趨化因子受體拮抗劑的研究進(jìn)展*

趙 剛，吳劍涓

(天津市環(huán)湖醫(yī)院，天津 300060)

趨化因子(chemokines，chemoattractantcytokines)是一類由免疫或非免疫細(xì)胞分泌的結(jié)構(gòu)相似的小分子蛋白，具有多種生物活性，能使細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動(dòng)(指細(xì)胞向高濃度刺激物方向的定向運(yùn)動(dòng))，其分子量為8～12 ku，到目前人類共發(fā)現(xiàn)44種趨化因子。趨化因子受體(chemokine receptor)是一類能與趨化因子相結(jié)合，表達(dá)于不同類型細(xì)胞上，具有七個(gè)跨膜區(qū)域結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，屬于G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)超家族，相對(duì)分子量約為40 ku，目前人類發(fā)現(xiàn)22個(gè)趨化因子受體。近年來(lái)，趨化因子及其受體的研究越來(lái)越受到重視，已經(jīng)證明在炎癥、腫瘤、自身免疫病、變態(tài)反應(yīng)和艾滋病(AIDS)等疾病中均有趨化因子及其受體的參與，利用趨化因子受體拮抗劑與天然配體封閉趨化因子受體，成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。特別是近年來(lái)，以同源或異源寡聚體和變構(gòu)體為靶點(diǎn)的藥物研究得到重視［1，2］。本文將對(duì)趨化因子受體拮抗劑的研究進(jìn)展進(jìn)行扼要綜述。

1 趨化因子和趨化因子受體

1.1 趨化因子及分類 趨化因子為70～120個(gè)氨基酸組成的分泌型蛋白質(zhì)，其結(jié)構(gòu)在氨基酸序列上具有4個(gè)保守的半胱氨酸(cysteine，C)，根據(jù)趨化因子一級(jí)結(jié)構(gòu)中靠近氨基酸(N端)的前2個(gè)C間是否插入其他氨基酸，可以將其分為四大類:①CXC趨化因子(α趨化因子，插入1個(gè)氨基酸殘基);②CC趨化因子(β趨化因子，未插入其他氨基酸殘基);③C趨化因子(γ－趨化因子，N端只有1個(gè)C);④CX3C趨化因子(δ－趨化因子，插入3個(gè)其他氨基酸殘基)。迄今發(fā)現(xiàn)的CC趨化因子為CCL1～28，CXC趨化因子為CXCL1～16，CX3C趨化因子目前只有CX3CL1一個(gè)成員，C趨化因子有XCL1和XCL2兩個(gè)成員［3］。

1.2 趨化因子受體及分類 趨化因子通過(guò)與相應(yīng)的受體結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。根據(jù)結(jié)合配體的不同，趨化因子受體可分為四類:①CXC趨化因子受體(CXCR);②CC趨化因子受體(CCR);③CX3C趨化因子受體(CX3CR);④XC趨化因子受體(XCR)。趨化因子與受體結(jié)合，具有不同的特異性。根據(jù)結(jié)合配體的特異性不同，趨化因子受體可分為三類:①特異性趨化因子受體，一種受體只能結(jié)合一種配體，例如CXCR4僅能與基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(SDF－1)即CXCL12結(jié)合并且與劑量呈正相關(guān)［4］;②共享性趨化因子受體，一種受體能結(jié)合CC趨化因子家族或CXC家族中多個(gè)成員，但不能結(jié)合跨家族的趨化因子，大多數(shù)的趨化因子受體屬于此類;③雜合性趨化因子受體，即既能與CC家族趨化因子結(jié)合，也能與CXC家族趨化因子結(jié)合，DARC(Duffy血型抗原，紅細(xì)胞趨化因子受體)是此家族的唯一成員，DARC與人類免疫缺陷病毒(HIV)感染相關(guān)的趨化因子受體包括CXCR4和CCR5。

1.3 趨化因子的信號(hào)傳導(dǎo) 絕大多數(shù)趨化因子能夠激活G蛋白敏感的磷脂酶C，導(dǎo)致3，4，5－三磷酸激醇的產(chǎn)生和胞內(nèi)Ca2+水平的升高。然而在某些細(xì)胞的趨化運(yùn)動(dòng)中，并檢測(cè)不到Ca2+水平的升高，這提示可能有其他生化改變?cè)谮吇^(guò)程中起更為重要的作用。趨化因子與受體結(jié)合后的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑以白介素－8(IL－8)/CXCL8的研究最為深入，IL－8/CXCL8受體的α亞單位為百日咳毒素敏感的GαI［5］。當(dāng)外環(huán)境中不存在IL－8時(shí)，G蛋白的三個(gè)亞單位呈聚合狀態(tài)，α亞單位與GDP結(jié)合;當(dāng)IL－8與受體結(jié)合時(shí)，GTP取代GDP，與α亞單位結(jié)合，同時(shí)形成游離的βγ二聚體，βγ二聚體活化兩條主要信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的酶為磷脂酶 Cβ2、β3(phospholipase Cβ2 andβ3，PLCβ2 and 3)和肌醇磷脂－3激酶(phosphatidylinositol－3－OH kinases，PI－3K)。PLC活化后，水解細(xì)胞膜上磷酸肌醇酯，產(chǎn)生三磷酸肌醇(IP3)和甘油二酯(DAG)，IP3促使胞內(nèi)儲(chǔ)存鈣的釋放，引起胞內(nèi)Ca2+濃度的快速升高，進(jìn)而激活磷脂酶D等Ca2+－Ca調(diào)節(jié)蛋白激酶，DAG可激活蛋白激酶C(PKC)。PI－3K活化后，快速產(chǎn)生大量的3，4，5三磷酸激醇，活化蛋白激酶B(proteinkinaseB，PKB)。近來(lái)研究表明:βγ亞單位二聚體還能導(dǎo)致MAP激酶的活化，具體機(jī)制尚在研究之中;而α亞單位的作用不僅是通過(guò)與GTP或GDP的結(jié)合調(diào)控βγ亞單位二聚體而發(fā)揮間接作用，還能通過(guò)活化酪氨酸激酶而發(fā)揮作用。當(dāng)GTP水解后，GαGDP與βγ二聚體重新結(jié)合，結(jié)束信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程［6］。

2 趨化因子受體拮抗劑

趨化因子拮抗劑可封閉趨化因子和趨化因子受體的結(jié)合，對(duì)炎癥、腫瘤、自身免疫病、變態(tài)反應(yīng)、AIDS等疾病具有治療作用。有統(tǒng)計(jì)表明，約30%的小分子藥物是以G蛋白偶聯(lián)受體為靶向的［7］。目前進(jìn)入臨床試驗(yàn)的趨化因子受體拮抗劑有45種，見表1。

2.1 CCR1拮抗劑 從2000年第一個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的CCR1拮抗劑BX471開始，到目前共有8個(gè)，但只有ChemoCentryx公司開發(fā)的CCX354化合物還在進(jìn)行以治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎為目的Ⅱ期臨床試驗(yàn)［8］，其余化合物的臨床試驗(yàn)已經(jīng)宣告失敗，CCX354可阻斷患者關(guān)節(jié)腔滑液中CCR1，減少炎性反應(yīng)，防止關(guān)節(jié)損害，抑制炎性細(xì)胞浸潤(rùn)關(guān)節(jié)?，F(xiàn)已開發(fā)的CCR1拮抗劑多以治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)和多發(fā)性硬化癥(MS)為主。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明對(duì)上述疾病有一定效果，但臨床試驗(yàn)還不是很滿意。

2.2 CCR2拮抗劑 到現(xiàn)在已經(jīng)有9個(gè)化合物進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，其中有5個(gè)化合物臨床試驗(yàn)宣告失敗，有4個(gè)化合物還在進(jìn)行中。①M(fèi)LN1202是Millennium公司開發(fā)，該公司長(zhǎng)期致力于趨化因子受體拮抗劑的研發(fā)，已經(jīng)開發(fā)出多個(gè)拮抗劑，目前MLN1202化合物用于RA和MS治療。在一項(xiàng)隨機(jī)、雙盲和安慰劑對(duì)照Ⅱ期臨床試驗(yàn)中，觀察到MLN1202顯著降低C反應(yīng)蛋白水平，其結(jié)果優(yōu)于對(duì)照組，并且未觀察到嚴(yán)重不良反應(yīng)事件，現(xiàn)已在美國(guó)展開多個(gè)臨床中心試驗(yàn)［9］。②CCX140是ChemoCentrys公司開發(fā)，在嚙齒動(dòng)物模型試驗(yàn)中顯示出其具有降低血糖作用，在以治療Ⅱ型糖尿病為目的的Ⅱ期臨床試驗(yàn)中，結(jié)果顯示治療組與安慰劑組有顯著差別，可使空腹血糖下降、糖化血紅蛋白降低，并且患者耐受性良好，安全性高，目前還在繼續(xù)開展更多的臨床試驗(yàn)［10］。③CCX872同為ChemoCentrys公司開發(fā)，該公司宣布此化合物進(jìn)入Ⅰ期臨床試驗(yàn)，用于治療糖尿病腎病(DN)，患者耐受性良好，未見嚴(yán)重不良反應(yīng)。④BMS－741672為百時(shí)美施貴寶公司研發(fā)，可降低糖化血紅蛋白，用于治療Ⅱ型糖尿病［11］，目前還在進(jìn)行Ⅱ期臨床試驗(yàn)。目前研究表明，CCR2拮抗劑可能在治療糖尿病領(lǐng)域開創(chuàng)出新的治療方法。

2.3 CCR3拮抗劑 目前開發(fā)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的CCR3拮抗劑共有6個(gè)，但有4個(gè)已經(jīng)停止臨床試驗(yàn)，還在進(jìn)行的有:①ASM8由法瑪西亞公司研發(fā)，可以抑制過(guò)敏性炎性物質(zhì)釋放，抑制β鏈的白介素－3、白介素－5和單核細(xì)胞，臨床試驗(yàn)表明，其用于治療輕度哮喘安全有效，患者耐受性良好［12］;②BMS－639623由百時(shí)美施貴寶公司在杜邦公司開發(fā)的化合物DPC168基礎(chǔ)上，對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造而研發(fā)的新化合物。其可以減少肺部嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量，減少過(guò)敏原，穩(wěn)定肺組織肥大細(xì)胞膜，抑制過(guò)敏介質(zhì)釋放，并減少CYD2D6代謝酶的滅活作用，改善藥動(dòng)學(xué)特征［13］，用于治療哮喘疾病，現(xiàn)進(jìn)入Ⅰ期臨床試驗(yàn)。從開發(fā)結(jié)果分析，CCR3拮抗劑在哮喘疾病治療領(lǐng)域應(yīng)用較多，為哮喘疾病開創(chuàng)了新的治療途徑。

表1 進(jìn)入臨床試驗(yàn)的趨化因子受體拮抗劑

2.4 CCR4拮抗劑 基礎(chǔ)研究表明CCR4不僅引起過(guò)敏性炎癥反應(yīng)，還引起人類T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒感染［14］，目前對(duì)CCR4拮抗劑的研究較少，現(xiàn)只有2個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)化合物。①KW－0761單克隆抗體，由Amgen公司研發(fā)，通過(guò)選擇性結(jié)合CCR4，抑制CCR4參與的信號(hào)傳導(dǎo)通路，阻斷趨化因子介入的細(xì)胞轉(zhuǎn)移、T細(xì)胞增殖和血管形成。此外該化合物可誘導(dǎo)抗體對(duì)CCR4產(chǎn)生依賴細(xì)胞毒作用，用于治療復(fù)發(fā)CCR4陽(yáng)性成人T細(xì)胞白血病淋巴瘤和外周T細(xì)胞淋巴瘤，目前Ⅱ期臨床試驗(yàn)還在進(jìn)行中［15］。②GSK2239633是葛蘭素史克公司研發(fā)，已進(jìn)入Ⅰ期臨床試驗(yàn)，用于治療過(guò)敏性哮喘研究，相關(guān)的臨床試驗(yàn)還在繼續(xù)進(jìn)行［16］。

2.5 CCR5拮抗劑 雖然CCR5被認(rèn)為是自身免疫性疾病的源頭，例如RA和MS等，但近來(lái)研究表明CCR5協(xié)同參與HIV感染，導(dǎo)致HIV侵入宿主細(xì)胞，單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞嗜性的病毒株利用CCR5侵染細(xì)胞，因此目前所研發(fā)CCR5拮抗劑都用于HIV治療。馬拉諾維(Maraviroc)由輝瑞公司研發(fā)，是具有高度選擇性CCR5拮抗劑，抗HIV活性強(qiáng)，對(duì)HIV病毒各個(gè)亞型都有活性，但對(duì)G亞型活性低。臨床試驗(yàn)表明，本藥口服生物利用度高，半衰期為17 h，不呈劑量依賴，對(duì)CCR5嗜性HIV潛伏期患者給予單一短期治療后，患者體內(nèi)病毒載荷量明顯降低，患者耐受性好，未見嚴(yán)重不良反應(yīng)，停藥10 d后，病毒載荷量仍受到抑制，只需5～7 d服藥一次，無(wú)須頻繁用藥。臨床試驗(yàn)顯示，該藥具有較好的有效性和安全性［17］，并于2007年通過(guò)美國(guó)FDA審批，成為第一個(gè)上市抗 AIDS的 CCR5拮抗劑藥品［18］。

目前還在繼續(xù)試驗(yàn)的CCR5拮抗劑有:①Pro140是Progenies公司研發(fā)，用于治療HIV感染患者，單次靜脈給藥后可使病毒活性降低100倍，并且能維持10 d，未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)，患者耐受性良好［19］。進(jìn)一步研究顯示，Pro140采取皮下注射也可產(chǎn)生與靜脈給藥類似相同治療作用，而皮下給藥方式更方便病人自我治療。②Cenicriviroc(TAK－652)武田公司研發(fā)，選用高溫超導(dǎo)方式并通過(guò)化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾獲得活性強(qiáng)、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、口服生物利用度較高的化合物TAK－652，可以阻斷 CCL3與 CCR5結(jié)合，同時(shí)也能阻斷 CCL2與CCR2結(jié)合，對(duì)分離的HIV毒株活性強(qiáng)，目前正在進(jìn)行Ⅱ期臨床試驗(yàn)［20］。③SB－728為Sangamo公司研發(fā)一種新型CCR5拮抗劑，通過(guò)修改CCR5基因編碼，使趨化因子受體失去正常功能，可阻斷HIV傳播，目前正在進(jìn)行Ⅱ期臨床試驗(yàn)［21］。④HGS004是HGS公司研發(fā)人類IgG4單克隆抗體，對(duì)CCL3、CCL4和CCL5三個(gè)配體都有高度選擇性，對(duì)HIV病毒有強(qiáng)大抑制作用，Ⅰ期臨床試驗(yàn)顯示該化合物是安全的，患者耐受良好［22］。

2.6 CCR9拮抗劑 研究發(fā)現(xiàn)在胸腺細(xì)胞、小腸淋巴細(xì)胞和上皮淋巴細(xì)胞存在CCR9，能與CCL25結(jié)合，表現(xiàn)在克羅恩病患者外周血液中T淋巴細(xì)胞顯著增加CCR9/CCL25的表達(dá)［23］。Chemocentryx公司經(jīng)長(zhǎng)期研究開發(fā)出的化合物CCX282(Vercirnon)，可抑制細(xì)胞中趨化因子CCL25與受體CCR9結(jié)合，阻止炎性細(xì)胞轉(zhuǎn)移消化道過(guò)程中CCR9功能，阻斷CCR9傳遞信號(hào)，消除存在腸道的炎性細(xì)胞。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，該藥對(duì)于回腸克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型有效，在為期4周中重度克羅恩?、蚱谂R床試驗(yàn)中顯示，每日1次給藥0.25 g，患者耐受性良好，在多個(gè)療效終點(diǎn)均優(yōu)于對(duì)照組［24］，目前已獲準(zhǔn)進(jìn)行Ⅲ期臨床試驗(yàn)。

2.7 CXCR1/CXCR2拮抗劑 人們?cè)谘芯坎悸宸視r(shí)發(fā)現(xiàn)其具有較強(qiáng)的CXCL8抑制作用，從而使研究人員開發(fā)出新的化合物Repertaxin。該化合物具有抑制趨化因子CXCL8作用，但不是通過(guò)與趨化因子結(jié)合而發(fā)揮作用，機(jī)制尚不清楚。目前在進(jìn)行Ⅱ期臨床試驗(yàn)，用于器官移植后缺血再灌注［25］。另有報(bào)道，該化合物還可以治療乳腺癌，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其可抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，近期將在中晚期乳腺癌患者中展開臨床試驗(yàn)［26］。

Schering－Plough公司研發(fā)的新化合物 SCH－527123根據(jù)構(gòu)效關(guān)系分析為CXCR1/CXCR2雙重拮抗劑［27］，可抑制中性粒細(xì)胞和過(guò)氧化酶釋放 CXCL1和CXCL8，而在其他不匹配的受體間無(wú)此作用;可逆性結(jié)合CXCR1和CXCR2，并具有飽和性，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示可以阻塞肺中性粒細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞增生，在臭氧刺激氣道的健康受試者試驗(yàn)中，顯示可降低痰液中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，降低白介素8和過(guò)氧化酶，受試者耐受性良好，未見嚴(yán)重不良反應(yīng)［28］。

2.8 CXCR2拮抗劑 葛蘭素史克公司在早期研發(fā)可選擇性阻斷CXCL8的化合物SB225002基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)化學(xué)結(jié)構(gòu)改造，用鹵素氟和氯取代溴，并引入磺?；鶊F(tuán)而合成新的化合物SB656933，該化合物抑制CXCR2作用強(qiáng)，對(duì)CXCR1作用弱，可抑制中性粒細(xì)胞CD11b上調(diào)節(jié)和形狀變化，在使用臭氧所致氣管炎的健康志愿受試者的試驗(yàn)中顯示，可選擇性抑制CXCR2，減少炎癥反應(yīng)，2～100 mg劑量范圍內(nèi)患者耐受性良好，未見嚴(yán)重不良反應(yīng)，呈現(xiàn)劑量依賴性減少氣道炎癥反應(yīng)［29］，目前還在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。

2.9 CXCR3拮抗劑 目前CXCR3拮抗劑研究較少，只有Amgen公司研發(fā)的AMG487進(jìn)入臨床試驗(yàn)，用于自身免疫性疾病銀屑病治療［30］，但結(jié)果顯示與安慰劑相比沒有任何區(qū)別，由于沒有觀察到療效而終止該化合物開發(fā)。

2.10 CXCR4拮抗劑 在大多數(shù)白細(xì)胞亞群中，包括T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞均存在CXCR4，與CXCL12(SDF－1)結(jié)合產(chǎn)生表達(dá)。值得注意是CXCR4是嗜T性HIV病毒入侵宿主細(xì)胞必需之物。但是先前的研究顯示，單純用于AIDS治療時(shí)該藥毒副作用較大，并且口服生物利用度差，目前已停止此方面的研究。而更多的研究顯示此類拮抗劑主要用于腫瘤化療和抗排斥反應(yīng)方面，現(xiàn)已經(jīng)有1個(gè)化合物成為注冊(cè)藥品正式上市，還有多個(gè)化合物正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。①Plerixafor(商品名Mozobil)Genzyme公司研發(fā)第一個(gè)CXCR4拮抗劑［31］，通過(guò)抑制CXCR4可迅速動(dòng)員骨髓中干細(xì)胞從骨髓分化出來(lái)，增加血液循環(huán)數(shù)量，改善非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者體內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)量，同時(shí)可以消除骨髓中癌細(xì)胞(這些細(xì)胞是多發(fā)性骨髓瘤復(fù)發(fā)主要因素)，因而可以有效治療此種癌癥。目前該化合物完成Ⅲ期臨床試驗(yàn)［32］，并在2008年美國(guó)FDA正式批準(zhǔn)該化合物為注冊(cè)藥品，用于非霍奇金淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤(MM)治療。②TG－054(Burixafor)TaiGen公司研發(fā)，未公開化學(xué)結(jié)構(gòu)，研究顯示對(duì)CXCR4作用強(qiáng)，Ⅰ期臨床試驗(yàn)顯示單劑量給予本品可增加移植患者血液中干細(xì)胞數(shù)量，并且還與Mozobil作對(duì)比試驗(yàn)，開展了單一療法臨床研究，目前此化合物正在進(jìn)行Ⅱ期臨床試驗(yàn)用于治療MM和NHL。③POL6326是Polyphor公司研發(fā)，持有被稱為蛋白質(zhì)抗原類似物專利技術(shù)，具有CXCR4拮抗作用［33］。本品已經(jīng)在英國(guó)完成74例健康受試者Ⅰ期臨床試驗(yàn)，顯示具有良好耐受性和安全性，目前正在MM患者化療后并進(jìn)行自體造血干細(xì)胞移植者中展開Ⅱ期臨床試驗(yàn)。④還有2個(gè)化合物正在進(jìn)行Ⅰ期臨床試驗(yàn)，MDX－1338(Medarex公司)和 BKT140(Biokine公司)，具有CXCR4拮抗作用，用于治療MM研究。

3 趨化因子受體拮抗劑的發(fā)展方向

3.1 以變構(gòu)體為靶點(diǎn)的拮抗劑 最近的研究表明，趨化因子拮抗劑實(shí)際使用未達(dá)到預(yù)期效果，可能與趨化因子受體存在變構(gòu)體或立體異構(gòu)體有關(guān)。研究提示趨化因子與受體的結(jié)合至少涉及到兩個(gè)“位點(diǎn)”。第一步，受體細(xì)胞外環(huán)的N末端與趨化因子核心球形區(qū)域的相互作用;第二步，是趨化因子N末端信號(hào)區(qū)與受體的跨膜區(qū)和細(xì)胞內(nèi)環(huán)的相互作用。研究提示［34］，Plerixafor可以阻斷CXCL12的N末端與CXCR4受體的相互作用，而不能阻斷兩者作用的“第一步”。更多的研究證實(shí)拮抗劑可與胞漿內(nèi)袋狀結(jié)構(gòu)相結(jié)合。

3.2 以同源或異源寡聚體為靶體的拮抗劑 當(dāng)前的共識(shí)是，趨化因子受體通常形成同源或異源寡聚體。在考慮該因素后，設(shè)計(jì)趨化因子受體拮抗劑就會(huì)變得更加復(fù)雜，相關(guān)的調(diào)節(jié)機(jī)制包括配體介導(dǎo)的跨膜抑制和跨膜活化、受體去敏感化和受體內(nèi)化等，如CXCR4/CXCR7異源二聚體與多種腫瘤相關(guān)，但對(duì)該異源二聚體的了解比對(duì)任何一個(gè)單體的了解要少得多。通過(guò)使用Plerixafor特異性阻斷CXCR4受體發(fā)現(xiàn)，CXCR7可以調(diào)節(jié)CXCR4的功能［35］。另有研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞表達(dá)CCR2、CCR5和CXCR4的同源和異源二聚體，使用特異性拮抗劑Plerixafor后，在表達(dá)全部三種受體的細(xì)胞中，趨化因子結(jié)合其他受體的能力受到抑制［32，36］。

總之，趨化因子受體拮抗劑在治療炎性反應(yīng)和自身性免疫性疾病方面仍不失為一個(gè)有效的方法。盡管有一些臨床試驗(yàn)失敗，但仍然要保持謹(jǐn)慎樂(lè)觀的態(tài)度，當(dāng)有能力更清楚地了解疾病的生理病理過(guò)程，進(jìn)行更多的動(dòng)物試驗(yàn)后，就有可能設(shè)計(jì)出更有效的趨化因子受體拮抗劑，為治療炎癥、腫瘤、自身免疫病、變態(tài)反應(yīng)和AIDS等疾病提供有效治療藥物。

1 Proudfoot A E I，Power C A，Schwarz M K.Anti－ chemokine small molecule drugs:a promising future［J］.Expert Opinion on Investigational Drugs，2010，19(3):345

2 Andrews G，Jones C，W reggett K A.An intracellular allosteric site for a specific class of antagonists of the CC chemokine G protein－coupled receptors CCR4 and CCR5［J］.Mol Pharmacol，2008，73(3):855

3 Smit J J，Lukacs N W.A closer look at chemokines and their role in asthmatic responses［J］.Eur J Pharmacol，2006，533:277

4 曹雪濤.免疫學(xué)前沿進(jìn)展［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2009:311

5 Wise E，Duchesnes C，Allen R，et al.Small molecule receptor agonists and antagonists of CCR3 provide insight into mechanisms of chemokine receptor activation［J］.Biol Chem，2007，282:27935

6 Schwartz T，F(xiàn)rimurer T，Holst B，et al.Molecular mechanism of 7TM receptor activation a global toggle switch model［J］.Annu.Rev.Pharmacol Toxicol，2006，46:481

7 Congreve M，Langmead C，Marshall F.The use of GPCR structures in drug design［J］.Adv Pharmacol，2011，62:1

8 Dairaghi D，Zhang P，Wang Y，et al.Pharmacokinetic and pharmacodynamic evaluation of the novel CCR1 antagonist CCX354 in healthy human subjects:implications for selection of clinical dose［J］.Clin Pharmacol Ther，2011，89:726

9 Gilbert J，Lekstrom － Himes J，Donaldson D，et al.Effect of CC chemokine receptor 2 CCR2 blockade on serum C－reactive protein in individuals at atherosclerotic risk and with a single nucleotide polymorphism of the monocyte chemo attractant protein －1 promoter region［J］.Am J Cardiol，2011，107:906

10 Hanefeld M，Schell E，Gouni－ Berthold I，et al.Oral chemokine receptor 2 antagonist CCX140－B shows safety and efficacy in type 2 diabetes mellitus［J］.Diabetes，2011，60:A85

11 Carter P，Brown G，King S，et al.Discovery of an orallybioavailable CC chemokine receptor 2 antagonist derived from an acyclic diaminoalcohol backbone［J］.Bioorg Med Chem Lett，2012，22:3311

12 Imaoka H，Campbell H，Babirad I，et al.TPI ASM8 reduces eosinophil progenitors in sputum after allergen challenge［J］.Clin Exp Allergy，2011，41:1740

13 Santella J，Gardner D，Yao W，et al.From rigid cyclic templates to conformationally stabilized acyclic scaffolds.Part I:the discovery of CCR3 antagonist development candidate BMS－639623 with picomolar inhibition potency against eosinophil chemotaxis［J］.Bioorg Med Chem Lett，2008，18:576

14 Pease J，Horuk R.Chemokine receptor antagonists:Part 1［J］.Expert Opin.Ther.Pat.2009，19:39

15 Ishida T，Joh T，Uike N，et al.Defucosylated anti－ CCR4 monoclonal antibody(KW－0761)for relapsed adult T－cell leukemia－lymphoma:a multicenter phase II study［J］.Clin Oncol，2012，30:837

16 Procopiou P，F(xiàn)ord A，Graves R，et al.Lead optimisation of the N1 substituent of a novel series of indazole arylsulfonamides as CCR4 antagonists and identification of a candidate for clinical investigation［J］.Bioorg Med Chem Lett，2012，22:2730

17 Steven F L van Lelyveld，Annemarie M J Wensing，Andy I M Hoepelman.The MOTIVATE trials:maraviroc therapy in antiretroviral treatment－experienced HIV －1－infected patients［J］.Expert Rev Anti Infect Ther，2012，10(11):1241

18 Lieberman－Blum S S，F(xiàn)ung，H B，Bandres J C.Maraviroc:a CCR5 －receptor antagonist for the treatment of HIV －1 infection［J］.Clin Ther，2008，30:1228

19 Jeffrey M，Melanie A，Jacob P，et al.Anti－HIV－1 Activity of Weekly or Biweekly Treatment with Subcutaneous PRO 140，a CCR5 Monoclonal Antibody［J］.Infect Dis，2010，201(10):1481

20 Lalezari J，Gathe J，Brinson C，et al.Safety，efficacy，and pharmacokinetics of TAK－652，a CCR5/CCR2 antagonist，in HIV －1－infected，treatment－ experienced，CCR5 antagonist－ naive subjects［J］.Acquired Immune Defic Syndr，2011，57:118

21 Urnov F，Rebar E，Holmes M，et al.Genome editing with engineered zinc finger nucleases［J］.Nat，Rev Genet，2010，11:636

22 Lalezari J，Yadavalli G，Para M，et al.Safety，pharmacokinetics，and antiviral activity of HGS004，a novel fully human IgG4 monoclonal antibody against CCR5，in HIV －1 － infected patients［J］.Infect Dis，2008，197:721

23 Saruta M，Avanesyan A，F(xiàn)leshner P，et al.Phenotype and effector function of CC chemokine receptor 9－expressing lymphocytes in small intestinal Crohn’s disease［J］.Immunol，2007，178:3293

24 Walters M，Wang Y，Lai N，et al.Characterization of CCX282，an orally bioavailable antagonist of the CCR9 chemokine receptor，for treatment of inflammatory bowel disease［J］.Pharmacol Exp Ther，2010，335:61

25 Callisia Clarke，Satoshi Kuboki，Nozomu Sakai，et al.CXC Chemokine Receptor－1 is Expressed by Hepatocytes and Regulates Liver Recovery After Hepatic Ischemia/Reperfusion Injury［J］.Hepatology，2011，53:261

26 Ginestier C，Liu S，Diebel M，et al.CXCR1 blockade selectively targets human breast cancer stem cells in vitro and in xenografts［J］.Clin.Invest，2010，120:485

27 Raminder Aul，Sheena Patel，Susan Summerhill，et al.LPS challenge in healthy subjects:An investigation of neutrophil chemotaxis mechanisms involving CXCR1 and CXCR2［J］.Immunopharmacology，2012，13:225

28 Nair P，Gaga M，Zervas E，et al.Safety and efficacy of a CXCR2 antagonist in patients with severe asthma and sputum neutrophils:a randomized，placebo － controlled clinical trial［J］.Clinical＆ Experimental Allergy，2012，42:1097

29 Lazaar A，Sweeney L，MacDonald A，et al.Tal－Singer R SB－656933 a novel CXCR2 selective antagonist，inhibits ex vivo neutrophil activation and ozone － induced airway inflammation in humans［J］.Clin Pharmacol，2011，72:282

30 Tonn G，Wong S，Wong S，et al.An inhibitory metabolite leads to dose－and time－dependent pharmacokinetics of AMG 487 in human subjects after multiple dosing［J］.Drug Metab.Dispos，2009，37:502

31 De Clercq E.The AMD3100 story:the path to the discovery of a stem cell mobilizer(Mozobil)［J］.Biochem.Pharmacol，2008，77:1655

32 Dipersio J，Micallef I，Stiff P，et al.Phase III prospective randomized double－blind placebo－controlled trial of plerixafor plus granulocyte colony－stimulating factor compared with placebo plus granulocyte colony－stimulating factor for autologous stem－ cell mobilization and transplantation for patients with non － Hodgkin’s lymphoma［J］.Clin Oncol，2009，27:4767

33 Filomena de Nigrisa，Concetta Schiano，Teresa Infante.CXCR4 Inhibitors:Tumor Vasculature and Therapeutic Challenges［J］.Anti－ Cancer Drug Discovery，2012，7:251

34 Kofuku Y，Yoshiura C，Ueda T，et al.Structural Basis of the Interaction between Chemokine Stromal Cell－derived Factor－1/CXCL12 and Its G －protein－coupled Receptor CXCR4［J］.Journal of Biological Chemistry，2009，284(50):35240

35 Kalatskaya I，Berchiche Y A，Gravel S，et al:AMD3100 is a CXCR7 ligand with allosteric agonist properties［J］.Mol Pharmacol，2009，75(5):1240

36 Brave M，F(xiàn)arrell A，Ching Lin，et al.FDA review summary:Mozobil in combination with granulocyte colony－stimulating factor to mobilize hematopoietic stem cells to the peripheral blood for collection and subsequent autologous transplantation［J］.Oncology，2010，78:282