考。并聯(lián)模式預(yù)測的靈敏度(83.93%)比單一因素預(yù)測的靈敏度都要高，所以采用E-cadherin和CD44V6并聯(lián)模式進(jìn)行預(yù)測可以提高乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的檢出率。

綜上所述，E-cadherin單一因素和E-cadherin與CD44V6的串聯(lián)模式預(yù)測乳癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的特異度高，可為腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)的取舍和術(shù)后治療方案的選擇提供幫助；CD44V6是否能作為獨(dú)立的觀察指標(biāo)還有爭議，其特異度不如E-cadherin，但與E-cadherin并聯(lián)后檢測的靈敏度上升，能提高腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的檢出率。

[1]Kowalski PJ,Rubin MA，Kleer CG.E-cadherin expression in primary carcinomas of the breast and its distant metastases[J].Breast Cancer Res,2003,5(6):R217

[2]Bassarova AV,Torlakovic E,Sedloev T,et al.Simultaneous bilateral breast carcinoma:histopathological characteristics and CD44/catenin-cadherin profile[J].Histol Histopathol,2005,20(3):791

[3]王丹，齊鳳杰.EphA2和E-cadherin在乳腺癌中的表達(dá)及其與患者預(yù)后的關(guān)系[J].中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志，2010,19(1)：66

[4]Marshall C,Mustafa S,Wheatley DC,et al.A comparison of 18- FDG gamma camera PET,mammography and ultrasonography in demonstrating primary disease in locally advanced breast cancer[J].Nucl Med Commun,2004,25(7):721

[5]陳壬寅，李?yuàn)檴?浸潤性乳腺癌組織上皮鈣依賴粘附素相關(guān)分子的表達(dá)[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2004,39(3)：385

[6]肖鋒，張為民，張文歇.EMT和IGF-1R表達(dá)與吉非替尼二線治療晚期非小細(xì)胞肺癌療效的關(guān)系[J].解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2011，36(6)：563

[7]Kopp R,Classen S,Wolf H,et al.Predictive relevance of soluble CD44v6 serum levels for the responsiveness to second line hormone or chemotherapy in patients with metastatic breast cancer[J].Anticancer Res,2001,21(4B):2995

[8]Jinno H,Ikeda T,Matsui A,et al.Sentinel lymph node biopsy in breast cancer using technetium-99m tin colloids of different sizes[J].Biomed Pharmacother,2002,56(suppl 1):213s

[9]Jansen RH,Joosten-Achjanie SR,Arends JW,et al.CD44v6 is not a prognostic factor in primary breast caner[J].Ann Oncol,1998,9(1):109

[10]王秀清，劉惠民，趙琰龍，等.乳腺癌組織中CD44V6和MMP-2的表達(dá)及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2011,19(2)：273