楮實(shí)子中蒽醌類成分研究

牛鵬飛，汪 冶

(1.貴州師范大學(xué)化學(xué)與材料科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽(yáng)550001;2.貴州省中國(guó)科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州貴陽(yáng)550002)

楮實(shí)子為?？茦?gòu)樹(shù)屬(Broussonetia)構(gòu)樹(shù)(B.papyrifea(L.)Vent.)的干燥成熟果實(shí)，秋季果實(shí)成熟時(shí)采收，洗凈，曬干，除去灰白色膜狀宿萼及雜質(zhì)后的種子［1］。楮實(shí)子在中醫(yī)上的應(yīng)用主要有補(bǔ)腎清肝、明目、利尿等功效，多用于腰膝酸軟、虛勞骨蒸、頭暈?zāi)垦?、目生翳膜、水腫脹滿等病癥。據(jù)《藥性通考》記載:“楮實(shí)子，陰痿能強(qiáng)，水腫可退，充肌膚，助腰膝，益氣力，補(bǔ)虛勞，悅顏色，壯筋骨，明目?！保?］楮實(shí)子在全國(guó)大部分地區(qū)有分布，主產(chǎn)于河南、福建、安徽、四川、山東、湖南、山西、貴州等地。熊山等［3］從楮實(shí)子95%的醇提物中分離等到7個(gè)化合物，分別為胡蘿卜苷棕櫚酸酯、胡蘿卜苷、苯丙氨酸、色氨酸、壬二酸、β－谷甾醇及蔗糖。龐素秋等分離鑒定了異兩面針堿、白屈菜紅堿、薯蕷皂苷元、葡萄糖、蔗糖、β－谷甾醇和巖藻甾醇［4］和4個(gè)異喹啉類生物堿［5］。本文通過(guò)對(duì)楮實(shí)子70%的乙醇提取物進(jìn)行分離，發(fā)現(xiàn)3個(gè)蒽醌類化合物，均為首次分離，分別是:大黃素(1)、大黃素甲醚(2)、大黃素甲醚－8－O－β－D－吡喃葡萄糖苷(3)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥材 楮實(shí)子干藥材由貴州三農(nóng)楮桃紅產(chǎn)業(yè)有限公司提供，經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院陳德媛教授鑒定為桑科植物構(gòu)樹(shù)(B.papyrifea(L.)Vent.)的果實(shí)。

1.1.2 儀器與試劑 氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)惠普公司GC－MS5973型);國(guó)產(chǎn)XT－4熔點(diǎn)儀(北京泰克);INOVA－400MHz超導(dǎo)核磁共振儀(美國(guó)瓦里安公司)，四甲基硅烷(TMS)內(nèi)標(biāo);中壓液相儀(BUCHI公司);粗硅膠40－80目、柱色譜硅膠200－300目、薄層色譜硅膠H(60型)、薄層色譜硅膠GF254以及預(yù)制硅膠板GF254均為青島海洋化工有限公司生產(chǎn);反相薄層硅膠(RP－C18)為德國(guó)Merck公司生產(chǎn);葡聚糖凝膠Sephadex－20為Amersham Pharmacia Biotech公司生產(chǎn)。

1.2 方法

干燥的楮實(shí)子8 kg，粉碎成30～40目。首先用石油醚回流提取3次后過(guò)濾，石油醚回收，將提取后的藥材晾干后，用70%的乙醇回流提取3次，提取時(shí)間分別為4、3、3 h，合并濾液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味。將得到的粗提物用水混懸后，分別用乙酸乙酯、正丁醇萃取4次，減壓回收乙酸乙酯和正丁醇。共得到乙酸乙酯層浸膏40 g，正丁醇層浸膏26 g，分別使用現(xiàn)代分離方法進(jìn)行分離。

將乙酸乙酯層、正丁醇層浸膏經(jīng)過(guò)反復(fù)柱層析，乙酸乙酯層用石油醚∶乙酸乙酯(100∶0～0∶100)梯度洗脫得到6部分(Fr.1～Fr.6);正丁醇層用氯仿∶甲醇(100∶1～0∶100)梯度洗脫得到5部分(Fr.1～Fr.5)。各部分分別用葡聚糖凝膠Sephadex－20層析、正相硅膠層析、反相薄層硅膠層析以及半制備液相等方法分離純化。得到的化合物如圖1。

2 結(jié)果與分析

2.1 化合物1

橙色粉末狀固體。mp:225℃，分子式C15H10O5醋酸鎂反應(yīng)呈橙紅色，EI－MS m/z270［M+］，242，213，185，139，115，77，69，51.1H－NMR(CDCl3，400 MHz):7.48(1H，d，J=2.0 Hz，H－5)，7.10(1H，d，J=2.0 Hz，H－7)，7.06(1H，d，J=2.4Hz，H－4)，6.59(1H，d，J=2.0 Hz，H－2)，2.45(3H，s，3－CH3)，12.08(1H，s，1－OH)，11.39(1H，s，6－OH)，11.20(1H，s，8－OH).13C－NMR(CDCl3，100 MHz)δ:161.2(C－1)，124.5(C－2)，148.3(C－3)，120.3(C－4)，108.7(C－5)，165.7(C－6)，108.0(C－7)，162.0(C－8)，189.7(C－9)，181.4(C－10)，136.0(C－5a)，133.6(C－4a)，113.0(C－1a)，108.4(C－8a)，22.0(－CH3)。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)［6］報(bào)道的大黃素基本一致，故可鑒定化合物1為大黃素。

圖1 化合物1～3的結(jié)構(gòu)Fig.1 The Structures of compounds 1～3

2.2 化合物2

橙黃色針狀結(jié)晶(丙酮)。mp:207～208℃.分子式C16H12O5.Borntrager反應(yīng)顯紅色，ESI－MS:m/z:307［M+Na］+，1H－NMR(CDCl3，400 MHz)δ:12.12(1H，s，1－OH)，12.32(1H，s，8－OH)，7.62(1H，s，4－H)，7.34(1H，d，J=2.4Hz，5－H)，7.08(1H，s，2－H)，6.68(1H，d，J=2.4 Hz，7－H)，3.94(3H，s，－OCH3)，2.44(3H，s，6－CH3).13C－NMR(CDCl3，100 MHz)δ:166.1(C－6)，165.3(C－1)，148.4(C－3)，121.5(C－4)，108.2(C－5)，124.6(C－2)，106.6(C－7)，162.5(C－8)，190.2(C－9)，182.0(C－10)，135.4(C－5a)，110.5(C－8a)，113.6(C－1a)，133.2(C－4a)，22.2(－CH3)，56.1(－OCH3)。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)［7］報(bào)道的大黃素甲醚基本一致，故可鑒定化合物2為大黃素甲醚。

2.3 化合物3

橙黃色固體粉末。mp:234～237℃.分子式C22H22O10.Borntrager反應(yīng)呈陽(yáng)性，醋酸鎂反應(yīng)呈現(xiàn)紅色。ESI－MS:m/z 447［M+H］+，469［M+Na］+，1H－NMR(CDCl3，400 MHz)δ:7.54(1H，s，H－4)，7.40(1H，s，H－5)，7.10(1H，d，J=2.4Hz，H－2)，7.08(1H，d，J=2.4，H－7)，5.12(1H，d，J=7.2，H－1’)，3.35－3.76(1H×4，m，H－2’，H－3’，H－4’，H－5).3.85(3H，s，6－OCH3)，2.32(3H，s，－CH3).13C－NMR(DMSO－d6，100 MHz)δ:187.6(C－9)，181.3(C－10)，165.5(C－6)，162.3(C－8)，160.9(C－1)，147.3(C－3)，135.4(C－5a)，132.2(C－4a)，124.5(C－2)，120.3(C－4)，115.2(C－1a)，114.5(C－8a)，108.2(C－5)，106.2(C－7)，101.5(C－1’)，77.5(C－5’)，76.4(C－3’)，74.2(C－2’)，71.0(C－4’)，60.5(C－6’)，57.2(3－OCH3)，21.2(－CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報(bào)道的基本一致，故可鑒定化合物3為大黃素甲醚－8－O－β－D－吡喃葡萄糖苷。

3 結(jié)論

通過(guò)對(duì)楮實(shí)子醇提物的化學(xué)成分研究，從中分離得到3個(gè)蒽醌類化合物，采用經(jīng)理化分析和波譜解析技術(shù)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，最終確定為大黃素、大黃素甲醚、大黃素甲醚－8－O－β－D－吡喃葡萄糖苷，均為首次從該植物中分得。3個(gè)化合物均為橙黃，為楮實(shí)子中的色素來(lái)源之一。本研究結(jié)果為進(jìn)一步尋找楮實(shí)子的有效化學(xué)成分及其藥理的運(yùn)用有一定的意義。

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