肉用仔雞疑似支原體與大腸桿菌病混合感染的診治

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(天臺(tái)縣畜牧獸醫(yī)局，浙江天臺(tái) 317200)

支原體與大腸桿菌病混合感染是養(yǎng)雞生產(chǎn)中常見的傳染病。單純的支原體病有較高的發(fā)病率和較低的死亡率。臨床上如支原體并發(fā)感染大腸桿菌病則病雞發(fā)病率、死亡率顯著增高，從而可造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1,2]。2012年4月，天臺(tái)縣境內(nèi)有15家養(yǎng)雞場(chǎng)先后出現(xiàn)疑似支原體與大腸桿菌病混合感染病例，筆者進(jìn)行了較為詳細(xì)的調(diào)查、診治，并以藥敏試驗(yàn)為依據(jù)，提出了用氟苯尼考、新霉素、丁胺卡那與泰樂菌素合用的治療方法?，F(xiàn)將有關(guān)情況簡要報(bào)告如下，供參考。

1 流行病學(xué)調(diào)查及病理剖檢

1.1調(diào)查項(xiàng)目 詳細(xì)詢問疫病發(fā)病時(shí)間、發(fā)病率和死亡率，雞群免疫情況和發(fā)病后的治療情況。飼養(yǎng)數(shù)量，飼養(yǎng)管理情況，雞舍衛(wèi)生條件等。

1.2臨床觀察 雞群精神狀態(tài)，糞便狀況及顏色，舍內(nèi)溫度、濕度、氨氣濃度，通風(fēng)情況，飲食等。

1.3病理剖檢 重點(diǎn)剖檢頭部鼻腔、心、肝、腸道、喉頭、氣管、支氣管的病理變化。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷

2.1涂片鏡檢 無菌采集病雞氣囊腔內(nèi)干酪樣滲出物觸片，涂片，革蘭氏或姬姆液染色鏡檢。

2.2全血平板凝集試驗(yàn) 取支原體抗原2滴于玻板上，用針刺破病雞翅膀下靜脈采集新鮮血1滴滴入抗原中，輕輕攪拌，充分混合，左右搖動(dòng)玻板，2 min內(nèi)出現(xiàn)大凝塊者判定為“+++”；凝塊小者為“++”；血滴邊緣呈顆粒狀凝集帶者為“-”；反應(yīng)程度“++”以上判為陽性[3]。

2.3細(xì)菌分離與培養(yǎng) 無菌采集病雞肝涂片，革蘭氏染色，鏡檢細(xì)菌形狀。無菌采集病雞肝臟，接種于肉湯、普通瓊脂和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h，觀察培養(yǎng)基變化情況。

2.4生化試驗(yàn) 分別進(jìn)行糖類分解、靛基質(zhì)(吲哚)、甲基紅(M-R)、V-P及硫化氫試驗(yàn)。

2.5藥敏試驗(yàn) 采集單個(gè)菌落，致密劃線于瓊脂平板表面或用“米”字劃線法劃線。用無菌鑷子將各種抗菌藥物圓紙片，分別貼于培養(yǎng)基表面，各片距離相等。37℃培養(yǎng)24 h，觀察含藥濾紙片周圍有無抑菌圈，并量其直徑大小，用mm數(shù)記錄。按抑菌圈直徑大小判定耐藥性、低敏度及高敏度(詳見表1)。

表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 流行病學(xué)調(diào)查及病理剖檢結(jié)果

據(jù)調(diào)查，15家養(yǎng)雞場(chǎng)均為幼齡(25～36日齡)肉仔雞發(fā)病，每家養(yǎng)雞1000～1500羽，死亡260～ 500羽，發(fā)病率為42.5%，病死率13.8%，雛雞7～12日齡開始發(fā)病。雞群全部按正規(guī)程序免疫。發(fā)病后，曾用青霉素、慶大霉素、先鋒霉素治療無效。

據(jù)臨床觀察，病雞精神沉郁，羽毛蓬松，食欲減退或廢絕，咳嗽、流鼻液、喘鳴、呼吸困難、結(jié)膜炎、部分患雞張口呼吸，排白色或黃白色稀糞。

病理剖檢可見鼻腔黏膜水腫充血，氣管和喉頭內(nèi)有黏液，氣囊混濁，有干酪樣物，肺淤血出血，心包膜增厚，心包液增量，部分可見纖維素和干酪樣混合物附于心包膜上，肝腫大，可見肝表面有小米粒大小壞死灶或附有一層灰白色纖維素膜，膽囊充滿暗綠色膽汁，脾腫大，小腸黏膜出血。

4 實(shí)驗(yàn)診斷結(jié)果

4.1涂片觀察 形態(tài)結(jié)構(gòu)及染色特性鏡檢，革蘭氏陰性，中等大小，兩端略圓的短粗桿菌，呈單個(gè)存在或成雙排列，在普通瓊脂上生長為圓形，菌落表面光滑濕潤，邊緣整齊，灰白色半透明，直徑2～3 mm。

姬姆染色顯微鏡觀察可見大小約0.25～0.5 μm，淡紅色，球形微生物。

4.2全血平板凝集試驗(yàn) 2 min內(nèi)出現(xiàn)藍(lán)紫色的大凝集塊，判定為陽性。

4.3細(xì)菌培養(yǎng) 經(jīng)37℃培養(yǎng)24 h后，可見肉湯呈均勻混濁，管底有灰白色沉淀；瓊脂培養(yǎng)基上出現(xiàn)灰白色微隆起的濕潤菌落；麥康凱培養(yǎng)基上出現(xiàn)磚紅色菌落。

4.4生化試驗(yàn) 詳見表2。

表2 生化試驗(yàn)結(jié)果

由表2中分離株與標(biāo)準(zhǔn)株的試驗(yàn)結(jié)果相對(duì)照，可知分離到的細(xì)菌為大腸桿菌。

5 治療效果

根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選用高敏藥物進(jìn)行治療。從肉雞場(chǎng)調(diào)選癥狀相似的病雞200羽，隨機(jī)分成四組，每組50羽。A組采用氟苯尼考和泰樂菌素，B組采用丁胺卡那和泰樂菌素，C組采用新霉素和泰樂菌素，D組為對(duì)照組，詳見表3及表4。

表3 治療試驗(yàn)用藥

表4 四組藥物治療情況

從表4可見，A組治愈率最高；B組次之，C組治愈率最低。從治療試驗(yàn)可知氟苯尼考和泰樂菌素對(duì)大腸桿菌與支原體混合感染的治療效果最好。

6 討論與分析

6.1據(jù)流行病調(diào)查分析，天臺(tái)縣部分肉仔雞養(yǎng)殖場(chǎng)支原體與大腸桿菌混合感染比較嚴(yán)重，這與當(dāng)?shù)仞B(yǎng)雞戶的飼養(yǎng)水平有關(guān)。支原體與大腸桿菌都是條件性致病菌，當(dāng)雞群受到應(yīng)激時(shí)(如環(huán)境變化，轉(zhuǎn)群，免疫，溫度忽高忽低，陰雨潮濕，換料等)容易發(fā)病感染。一旦混合感染發(fā)病率和死亡率增高。

從發(fā)病原因分析，本次疾病發(fā)生主要因法氏囊疫苗免疫，由于病毒在呼吸黏膜上復(fù)制，生長繁殖，使正常黏膜受到損傷，且免疫后，因機(jī)體抵抗力相對(duì)降低，受損的黏膜又給病原微生物提供了生長繁殖場(chǎng)所，以致引起廣泛發(fā)病。

6.2由臨床及病理觀察結(jié)果可見病雞癥狀和支原體與大腸桿菌的混合感染癥狀相符，但其他病癥也可以引起類似于大腸桿菌與支原體混合感染引起的病變，應(yīng)注意鑒別診斷。特別是雞敗血癥支原體感染引起的慢性呼吸道病，與出現(xiàn)呼吸道癥狀的其他疾病，如新城疫，傳染性支氣管炎，傳染性喉氣管炎，傳染性鼻炎，曲霉菌病，以及維生素A缺乏癥等，在臨床診斷時(shí)容易混淆，應(yīng)特別注意鑒別。

6.3通過生化試驗(yàn)可基本確定本病為埃希菌屬的細(xì)菌，通過全血平板凝集試驗(yàn)可初步診斷為支原體。綜合二者可初步診斷為支原體與大腸桿菌的混合感染。

6.4從表1藥敏試驗(yàn)結(jié)果可見大腸桿菌對(duì)氟苯尼考、丁胺卡那、新霉素敏感，對(duì)阿莫西林不敏感。由于青霉素類的藥物不在其抗菌范圍之內(nèi)。對(duì)細(xì)菌性疾病的治療，采用藥敏試驗(yàn)選擇合適藥物是最佳的辦法。使用藥物治療時(shí)，應(yīng)注意幾種藥物的適當(dāng)配伍或交替使用，以免耐藥菌株的產(chǎn)生。

6.5根據(jù)治療試驗(yàn)可見大腸桿菌與支原體的治療以氟苯尼考藥物效果為佳，但不宜長期使用，易產(chǎn)生耐藥性。氟苯尼考對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌等都有較好的效果，同時(shí)氟苯尼考在結(jié)構(gòu)上以F原子取代了氯霉素、甲砜霉素中丙烷鏈3碳位置上的羥基，阻止了細(xì)菌乙酰轉(zhuǎn)移酶在此位置上的乙酰化作用，故不受該酶影響而被滅活；而乙酰轉(zhuǎn)移酶又與細(xì)菌經(jīng)質(zhì)粒介導(dǎo)對(duì)氯霉素、甲砜霉素的耐藥性有關(guān)，因此氟苯尼考不會(huì)產(chǎn)生類似氯霉素、甲砜霉素質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性，且對(duì)許多氯霉素耐藥菌株仍然敏感，也可以消除氯霉素的副作用[4-5]。

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[2] 鄺榮祿.禽病學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版，1997:121-126，153-160.

[3] 陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)(第三版)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2001:215-216.

[4] 姚火春.獸醫(yī)微生物學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)(第二版)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002:37-39.

[5] 黃淑堅(jiān)，雷清福，曾小娜，等.廣東地區(qū)鴨疫里默氏桿菌與大腸桿菌混合感染病例病原藥敏試驗(yàn)[J]. 養(yǎng)禽與禽病防治，2005，200(4)：8-9.