藤菔降壓片抗高血壓的實(shí)驗(yàn)效應(yīng)

李運(yùn)倫，朱 梅，程德斌，蔣海強(qiáng)

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院/國(guó)家高血壓中醫(yī)臨床研究基地，山東濟(jì)南 250011;2.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南 250355)

目前具有明確藥理學(xué)效應(yīng)和循證醫(yī)學(xué)證據(jù)的抗高血壓藥物以跨國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)的化學(xué)藥物為主，絕大多數(shù)不具備我國(guó)的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，抗高血壓中藥新藥研發(fā)相對(duì)落后，目前抗高血壓中藥如牛黃降壓丸、珍菊降壓片、復(fù)方鉤藤片和清眩降壓片等的市場(chǎng)占有率較低，而且在療效、工藝、口感和單服劑量等方面也存在明顯不足，因此開發(fā)抗高血壓中藥新藥依然是當(dāng)前面臨的關(guān)鍵課題。中藥有效組分制劑藤菔降壓片是以國(guó)家高血壓中醫(yī)臨床研究基地鉤藤萊菔子驗(yàn)方和醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)制劑藤菔降壓片(魯藥制字Z20110021)為依據(jù)，遵循中藥組分配伍的研究思路，獲取該復(fù)方抗高血壓的主要有效組分并應(yīng)用藥理模型研究其配伍比例而研制的中藥新藥。本研究選擇左旋硝基精氨酸(L-nitro-ariginine，LNNA)誘導(dǎo)的高血壓大鼠模型為研究對(duì)象，以藤菔降壓片為干預(yù)手段，觀察該制劑的抗高血壓效應(yīng)以及對(duì)血清內(nèi)皮素(Endothelin，ET-1)、一氧化氮(Nitric oxide，NO)、腎素(Renin)、血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)和醛固酮(aldosterone，ALD)水平的影響，從而探索其可能的作用機(jī)制，以期為臨床試驗(yàn)提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)雄性Wistar大鼠68只，體質(zhì)量165～212 g，購自山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，合格證書:SCXL(魯)20080002。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物

1.2.1 藤菔降壓片 藤菔降壓片由山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院周洪雷教授提供，規(guī)格為360 mg/片，每片含鉤藤總生物堿18 mg和萊菔子水溶性生物堿21.6 mg。使用前生理鹽水溶解，分別按照3∶2∶1的比例配制質(zhì)量濃度為75、50、25 mg/mL混懸液，置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 纈沙坦 北京諾華制藥有限公司產(chǎn)品，批號(hào)x1041;0.9%氯化鈉溶液:山東威高藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)2110813021。使用前生理鹽水溶解含纈沙坦1.44 mg/mL的混懸液，置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 左旋硝基精氨酸(L-NNA)Sigma-Aldrich產(chǎn)品，生理鹽水溶解，質(zhì)量濃度3.05 mg/mL，過濾，除菌，置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑 內(nèi)皮素(ET-1)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒、一氧化氮(NO)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒、腎素酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒、醛固酮(ALD)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，以上產(chǎn)品均為美國(guó)R＆DSVSTEMS公司產(chǎn)品。

1.4 實(shí)驗(yàn)儀器 ALC—NIBP型清醒大鼠血壓心率測(cè)定儀，上海奧爾科特生物科技有限公司產(chǎn)品;ALC—HTP動(dòng)物恒溫系統(tǒng)(上海奧爾科特生物科技有限公司);ALC—NIBP無創(chuàng)血壓測(cè)量分析系統(tǒng)(上海奧爾科特生物科技有限公司);ELX808型酶標(biāo)儀(美 國(guó) BIO—TEKISTRUMENTS公 司);ME235P電子分析天平(德國(guó)賽多利斯公司);DT5—3型低速自動(dòng)平衡離心機(jī)(北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 左旋硝基精氨酸(L-NNA)誘導(dǎo)的高血壓大鼠 根據(jù)文獻(xiàn)記載［1-2］的方法，采用左旋硝基精氨酸7.625 mg/(kg·d)腹腔注射的方法制備高血壓大鼠模型，連續(xù)用藥14 d后，大鼠尾動(dòng)脈血壓明顯升高。正常組大鼠給予等量的生理鹽水腹腔注射。

2.2 分組方法 將L-NNA誘發(fā)的高血壓大鼠均按照體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，即模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組、藤菔降壓片高劑量組、藤菔降壓片中劑量組、藤菔降壓片低劑量組，并選擇同批次大鼠腹腔注射等量生理鹽水作為正常對(duì)照組。

2.3 給藥方法 陽性對(duì)照組給予纈沙坦混懸液2.88 mg/(200 g·d)，藤菔降壓片高劑量組給予150 mg/(200 g·d)，藤菔降壓片中劑量組給予100 mg/(200 g·d)，藤菔降壓片低劑量組給予50 mg/(200 g·d)，正常對(duì)照組和模型組給予等量的生理鹽水，給藥途徑為灌胃，每周給藥6 d，連續(xù)給藥4周。每周測(cè)量體質(zhì)量1次，并根據(jù)體質(zhì)量的變化調(diào)整給藥量。

2.4 檢測(cè)指標(biāo)

2.4.1 單次給藥后24 h各組大鼠清醒狀態(tài)尾動(dòng)脈血壓和心率的檢測(cè) 采用無創(chuàng)性尾動(dòng)脈脈搏間接測(cè)壓法。

2.4.2 連續(xù)給藥后4周各組大鼠清醒狀態(tài)尾動(dòng)脈血壓和心率的檢測(cè) 采用無創(chuàng)性尾動(dòng)脈脈搏間接測(cè)壓法。

2.4.3 連續(xù)給藥4周后各組大鼠血清內(nèi)皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)、腎素、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(ALD)水平的檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 單次給藥后24 h血壓和心率的比較

3.1.1 單次給藥后24 h收縮壓變化的比較 與治療前比較，給予藤菔降壓片高劑量、中劑量和低劑量后2 h即有降壓效應(yīng)，至6 h達(dá)到峰值，與治療前相比均有顯著差異(P＜0.05)，3組降壓的最大幅值分別為(12.2±2.8)mmHg、(9.4±3.6)mmHg和(10.1±1.8)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)，至24 h后血壓逐漸恢復(fù)至給藥后2 h的水平(P＞0.05)。給予纈沙坦后收縮壓的變化趨勢(shì)與藤菔降壓片接近，介于高劑量組和低劑量組之間;高劑量組降壓效應(yīng)多優(yōu)于中劑量組和低劑量(P＜0.05)。見表1。

表1 單次給藥后24 h收縮壓變化(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)Tab.1 24 h systolic blood pressure changes after a single dose(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)

表1 單次給藥后24 h收縮壓變化(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)Tab.1 24 h systolic blood pressure changes after a single dose(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)

注:與給藥前比較，◇P＜0.05;與模型組比較，※P＜0.05;與纈沙坦組比較，▲P＜0.05;與高劑量組比較，●P＜0.05;與中劑量組比較，▲P＜0.05

24 h正常組 12 137.4±2.4※ 138.7±3.4※ 137.4±1.4※ 136.9±1.8※ 136.6±2.4※ 140.1±2.1組 別 動(dòng)物數(shù)/只 給藥前 給藥2 h 給藥4 h 給藥6 h 給藥8 h 給藥※模型組 12 184.2±1.6 183.2±2.6 183.5±1.8 183.4±2.0 183.3±1.4 181.5±2.4纈沙坦組 11 183.3±1.9 178.9±1.4◇※ 174.1±1.6◇※ 172.1±4.1◇※ 174.8±2.3◇※ 177.6±1.5◇※高劑量組 11 183.6±2.1 177.9±2.6◇※ 173.9±1.3◇※▲ 171.5±3.7◇※ 174.4±2.9◇※ 177.8±1.8◇※中劑量組 11 182.2±2.1 178.8±2.4◇※ 174.8±0.9◇※● 172.8±2.7◇※ 175.2±2.7◇※ 178.5±1.8◇※低劑量組 11 183.4±1.9 180.3±2.7◇※● 175.1±0.9◇※▲ 173.3±1.9◇※ 174.3±1.8◇※ 178.5±1.6◇※

3.1.2 單次給藥后24 h舒張壓變化的比較 與治療前比較，給予藤菔降壓片高劑量、中劑量和低劑量后4～8 h有明顯的降壓效應(yīng)(P＜0.05)，3組降壓的最大幅值分別為(6.2±3.4)mmHg、(7.6±6.6)mmHg和(8.1±7.9)mmHg。給予纈沙坦后舒張壓的變化趨勢(shì)與藤菔降壓片接近，介于大劑量組和小劑量組之間;各劑量組降低舒張壓的效應(yīng)無明顯差異(P＞0.05)。見表2。

表2 單次給藥后24 h舒張壓變化(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)Tab.2 24 h diastolic blood pressure changes after a single dose(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)

表2 單次給藥后24 h舒張壓變化(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)Tab.2 24 h diastolic blood pressure changes after a single dose(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)

注:與給藥前比較，◇P＜0.05;與模型組比較，※P＜0.05;與纈沙坦組比較，▲P＜0.05;與高劑量組比較，●P＜0.05;與中劑量組比較，▲P＜0.05

24 h正常組 12 104.0±4.5※ 105.2±3.8※ 104.1±2.8※ 100.9±4.3※ 100.6±3.7※ 103.1±5.1組 別 動(dòng)物/只 給藥前 給藥2 h 給藥4 h 給藥6 h 給藥8 h 給藥※模型組 12 137.2±4.8 136.6±4.9 133.6±7.9 136.1±3.3 134.8±4.0 138.4±4.9纈沙坦組 11 134.9±5.1 133.3±4.9※ 130.4±2.5◇ 129.6±4.1◇※ 131.9±4.0 134.4±5.2※高劑量組 11 135.6±3.6 134.2±5.4 129.4±3.7◇※ 129.3±3.9◇※ 129.3±4.2◇※ 133.7±3.9※中劑量組 11 136.5±3.8 135.8±3.9 128.9±7.1◇※ 131.6±5.2◇※ 129.7±6.4◇※ 135.9±2.3低劑量組 11 136.7±4.6 135.8±4.5 128.6±5.7◇※ 131.1±4.5◇※ 131.7±4.2◇ 134.9±4.9※

3.1.3 單次給藥后24 h心率的比較 與治療前比較，給予藤菔降壓片高劑量、中劑量和低劑量后心率呈降低的趨勢(shì)，多無顯著性改變(P＞0.05)。給予纈沙坦后心率變化趨勢(shì)與藤菔降壓片無顯著變化(P＞0.05);各劑量組之間，給藤菔降壓片后心率變化無明顯規(guī)律。見表3。

表3 單次給藥后24 h心率變化(，min)Tab.3 24 h heart rate changes after a single dose(，min)

表3 單次給藥后24 h心率變化(，min)Tab.3 24 h heart rate changes after a single dose(，min)

注:與給藥前比較，◇P＜0.05;與模型組比較，※P＜0.05;與纈沙坦組比較，▲P＜0.05;與高劑量組比較，●P＜0.05;與中劑量組比較，▲P＜0.05

24 h正常組 12 377.6±43.5 395.4±27.5 381.2±28.8 365.6±2組 別 動(dòng)物/只 給藥前 給藥2 h 給藥4 h 給藥6 h 給藥8 h 給藥374.9±32.9 369.3±26.94.4 357.5±41.1 381.2±22.5模型組 12 408.0±36.5 395.9±41.3 372.7±44.4 397.5±50.2 363.7±32.9 376.6±24.4纈沙坦組 11 388.3±25.5 405.2±60.3 386.2±25.5 374.6±21.1 383.1±30.8 373.7±48.4高劑量組 11 375.6±47.6 389.4±55.1 368.3±63.8 389.3±28.6 353.2±35.8▲ 351.1±82.9中劑量組 11 360.2±40.4 371.8±49.9▲ 371.8±54.0 357.0±31.8※● 381.9±44.7● 365.4±45.0低劑量組 11 366.3±35.4 391.7±38.5 383.2±24.9 372.4±37.0※

3.2 連續(xù)給藥4周各組血壓和心率的比較

3.2.1 連續(xù)給藥4周各組收縮壓的比較 與治療前比較，給予藤菔降壓片高劑量、中劑量和低劑量1周、2周、3周和4周后均有明顯降壓效應(yīng)(P＜0.05)，在給藥4周降壓幅度分別達(dá)(21.8±2.6)mmHg、(20.1±2.0)mmHg和(19.9±2.3)mm-Hg。給予纈沙坦后降壓效應(yīng)在給藥2周、3周、4周優(yōu)于低劑量組(P＜0.05)。各劑量組之間，中劑量組降壓的效應(yīng)優(yōu)于低劑量組(P＜0.05)，給藥4周高劑量組降壓效應(yīng)優(yōu)于低劑量組(P＜0.05)。見表4。

表4 連續(xù)給藥4周收縮壓的變化(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)Tab.4 Systolic blood pressure changes in 4 weeks consecutive administration(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)

表4 連續(xù)給藥4周收縮壓的變化(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)Tab.4 Systolic blood pressure changes in 4 weeks consecutive administration(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)

注:與給藥前比較，◇P＜0.05;與模型組比較，※P＜0.05;與纈沙坦組比較，▲P＜0.05;與大劑量組比較，●P＜0.05;與中劑量組比較，▲P＜0.05

組 別 動(dòng)物/只 給藥前 給藥1周 給藥2周 給藥3周 給藥4周正常組 12 137.4±2.4※ 137.4±1.9※ 136.8±1.4※ 137.7±1.2※ 138.3±2.3※模型組 12 184.2±1.6 181.1±1.3 184.3±1.0 183.1±2.0 182.2±2.1纈沙坦組 11 183.3±1.9 173.7±1.6◇※ 168.0±1.6◇※ 164.1±1.4◇※ 160.9±0.8◇※高劑量組 11 183.6±2.1 174.1±1.0◇※ 168.6±1.2◇※ 164.8±1.1◇※ 161.9±1.2◇※中劑量組 11 182.2±2.1 172.8±1.7◇※● 168.0±1.0◇※ 164.4±0.7◇※ 161.9±1.0◇※低劑量組 11 183.4±1.9 174.2±0.6◇※▲ 169.2±1.3◇※▲▲ 165.7±0.8◇※▲▲ 163.6±1.1◇※▲●▲

3.2.2 連續(xù)給藥4周各組舒張壓的比較 與治療前比較，給予藤菔降壓片后高劑量、中劑量和低劑量組均有明顯降低舒張壓效應(yīng)(P＜0.05)，在給藥4周降壓幅度分別達(dá)(14.9±5.3)mmHg、(14.5±6.1)mmHg和(15.3±6.1)mmHg。給予纈沙坦后舒張壓的變化趨勢(shì)與藤菔降壓片接近，降壓效應(yīng)無明顯差異。各劑量組之間，在給藥3周中劑量組的降壓效應(yīng)優(yōu)于低劑量組(P＜0.05)。見表5。

表5 連續(xù)給藥4周舒張壓變化(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)Tab.5 Diastolic blood pressure changes in 4 weeks consecutive administration(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)

表5 連續(xù)給藥4周舒張壓變化(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)Tab.5 Diastolic blood pressure changes in 4 weeks consecutive administration(，mmHg)(1 mmHg=0.133 kPa)

注:與給藥前比較，◇P＜0.05;與模型組比較，※P＜0.05;與纈沙坦組比較，▲P＜0.05;與高劑量組比較，●P＜0.05;與中劑量組比較，▲P＜0.05

組 別 動(dòng)物/只 給藥前 給藥1周 給藥2周 給藥3周 給藥4周正常組 12 103.9±4.5※ 104.3±3.2※ 102.3±3.1※ 101.5±2.5※ 102.8±2.3※模型組 12 137.2±4.8 134.1±3.0 137.5±2.1 137.3±3.0 134.1±4.2纈沙坦組 11 134.9±5.1 131.7±4.4 126.9±4.3◇※ 128.4±3.4◇※ 122.4±3.1◇※高劑量組 11 135.6±3.6 130.6±3.5◇※ 127.0±5.1◇※ 127.1±4.4◇※ 120.7±4.1◇※中劑量組 11 136.5±3.8 129.8±4.1◇※ 126.9±3.4◇※ 126.2±4.6◇※ 122.1±5.2◇※低劑量組 11 136.7±4.6 131.5±3.2◇※ 129.3±3.8◇※ 128.9±3.8◇※▲ 121.4±3.8◇※

3.2.3 連續(xù)給藥4周各組心率的比較 與治療前比較，給予藤菔降壓片大劑量、中劑量和小劑量后心率無明顯降低效應(yīng)(P＞0.05)。給予纈沙坦后心率的降低幅度與藤菔降壓片無明顯差異(P＞0.05)。各劑量組之間，降低心率效應(yīng)無明顯差異(P＞0.05)。結(jié)果見表6。

表6 連續(xù)給藥4周心率變化(，min)Tab.6 Heart rate changes in 4 weeks consecutive administration(，min)

表6 連續(xù)給藥4周心率變化(，min)Tab.6 Heart rate changes in 4 weeks consecutive administration(，min)

注:與給藥前比較，◇P＜0.05;與模型組比較，※P＜0.05;與纈沙坦組比較，▲P＜0.05;與高劑量組比較，●P＜0.05;與中劑量組比較，▲P＜0.05

組 別 動(dòng)物/只 給藥前 給藥1周 給藥2周 給藥3周 給藥4周正常組 12 377.6±43.6 339.9±42.2 343.5±62.8 351.8±89.7 385.6±32.96.4 373.8±45.6模型組 12 408.0±36.5 371.7±50.6 350.8±31.4 368.8±21.7 351.7±54.4纈沙坦組 11 388.3±25.5 355.4±30.2◇ 369.2±26.2◇ 333.2±71.6◇ 367.4±55.2高劑量組 11 375.6±47.6 373.1±33.4 366.4±30.2 350.5±60.0 357.9±45.1中劑量組 11 360.2±40.4 376.9±36.5 381.5±66.7 368.1±47.3 383.8±60.4低劑量組 11 366.3±35.4 367.3±61.8 377.4±70.4 363.6±3

3.4 連續(xù)給藥4周各組大鼠血清ET-1、NO、腎素、AngⅡ和ALD水平的比較 與正常組比較，模型組血清ET-1和ALD水平無明顯變化(P＞0.05)，模型組血清NO水平顯著降低(P＜0.05)，血清腎素和AngⅡ水平顯著升高(P＜0.05)，說明血循環(huán)ET-1和ALD不是形成該高血壓模型的病理機(jī)制，而血液NO、腎素和AngⅡ參與了該高血壓模型的病理進(jìn)程。與模型組相比，中劑量組血清NO水平顯著升高(P＜0.05)，仍低于纈沙坦組(P＜0.05)。與模型組相比，高、中、低劑量組血清腎素水平均顯著降低(P＜0.05)，而且劣于纈沙坦組(P＜0.05)。與模型組相比，高、中、低劑量組血清AngⅡ水平均顯著降低(P＜0.05)，而且高、中劑量組與纈沙坦組相當(dāng)(P＞0.05)，高劑量組效應(yīng)優(yōu)于低劑量組(P＜0.05)。結(jié)果見表7。

表7 連續(xù)給藥4周各組大鼠血清ET-1、NO、腎素、AngⅡ和ALD水平的比較()Tab.7 Comparison of serum ET-1，NO，renin，AngⅡ and ALD content in 4 weeks consecutive administration()

表7 連續(xù)給藥4周各組大鼠血清ET-1、NO、腎素、AngⅡ和ALD水平的比較()Tab.7 Comparison of serum ET-1，NO，renin，AngⅡ and ALD content in 4 weeks consecutive administration()

注:與給藥前比較，◇P＜0.05;與模型組比較，※P＜0.05;與纈沙坦組比較，▲P＜0.05;與高劑量組比較，●P＜0.05;與中劑量組比較，▲P＜0.05

組 別 動(dòng)物/只 ET-1/(ng·L－1) NO/(μmol·L－1) 腎素/(U·L－1) AngⅡ/(ng·L－1) ALD/(ng·dL－1)正常組 12 64.50±2.37 10.36±3.46※ 48.767 ±6.64※ 63.01±9.39※90.97±12.01模型組 12 65.69±1.15 6.42±1.84◇ 63.52 ±12.09◇ 95.43±15.95◇ 97.21±20.05纈沙坦組 11 64.35±1.68 10.37±2.55※ 61.92 ±5.47 63.20±11.02※ 89.22±13.67高劑量組 11 65.97±1.15 7.73 ±1.85▲ 49.06±10.89※▲ 65.99±10.86※ 93.52 ±13.46中劑量組 11 64.44±3.60 8.27 ±1.16※▲ 48.01±7.62※▲ 70.65±13.20※ 91.29 ±14.51低劑量組 11 66.29±0.63 6.55±1.64▲▲ 51.10±9.76※▲ 79.23±15.87※▲● 103.41±13.68◇▲

4 討論

本研究在復(fù)習(xí)古今文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)高血壓的臨床特點(diǎn)并總結(jié)臨床治療高血壓病的經(jīng)驗(yàn)，提出肝氣升發(fā)太過、無以制約、妄動(dòng)奔馳、亢陽上擾是高血壓病的重要病機(jī)，肝陽上亢證是高血壓病常見證候類型［3］，平肝潛陽是治療高血壓病的重要治法。中藥鉤藤萊菔子驗(yàn)方和醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)制劑藤菔降壓片(魯藥制字Z20110021)是治療高血壓病肝陽上亢證的有效復(fù)方制劑。方中鉤藤味甘、微苦，性微寒，入肝、心包經(jīng)，輕清氣涼，其性上行，功效平肝潛陽，《本草正義》載其“輕清而性甘寒”，《本草綱目》載其“大人頭旋目眩，平肝風(fēng)，除心熱”，故善治肝陽上亢之頭暈?zāi)垦?，為方中之君藥。萊菔子味辛、甘，性平，歸肺、脾、胃經(jīng)，炒熟能降，其性和平，其味又不峻，長(zhǎng)于降逆順氣。《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》稱“此乃化氣之品，非破氣之品……多服久服，轉(zhuǎn)不傷氣”，為方中佐藥。故鉤藤平肝潛陽，善伐肝之過;萊菔子降逆行氣，兼助肝之用，二藥相伍，一升一降，一峻一緩，相反相成，使亢陽得潛，清氣得升，共奏平肝潛陽之功?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，鉤藤和萊菔子均具有良好的抗高血壓實(shí)驗(yàn)效用，其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分別為鉤藤總生物堿和萊菔子水溶性生物堿［4-7］。以此為研究基礎(chǔ)，優(yōu)選適合藥物生產(chǎn)的鉤藤總生物堿和萊菔子水溶性生物堿的提取工藝，建立有效部位的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，并按照“正交設(shè)計(jì)-藥效測(cè)定-偏最小二乘回歸建?！钡某绦颍?-9］，以藥效學(xué)為導(dǎo)向，優(yōu)選出最佳配伍比例，篩選合適輔料，完成成型工藝、中試生產(chǎn)并按照《中國(guó)藥典》要求進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制研究，而且已經(jīng)證實(shí)鉤藤總生物堿和萊菔子水溶性生物堿配伍具有良好的抗高血壓效應(yīng)［10］。

左旋硝基精氨酸為一氧化氮合酶抑制劑，通過降低NO合成、誘導(dǎo)血管內(nèi)皮功能障礙，從而誘導(dǎo)高血壓的發(fā)生與發(fā)展［11］，甚至導(dǎo)致心肌肥大等靶器官損害。故本研究以腹腔注射左旋硝基精氨酸復(fù)制高血壓大鼠模型，以此為研究平臺(tái)探討了藤菔降壓片對(duì)L-NNA介導(dǎo)的高血壓大鼠模型的降壓效用，探索其中可能的作用機(jī)制。本研究結(jié)果顯示:無論是單次給予24 h內(nèi)還是連續(xù)給予4周，藤菔降壓片對(duì)左旋硝基精氨酸介導(dǎo)的高血壓大鼠模型均具有良好的降壓效應(yīng)，呈良好的時(shí)效和量效關(guān)系，而且對(duì)心率無明顯的影響。血管內(nèi)皮功能障礙在高血壓的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用［12-13］。ET-1是目前已知縮血管作用最強(qiáng)最持久的細(xì)胞因子，具有收縮血管、增加外周阻力的作用，而NO是以L-精氨酸為基質(zhì)經(jīng)過NO合成酶(NOS)的作用生成的內(nèi)源性弛緩因子，具有強(qiáng)力的舒張血管、降低外周阻力的作用［14-15］。血清ET-1和NO水平能夠反映血管內(nèi)皮功能，二者的平衡失調(diào)參與了高血壓的病理進(jìn)程。因此，降低ET-1、提高NO、調(diào)節(jié)二者的平衡是抗高血壓的有效途徑，而藤菔降壓片在此有效應(yīng)表達(dá)，能夠降低ET-1水平、提高NO水平、改善血管內(nèi)皮功能，此為其發(fā)揮降壓作用的重要機(jī)制之一。腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)在高血壓形成機(jī)制中發(fā)揮作用［16-17］，血管緊張素Ⅱ?yàn)镽AAS系統(tǒng)的主要效應(yīng)物質(zhì)，作用于AT1受體，使小動(dòng)脈收縮，外周血管阻力增加;刺激醛固酮和去甲腎上腺素分泌，使水鈉潴留，繼而引起血容量增加，以上作用均可使血壓升高，是參與高血壓發(fā)病并使之持續(xù)的重要機(jī)制。因此，降低血清腎素、血管緊張素Ⅱ及醛固酮的水平、抑制腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)活性是抗高血壓的有效途徑，而藤菔降壓片在此有效應(yīng)表達(dá)，能夠降低大鼠血漿腎素和血管緊張素Ⅱ水平，抑制RAAS系統(tǒng)的活性，此為其發(fā)揮降壓作用的重要機(jī)制之一。

綜上所述，藤菔降壓片具有良好的抗高血壓實(shí)驗(yàn)效用，其機(jī)制與升高NO水平以改善血管內(nèi)皮依賴性舒張功能、降低腎素和血管緊張素Ⅱ水平以抑制RAAS系統(tǒng)活性有關(guān)。至于藤菔降壓片更深層次的降壓機(jī)制尚有待探索。

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