丁香殼聚糖復(fù)合劑對(duì)櫻桃番茄苗期生理的影響

李長(zhǎng)彬，沈天嬌

（1.唐山市開(kāi)灤第二中學(xué)，河北 唐山 063000；2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué) 預(yù)防醫(yī)學(xué)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150081）

櫻桃番茄（Lycopersicom esculentum var.cerasi-forme），別名小番茄，是茄科番茄屬栽培番茄的一個(gè)變種，以成熟多汁漿果為產(chǎn)品的一年生草本植物[1]。櫻桃番茄富含維生素、礦物質(zhì)等，其具有多種的果形、誘人的色澤、高糖度、低脂肪等特點(diǎn)，而且還具有預(yù)防癌癥、降血壓、降膽固醇等作用，因此深受消費(fèi)者的喜愛(ài)。

本文用天然的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)殼聚糖（Chitosan）與中藥丁香提取液（clove extract）復(fù)配，葉面噴施處理櫻桃番茄進(jìn)行試驗(yàn)，研究其對(duì)櫻桃番茄苗期生理生化指標(biāo)的影響，為殼聚糖與丁香復(fù)合劑作為一種新型植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)在蔬菜領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用做一些有意義的探索，以期為生產(chǎn)營(yíng)養(yǎng)更豐富、更安全的綠色無(wú)公害蔬菜提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

櫻桃番茄（臺(tái)灣圣女櫻桃番茄種子）購(gòu)于唐山荷花坑市場(chǎng)；殼聚糖：脫乙酰度（DD）為75%，分子量為5×104D，購(gòu)于浙江澳興生物科技有限公司；丁香購(gòu)于唐山市寶和堂藥房。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 丁香提取液的制備

稱取經(jīng)粉碎（過(guò)100目篩）的丁香50 g于燒杯中，加入95%乙醇250 mL，在室溫（22±2 ℃）下浸泡48 h，3層紗布過(guò)濾。將濾液在4 500 r/min下離心10 min，取上清液，在40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，再用80%乙醇定容至50 mL，即得丁香原液。將母液用0.05%的冰醋酸稀釋成濃度為15 mg·mL-1（A1），20 mg·mL-1（A2），25 mg·mL-1（A3）的丁香溶液，用40%NaOH溶液調(diào)pH為6.5，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2.2 殼聚糖溶液的配制

準(zhǔn)確稱取 250 mg分子量為 5×104D的殼聚糖，用0.05%的冰醋酸攪拌溶解，用40%NaOH溶液調(diào)pH為6.5，并定容至500 mL，配成500 mg·L-1的母液待用。將母液稀釋成濃度為 1.0 mg·mL-1（B1）、1.5 mg·mL-1（B2）、2.0 mg·mL-1（B3）的殼聚糖溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2.3 丁香殼聚糖復(fù)合劑的配制

各取等量的殼聚糖溶液和丁香溶液按照表1進(jìn)行復(fù)合劑的配制。

1.2.4 櫻桃番茄幼苗的培養(yǎng)及葉面噴施處理

取大小基本一致的飽滿的櫻桃番茄種子，用溫水浸泡12 h，第2 d轉(zhuǎn)移至鋪著濕潤(rùn)試紙的培養(yǎng)皿中，放置于25 ℃培養(yǎng)箱 5 d，待種子出芽后選取長(zhǎng)勢(shì)基本相同的櫻桃番茄幼苗種到裝有草炭的塑料箱中，在溫室中栽培。平均分成16組，每組100株。待長(zhǎng)到3葉1心時(shí)（約35 d時(shí)），開(kāi)始對(duì) A1～A3，B1～B3，T1～T9組分別用對(duì)應(yīng)的試劑葉面噴施作為實(shí)驗(yàn)組，以pH=6.5的0.05%醋酸水溶液葉面噴施作為對(duì)照組（CK），每個(gè)處理三次重復(fù)。每3 d噴施一次，共噴施4次。每次上午9:30用噴霧式小噴壺噴施葉片正反兩面，噴液量以液體剛要滴下為準(zhǔn)。適時(shí)適量澆水，待長(zhǎng)到4片真葉時(shí)定期澆灌營(yíng)養(yǎng)液。櫻桃番茄長(zhǎng)到第55 d時(shí)采樣測(cè)定。

表1 丁香殼聚糖復(fù)合劑的配制表

1.2.5 指標(biāo)測(cè)定

葉綠素含量的測(cè)定采用乙醇提取法[2]；可溶性糖含量的測(cè)定采用蒽酮比色法；可溶性蛋白含量的測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法；過(guò)氧化氫酶（CAT）活性的測(cè)定采用紫外吸收法；過(guò)氧化物酶（POD）活性的測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚比色法；脯氨酸含量的測(cè)定采用茚三酮比色法。

表2 處理方式對(duì)櫻桃番茄葉片的影響

2 結(jié)果與分析

單獨(dú)用丁香處理（A1，A2，A3）、單獨(dú)用殼聚糖處理（B1，B2，B3）與用丁香—?dú)ぞ厶菑?fù)合劑處理（T1～T9）對(duì)櫻桃番茄苗期各指標(biāo)的影響如表2所示。

2.1 處理方式對(duì)櫻桃番茄苗期葉片葉綠素含量影響

由表2可見(jiàn)，單獨(dú)用丁香處理（A1，A2，A3）、單獨(dú)用殼聚糖處理（B1，B2，B3）與用丁香殼聚糖復(fù)合劑處理（T1～T9）的葉綠素含量均高于對(duì)照組，其中T4組葉綠素含量最高，達(dá)到1.235 7 mg·g-1。

2.2 處理方式對(duì)櫻桃番茄苗期葉片可溶性糖含量影響

由表2可見(jiàn)，除A3組可溶性糖含量最低，為5.66 mg·g-1外，單獨(dú)用丁香處理（A1，A2）、單獨(dú)用殼聚糖處理（B1，B2，B3）與用丁香殼聚糖復(fù)合劑處理（T1～T9）的可溶性糖含量均高于對(duì)照組，其中 T5組可溶性糖含量最高，達(dá)到 25.79 mg·g-1。

2.3 處理方式對(duì)櫻桃番茄苗期葉片可溶性蛋白含量影響

由表2可見(jiàn)，單獨(dú)用丁香處理（A1，A2，A3）、單獨(dú)用殼聚糖處理（B1，B2，B3）與用丁香殼聚糖復(fù)合劑處理（T1～T9）的可溶性蛋白含量均高于對(duì)照組，其中T5組可溶性蛋白含量最高，達(dá)到50.33 mg·g-1。

2.4 處理方式對(duì)櫻桃番茄苗期葉片CAT活性影響

由表2可見(jiàn)，單獨(dú)用丁香處理（A1，A2，A3）、單獨(dú)用殼聚糖處理（B1，B2，B3）與用丁香殼聚糖復(fù)合劑處理（T1～T9）的過(guò)氧化氫酶活性均高于對(duì)照組，但部分復(fù)合劑處理相對(duì)增長(zhǎng)率低于殼聚糖或者丁香單獨(dú)處理的相對(duì)增長(zhǎng)率。其中T4組與T5組的過(guò)氧化氫酶活性較高，分別達(dá)到 38.34 U·g-1·min-1、51.69 U·g-1·min-1。

2.5 處理方式對(duì)櫻桃番茄苗期葉片POD活性影響

由表2可見(jiàn)，單獨(dú)用丁香處理（A1，A2，A3）、單獨(dú)用殼聚糖處理（B1，B2，B3）與用丁香殼聚糖復(fù)合劑處理（T1～T9）的過(guò)氧化物酶活性均高于對(duì)照組，部分復(fù)合劑處理相對(duì)增長(zhǎng)率低于殼聚糖或者丁香單獨(dú)處理的相對(duì)增長(zhǎng)率。其中 T4組與 T5組的過(guò)氧化物酶活性較高，分別為68.41 U·g-1·min-1、105.11 U·g-1·min-1。

2.6 處理方式對(duì)櫻桃番茄苗期葉片脯氨酸含量影響

由表2可見(jiàn)，單獨(dú)用丁香處理（A1，A2，A3）、單獨(dú)用殼聚糖處理（B1，B2，B3）與用丁香殼聚糖復(fù)合劑處理（T1～T9）的均高于對(duì)照組，其中T6組脯氨酸含量最高，達(dá)到 69.35 mg·g-1。

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié)論

丁香單、殼聚糖單獨(dú)處理與丁香殼聚糖復(fù)合劑處理均能一定程度上影響櫻桃番茄苗期的生理生化指標(biāo)。綜合來(lái)看，單獨(dú)用殼聚糖處理效果要比單獨(dú)用丁香處理效果要好，但二者復(fù)配使用效果最好，與對(duì)照組相比，能顯著提高櫻桃番茄苗期葉片的葉綠素含量，可溶性糖含量，可溶性蛋白含量，過(guò)氧化氫酶活性，過(guò)氧化物酶活性以及脯氨酸含量。

在丁香殼聚糖復(fù)合劑處理組（T1～T9）中，T4組可顯著提高櫻桃番茄苗期葉片的葉綠素含量；T5組可顯著提高櫻桃番茄苗期葉片的可溶性糖含量，可溶性蛋白含量，過(guò)氧化氫酶活性以及過(guò)氧化物酶活性；T6組可顯著提高櫻桃番茄苗期葉片的脯氨酸含量。

綜上，可以確定殼聚糖1.5 mg·mL-1，丁香20 mg·mL-1復(fù)配為最佳濃度配比。

3.2 討論

植物苗期的管理直接影響到其存活率，質(zhì)量和產(chǎn)量。改善作物苗期的生理生化指標(biāo)是推動(dòng)農(nóng)業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要方面。劉曉宇等[3]發(fā)現(xiàn)，殼聚糖混劑對(duì)于番茄幼苗的生長(zhǎng)發(fā)育具有一定的促進(jìn)作用，可提高葉綠素含量，張娟等[4]采用 5種不同中藥-殼聚糖復(fù)合生物種衣劑對(duì)其進(jìn)行包衣試驗(yàn)，結(jié)果表明，可提高幼苗葉綠素含量及各種保護(hù)酶活性，楊峰等[5]試驗(yàn)表明 100 mg·L-1殼聚糖預(yù)處理能增加蘋(píng)果幼苗游離脯氨酸含量。本文研究結(jié)果與其一致。

目前對(duì)丁香的研究多集中在抑菌作用方面，如王樹(shù)彤等[6]試驗(yàn)表明中藥丁香的甲醇提取物對(duì)番茄灰霉病菌具有抑菌作用和對(duì)番茄灰霉病具有溫室防治作用。丁香與殼聚糖復(fù)配對(duì)植物生理生化指標(biāo)研究報(bào)道甚少，僅見(jiàn)李鳳梅等[7]用丁香提取液與殼聚糖進(jìn)行復(fù)配，探討了不同配比的復(fù)合保鮮液對(duì)草莓保鮮效果的影響。

[1] 李式軍.珍稀名優(yōu)蔬菜80種[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1995:245

[2] 郝再斌,蒼晶,徐仲,等.植物生理實(shí)驗(yàn)[M].哈爾濱:哈爾濱工業(yè)大學(xué)出版社,2004:103

[3] 劉曉宇,明霞,楊威,等.殼聚糖混劑對(duì)番茄幼苗生理特性的影響[J].河南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2008,36(6):117-119.

[4] 張娟,徐寧彤,曲琪環(huán),等.中藥-殼聚糖復(fù)合種衣劑對(duì)大豆苗期生理的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2009,40(3):40-43.

[5] 楊峰,胡景江,武杭菊.外源殼聚糖對(duì)蘋(píng)果幼苗生長(zhǎng)及抗旱性的影響[J].西北林學(xué)院學(xué)報(bào),2007,22(3):60-63.

[6] 王樹(shù)彤,曹克強(qiáng),張鳳巧,等.中藥丁香提取物對(duì)番茄灰霉病菌抑制作用及生防效果[J].植物病理學(xué)報(bào),2005,35(6):91-94.

[7] 李鳳梅,周慶新,李文香,等.丁香提取液與殼聚糖復(fù)合對(duì)草莓保鮮效果的影響[J].青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2008,25(4):298-300.