馬錢(qián)子與赤芍配伍前后成分含量變化的研究

★ 王曉崴 凌珊 龔千鋒 鐘凌云 楊嵩虹 賴(lài)路 (江西中醫(yī)學(xué)院 南昌 330004)

馬錢(qián)子與赤芍配伍前后成分含量變化的研究

★ 王曉崴 凌珊 龔千鋒 鐘凌云 楊嵩虹 賴(lài)路 (江西中醫(yī)學(xué)院 南昌 330004)

目的：研究馬錢(qián)子配伍赤芍對(duì)馬錢(qián)子中主要生物堿的影響。方法：采用HPLC法分別對(duì)馬錢(qián)子配伍赤芍前后及其在人工胃液和人工腸液環(huán)境下其主要生物堿成分士的寧和馬錢(qián)子堿的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：馬錢(qián)子配伍赤芍后其主要生物堿士的寧和馬錢(qián)子堿的含量均有不同程度的降低，其中士的寧下降顯著。結(jié)論：馬錢(qián)子配伍赤芍可降低毒性，為進(jìn)一步闡明馬錢(qián)子合理配伍用藥提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

馬錢(qián)子；赤芍；配伍；士的寧；馬錢(qián)子堿

馬錢(qián)子又名苦實(shí)、番木鱉、馬前子等，為馬錢(qián)科植物馬錢(qián)或云南馬錢(qián)的干燥成熟種子，其性溫、味苦，有大毒，歸肝、脾經(jīng)，具有通絡(luò)止痛、散結(jié)消腫之功，張錫純謂“其開(kāi)通經(jīng)絡(luò)，透達(dá)關(guān)節(jié)之力遠(yuǎn)勝于它藥也”。傳統(tǒng)用于風(fēng)濕頑痹、麻木癱瘓和跌打損傷等，且臨床上用于治療風(fēng)濕頑痹、麻木癱瘓、跌打損傷、癰疽腫痛、癌癥疼痛等療效顯著，但因其毒性大，極大的限制了其臨床應(yīng)用。臨床上馬錢(qián)子中毒時(shí)有發(fā)生，中醫(yī)學(xué)在長(zhǎng)期的醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，積累了一些用中藥進(jìn)行馬錢(qián)子中毒解救的有效方法。因此，研究中藥降低馬錢(qián)子的毒性和解毒的機(jī)制，對(duì)馬錢(qián)子的安全應(yīng)用，具有重要作用。馬錢(qián)子中主要含有士的寧、馬錢(qián)子堿等多種生物堿，其中士的寧和馬錢(qián)子堿既是主要的有效成分，又是有毒成分，從而馬錢(qián)子又成為“最有用亦最難用”之藥，臨床應(yīng)用時(shí)劑量過(guò)大，則易出現(xiàn)毒性反應(yīng)；劑量過(guò)小，則不能達(dá)到療效，故臨床多配伍應(yīng)用。[1-2]本文以馬錢(qián)子中有毒成分士的寧和馬錢(qián)子堿為目標(biāo)物質(zhì)，采用高效液相色譜法(HPLC)方法，分別測(cè)定生、制馬錢(qián)子配伍赤芍，合煎后和其分別在人工胃液和人工腸液兩種環(huán)境中其2種有毒生物堿的含量變化情況，為馬錢(qián)子合理配伍用藥提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器設(shè)備

ultimate3000高效液相色譜儀；PAD檢測(cè)器；ultimate3000自動(dòng)進(jìn)樣器；ultimate3000柱溫箱；PDA檢測(cè)器；Mettler AE240天平(10萬(wàn)分之一)；KQ3200超聲波清洗器(杭州中拓)；KQ3200超聲波清洗器(昆山超聲儀器廠(chǎng))；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(UV-3100PC型，上海美譜達(dá))；R501旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、W501升降恒溫水浴鍋(上海申順生物科技有限公司)；FW100高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(天津市泰斯特)；HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋(國(guó)華電器有限公司)；GZX-9146MBE型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實(shí)業(yè))；自動(dòng)雙重蒸餾器(上海亞榮生化)；容量器皿均經(jīng)校正。

1.2 試劑試藥

士的寧(購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)0705-200306)；馬錢(qián)子堿(購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)0704-200104，經(jīng)純化后，用歸一法測(cè)定含量為98.5%)甲醇(色譜純)(德國(guó)Merck公司)；乙腈(色譜純)(Merck公司)；哇哈哈純凈水；其他試劑均為分析純。

馬錢(qián)子：由江西樟樹(shù)天齊堂中藥飲片廠(chǎng)提供(產(chǎn)地：越南)。

赤芍：由江西樟樹(shù)天齊堂中藥飲片廠(chǎng)提供(產(chǎn)地：內(nèi)蒙古)。

所用藥材均由江西中醫(yī)學(xué)院鄧可眾教授鑒定為真品。

1.3 試液的配制

人工胃液：取稀鹽酸16.4mL，加水約800mL與胃蛋白酶10g，搖勻后，加水稀釋成1 000mL，即得。人工腸液：即磷酸鹽緩沖液(含胰酶)(pH6.8)：取磷酸二氫鉀6.8g，加水500mL使溶解，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8；另取胰蛋白酶10g，加水適量使溶解，將2液混合后，加水稀釋至1 000mL，即得。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：大連依利特(Hypersil ODS25μm 4.6mm×250mm),流動(dòng)相：乙腈(A)∶水-乙酸-三乙胺(230∶2.4∶0.4)(B)=11∶89,檢測(cè)波長(zhǎng)：258nm,柱溫：30℃,流速：1.0mL/分,進(jìn)樣量：5μL。所得對(duì)照品譜圖，見(jiàn)圖1；空白對(duì)照譜圖，見(jiàn)圖2。

圖1 對(duì)照品圖

2.2 方法學(xué)考察

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

精密吸取混合對(duì)照品溶液1，3，5，8，10，15，20μL，按色譜條件，測(cè)定其峰面積。

以對(duì)照品進(jìn)樣量和峰面積進(jìn)行線(xiàn)性回歸，回歸方程分別為：士的寧的回歸方程為:Y=37441X-0.1199,r=1.0000；馬錢(qián)子堿的回歸方程為Y=35809X-1.2637，r=0.9998,結(jié)果表明線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.2.2 精密度試驗(yàn)

精密吸取上述對(duì)照品溶液20μL，注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。

計(jì)算RSD分別為:士的寧0.31%，馬錢(qián)子堿0.25%。結(jié)果顯示儀器的精密度良好。

2.2.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取生馬錢(qián)子按樣品制備方法制得供試品的溶液，對(duì)同一樣品測(cè)定6次，記錄峰面積。

結(jié)果士的寧RSD為0.88%;馬錢(qián)子堿RSD為1.23%。結(jié)果表明該實(shí)驗(yàn)方法重現(xiàn)性良好、穩(wěn)定可行。

2.2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品試液，分別于2、4、6、8、10、12小時(shí)進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積。

結(jié)果士的寧的RSD為1.26%和馬錢(qián)子堿的RSD為1.51%，結(jié)果表明供試品在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.5 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收法，取已知含量的生品6份各0.1g，精密稱(chēng)定，精密加入對(duì)照品適量，按供試品制備項(xiàng)下方法操作，測(cè)定樣品含量，計(jì)算回收率，見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)樣品峰面積結(jié)果

2.3 生馬錢(qián)子與赤芍配伍對(duì)士的寧和馬錢(qián)子堿的影響

2.3.1 生馬錢(qián)子配伍赤芍樣品溶液的制備

2.3.1.1 生馬錢(qián)子單煎液

生馬錢(qián)子粉碎成粗顆粒，稱(chēng)取10g置于圓底燒瓶中，加水10倍量，浸泡30分鐘，回流，煮沸后煎煮2小時(shí)，趁熱過(guò)濾，用適量水洗滌殘?jiān)?次，合并洗液和濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓濃縮至50mL，備用。精密量取生馬錢(qián)子單煎液10mL，用氨水調(diào)pH=9，用氯仿萃取4次，合并萃取液，用氯仿液定容至100mL，精密移取10mL至表面皿中，揮干氯仿，加甲醇溶解，用微孔濾膜(0.22μm)濾過(guò)，并轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中定容，取續(xù)濾液用于含量測(cè)定。

2.3.1.2 生馬錢(qián)子∶赤芍=2∶1配伍水煎液

稱(chēng)取生馬錢(qián)子粗顆粒10g，置于圓底燒瓶中，加水10倍量，浸泡30分鐘，回流，煮沸后煎煮1小時(shí)，加入已用10倍量水浸泡30分鐘的赤芍粗顆粒5g，共同煎煮1小時(shí)，趁熱過(guò)濾，用適量水洗滌殘?jiān)?次，合并洗液和濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓濃縮至50mL，備用。精密量取生馬錢(qián)子赤芍2∶1配伍水煎液10mL，用氨水調(diào)pH=9，用氯仿萃取4次，合并萃取液，用氯仿液定容至100mL，精密移取10mL至表面皿中，揮干氯仿，加甲醇溶解，用微孔濾膜(0.22μm)濾過(guò)，并轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中定容，取續(xù)濾液用于含量測(cè)定。

2.3.1.3 生馬錢(qián)子∶赤芍=1∶1與2∶3配伍水煎液，按2.3.1.2方法進(jìn)行制備。

2.3.2 含量測(cè)定方法與結(jié)果

2.3.2.1 生馬錢(qián)子配伍赤芍中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量測(cè)定方法

分別取上述各樣品，按“色譜條件”下的條件進(jìn)行測(cè)定，每次進(jìn)樣5μL。

2.3.2.2 生馬錢(qián)子配伍赤芍中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量測(cè)定結(jié)果

與生馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到49.8%-79.0%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到63.4%-81.2%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1。各配伍組中，士的寧的含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3?？傮w上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量；隨著赤芍劑量的增強(qiáng)，各單一成分的含量呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。以不同的赤芍劑量作為橫坐標(biāo)，配伍溶液中各單一成分的含量作為縱坐標(biāo)，分析二者的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，赤芍對(duì)各單一成分的含量變化呈非線(xiàn)性關(guān)系的規(guī)律。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 生馬錢(qián)子配伍赤芍后對(duì)士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.4 制馬錢(qián)子與赤芍配伍對(duì)士的寧和馬錢(qián)子堿的影響

2.4.1 制馬錢(qián)子配伍赤芍樣品溶液的制備

2.4.1.1 制馬錢(qián)子單煎液

制馬錢(qián)子粉碎成粗顆粒，稱(chēng)取10g置于圓底燒瓶中，加水10倍量，浸泡30分鐘，回流，煮沸后煎煮2小時(shí)，趁熱過(guò)濾，用適量水洗滌殘?jiān)?次，合并洗液和濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓濃縮至50mL，備用。精密量取制馬錢(qián)子單煎液10mL，用氨水調(diào)pH=9，用氯仿萃取4次，合并萃取液，用氯仿液定容至100mL，精密移取10mL至表面皿中，揮干氯仿，加甲醇溶解，用微孔濾膜(0.22μm)濾過(guò)，并轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中定容，取續(xù)濾液用于含量測(cè)定。

2.4.1.2 制馬錢(qián)子∶赤芍=2∶1配伍水煎液

稱(chēng)取制馬錢(qián)子粗顆粒10g，置于圓底燒瓶中，加水10倍量，浸泡30分鐘，回流，煮沸后煎煮1小時(shí)，加入已用10倍量水浸泡30分鐘的赤芍粗顆粒5g，共同煎煮1小時(shí)，趁熱過(guò)濾，用適量水洗滌殘?jiān)?次，合并洗液和濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓濃縮至50mL，備用。精密量取制馬錢(qián)子赤芍2∶1配伍水煎液10mL，用氨水調(diào)pH=9，用氯仿萃取4次，合并萃取液，用氯仿液定容至100mL，精密移取10mL至表面皿中，揮干氯仿，加甲醇溶解，用微孔濾膜(0.22μm)濾過(guò)，并轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中定容，取續(xù)濾液用于含量測(cè)定。

2.4.1.3 制馬錢(qián)子∶赤芍=1∶1與2∶3配伍水煎液按2.4.1.2進(jìn)行制備。

2.4.2 制馬錢(qián)子配伍赤芍中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量測(cè)定方法與結(jié)果

2.4.2.1 制馬錢(qián)子配伍赤芍中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量測(cè)定方法

分別取上述各樣品，按“色譜條件”下的條件進(jìn)行測(cè)定，每次進(jìn)樣5μL。

2.4.2.2 制馬錢(qián)子配伍赤芍中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量測(cè)定結(jié)果

與制馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到33.2%-72.2%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到39.5%-70.1%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1。各配伍組中，士的寧的含量大小為制馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量大小為制馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3?？傮w上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量；隨著赤芍劑量的增強(qiáng)，各單一成分的含量呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。以不同的赤芍劑量作為橫坐標(biāo)，配伍溶液中各單一成分的含量作為縱坐標(biāo)，分析二者的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，赤芍對(duì)各單一成分的含量變化呈非線(xiàn)性關(guān)系的規(guī)律。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 制馬錢(qián)子配伍赤芍后對(duì)士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.5 人工胃液對(duì)生馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.5.1 人工胃液環(huán)境中生馬錢(qián)子配伍赤芍樣品溶液的制備

生馬錢(qián)子單煎液：將人工胃液在37℃預(yù)溫孵育培養(yǎng)30分鐘后，加入適量按2.3.1.1項(xiàng)下制備的生馬錢(qián)子單煎液，然后再在37℃孵育培養(yǎng)2小時(shí)后，取樣品溶液適量用于含量測(cè)定。

生馬錢(qián)子∶赤芍=2∶1配伍水煎液、生馬錢(qián)子∶赤芍=1∶1配伍水煎液、生馬錢(qián)子∶赤芍=2∶3配伍水煎液：方法同上。

2.5.2 人工胃液環(huán)境中生馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的測(cè)定方法

取2.5.1項(xiàng)下各樣品溶液適量，處理方法及含量測(cè)定方法同前。

2.5.3 人工胃液環(huán)境中生馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的測(cè)定結(jié)果

在人工胃液環(huán)境中，與生馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到42.7%-76.4%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到28.3%-72.6%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1。各配伍組中，士的寧的含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3?？傮w上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量；隨著赤芍劑量的增強(qiáng)，各單一成分的含量呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。以不同的赤芍劑量作為橫坐標(biāo)，配伍溶液中各單一成分的含量作為縱坐標(biāo)，分析二者的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，赤芍對(duì)各單一成分的含量變化呈非線(xiàn)性關(guān)系的規(guī)律。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 人工胃液對(duì)生馬錢(qián)子配伍赤芍后士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.6 人工胃液對(duì)制馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.6.1 人工胃液環(huán)境中制馬錢(qián)子配伍赤芍樣品溶液的制備

制馬錢(qián)子單煎液：將人工胃液在37℃預(yù)溫孵育培養(yǎng)30分鐘后，加入適量按2.4.1.1項(xiàng)下制備的制馬錢(qián)子單煎液，然后再在37℃孵育培養(yǎng)2小時(shí)后，取樣品溶液適量用于含量測(cè)定。

制馬錢(qián)子∶赤芍=2∶1配伍水煎液，制馬錢(qián)子∶赤芍=1∶1配伍水煎液，制馬錢(qián)子∶赤芍=2∶3配伍水煎液，測(cè)定方法同上。

2.6.2 人工胃液環(huán)境中制馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的測(cè)定方法

取2.6.1項(xiàng)下各樣品溶液適量，處理方法及含量測(cè)定方法同前。

2.6.3 人工胃液環(huán)境中制馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的測(cè)定結(jié)果

在人工胃液環(huán)境中，與制馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到46.8%-77.3%，降幅2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到42.8%-75.6%，降幅2∶1gt;1∶1gt;2∶3。各配伍組中，士的寧的含量大小為制馬錢(qián)子赤芍2∶3gt;1∶1gt;2∶1；馬錢(qián)子堿含量大小為制馬錢(qián)子赤芍2∶3gt;1∶1gt;2∶1?？傮w上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量；但是隨著赤芍劑量的增強(qiáng)，各單一成分的含量呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。以不同的赤芍劑量作為橫坐標(biāo)，配伍溶液中各單一成分的含量作為縱坐標(biāo)，分析二者的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，赤芍對(duì)各單一成分的含量變化呈非線(xiàn)性關(guān)系的規(guī)律。結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 人工胃液對(duì)制馬錢(qián)子配伍赤芍后士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.7 人工腸液對(duì)生馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.7.1 人工腸液環(huán)境中生馬錢(qián)子配伍赤芍樣品溶液的制備

生馬錢(qián)子單煎液：將人工腸液在37℃預(yù)溫孵育培養(yǎng)30分鐘后，加入適量制備的生馬錢(qián)子單煎液，然后再在37℃孵育培養(yǎng)2小時(shí)后，取樣品溶液適量用于含量測(cè)定。

生馬錢(qián)子∶赤芍=2∶1配伍水煎液，生馬錢(qián)子∶赤芍=1∶1配伍水煎液，生馬錢(qián)子∶赤芍=2∶3配伍水煎液：測(cè)定方法同上。

2.7.2 人工腸液環(huán)境中生馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的測(cè)定方法

取2.7.1項(xiàng)下各樣品溶液適量，處理方法及含量測(cè)定方法同前。

2.7.3 人工腸液環(huán)境中生馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的測(cè)定結(jié)果

在人工腸液環(huán)境中，與生馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到44.0%-75.5%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到40.9%-72.7%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1。各配伍組中，士的寧的含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3。總體上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量；隨著赤芍劑量的增加，各單一成分的含量呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。以不同的赤芍劑量作為橫坐標(biāo)，配伍溶液中各單一成分的含量作為縱坐標(biāo)，分析二者的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，赤芍對(duì)各單一成分的含量變化呈非線(xiàn)性關(guān)系的規(guī)律。結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 人工腸液對(duì)生馬錢(qián)子配伍赤芍后士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.8 人工腸液對(duì)制馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

2.8.1 人工腸液環(huán)境中制馬錢(qián)子配伍赤芍樣品溶液的制備

制馬錢(qián)子單煎液：將人工腸液在37℃預(yù)溫孵育培養(yǎng)30分鐘后，加入適量制備的制馬錢(qián)子單煎液，然后再在37℃孵育培養(yǎng)2小時(shí)后，取樣品溶液適量用于含量測(cè)定。

制馬錢(qián)子∶赤芍=2∶1配伍水煎液、制馬錢(qián)子∶赤芍=1∶1配伍水煎液、制馬錢(qián)子∶赤芍=2∶3配伍水煎液：方法同上。

2.8.2 人工腸液環(huán)境中制馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的測(cè)定方法

取2.8.1項(xiàng)下各樣品溶液適量，處理方法及含量測(cè)定方法同前。

2.8.3 人工腸液環(huán)境中制馬錢(qián)子配伍赤芍中的士的寧和馬錢(qián)子堿含量的測(cè)定結(jié)果

在人工腸液環(huán)境中，與制馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到30.4%-72.0%，降幅2∶1gt;2∶3gt;1∶1；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到35.0%-70.0%，降幅2∶1gt;2∶3gt;1∶1。各配伍組中，士的寧的含量大小為制馬錢(qián)子赤芍1∶1gt;2∶3gt;2∶1；馬錢(qián)子堿含量大小為制馬錢(qián)子赤芍1∶1gt;2∶3gt;2∶1。總體上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量。以不同的赤芍劑量作為橫坐標(biāo)，配伍溶液中各單一成分的含量作為縱坐標(biāo)，分析二者的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，赤芍對(duì)各單一成分的含量變化呈非線(xiàn)性關(guān)系的規(guī)律。結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 人工腸液對(duì)制馬錢(qián)子配伍赤芍后士的寧和馬錢(qián)子堿含量的影響

3 討論

3.1 生、制馬錢(qián)子與赤芍配伍對(duì)士的寧和馬錢(qián)子堿的影響

與生馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到49.8%-79.0%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1，士的寧的含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到63.4%-81.2%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1，馬錢(qián)子堿含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3。

與制馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到33.2%-72.2%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1，士的寧的含量大小為制馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到39.5%-70.1%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1，馬錢(qián)子堿含量大小為制馬錢(qián)子2∶1gt;1∶1gt;2∶3。

總體上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量；隨著赤芍劑量的增強(qiáng)，各單一成分的含量呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。

3.2 在人工胃液環(huán)和人工腸液境中，生、制馬錢(qián)子分別與赤芍配伍對(duì)士的寧和馬錢(qián)子堿的影響

在人工胃液環(huán)境中，與生馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到42.7%-76.4%，降低2∶3gt;1∶1gt;2∶1，士的寧的含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到28.3%-72.6%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1，馬錢(qián)子堿含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3。

總體上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量；隨著赤芍劑量的增強(qiáng)，各單一成分的含量呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。

在人工胃液環(huán)境中，與制馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到46.8%-77.3%，降幅2∶1gt;1∶1gt;2∶3，士的寧的含量大小為制馬錢(qián)子赤芍2∶3gt;1∶1gt;2∶1；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到42.8%-75.6%，降幅2∶1gt;1∶1gt;2∶3，馬錢(qián)子堿含量大小為制馬錢(qián)子赤芍2∶3gt;1∶1gt;2∶1。

總體上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量；但是隨著赤芍劑量的增強(qiáng)，各單一成分的含量呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。在人工腸液環(huán)境中，與生馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到44.0%-75.5%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1，士的寧的含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到40.9%-72.7%，降幅2∶3gt;1∶1gt;2∶1，馬錢(qián)子堿含量大小為生馬錢(qián)子赤芍2∶1gt;1∶1gt;2∶3。

在人工腸液環(huán)境中，與制馬錢(qián)子單煎液相比較，配伍赤芍后能明顯降低各配伍樣品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量；士的寧含量降幅達(dá)到30.4%-72.0%，降幅2∶1gt;2∶3gt;1∶1，士的寧的含量大小為制馬錢(qián)子赤芍1∶1gt;2∶3gt;2∶1；馬錢(qián)子堿含量降幅達(dá)到35.0%-70.0%，降幅2∶1gt;2∶3gt;1∶1，馬錢(qián)子堿含量大小為制馬錢(qián)子赤芍1∶1gt;2∶3gt;2∶1。

總體上說(shuō)，配伍赤芍能降低各配伍樣品溶液中各單一成分的含量。

以上均以不同的赤芍劑量作為橫坐標(biāo)，配伍溶液中各單一成分的含量作為縱坐標(biāo)，可發(fā)現(xiàn)赤芍對(duì)各單一成分的含量變化呈非線(xiàn)性關(guān)系的規(guī)律。

由以上數(shù)據(jù)可知馬錢(qián)子配伍赤芍后其主要生物堿士的寧和馬錢(qián)子堿的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均有不同程度的降低，其中士的寧下降顯著。證實(shí)馬錢(qián)子與赤芍配伍后，可降低馬錢(qián)子毒性成分的作用，起到降低毒性和解毒作用。為傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中赤芍解馬錢(qián)子中毒提供依據(jù)，也為進(jìn)一步闡明馬錢(qián)子合理配伍用藥提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但對(duì)于解毒機(jī)制和配伍后引起的物質(zhì)基礎(chǔ)的變化，需進(jìn)一步的研究。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].一部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:139.

[2]江蘇新醫(yī)學(xué)院．中藥大辭典[M]．上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1 986：1 094．

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2013-01-07)