收縮壓下降曲線方式建立兔創(chuàng)傷性失血性休克模型

李大鵬，張秋玲，趙立軍，呂春雷，翟真真，姜曉玲

創(chuàng)傷性失血性休克（THS）是院前急救中常見的急危重癥，也是現(xiàn)代戰(zhàn)創(chuàng)傷死亡的主要原因[1]。加強(qiáng)院前創(chuàng)傷休克急救技術(shù)研究是提高創(chuàng)傷復(fù)蘇技術(shù)的重要內(nèi)容，對(duì)急救中心創(chuàng)傷救治模式及創(chuàng)傷救治方式研究也有重要指導(dǎo)意義[2-4]?，F(xiàn)將筆者選擇大鼠急性失血方法，建立收縮壓下降曲線并對(duì)THS發(fā)生過(guò)程進(jìn)行分段研究，并建立實(shí)驗(yàn)流程易控制、非控制性失血性休克（UHS）影響及復(fù)蘇因素易掌握的THS模型報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雌性Wistar大鼠19只，SPF級(jí)，體重 435～570 g，平均（499.68±35.19） g，購(gòu)于山東省魯抗醫(yī)藥股份有限公司[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SCXK（魯）2008-0002]，質(zhì)量合格證號(hào) 0009922。 在十萬(wàn)級(jí)亞屏障凈化環(huán)境中恒溫、恒濕條件下適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，自由飲水。

1.2 模型制備

1.2.1 動(dòng)物麻醉與插管 10%水合氯醛進(jìn)行麻醉，按照0.3 ml/100 g大鼠體重的劑量，腹腔注射方式。麻醉穩(wěn)定后，將大鼠仰臥固定在解剖臺(tái)上，右側(cè)腹股溝區(qū)備皮，消毒后仔細(xì)解剖出其股動(dòng)脈，分離完畢后對(duì)血管進(jìn)行PE套管插管，并與八道生理記錄儀（美國(guó)Biopac公司）相連，連接完畢打開三通監(jiān)測(cè)大鼠收縮壓（SP）、舒張壓（DP）、平均收縮壓（MBP）、心率（HR）等變化。選擇以上消毒方式，解剖出大鼠頸動(dòng)脈，經(jīng)頸動(dòng)脈插入PE套管并與消毒的定量收集管相連，放血及留取血標(biāo)本。

實(shí)驗(yàn)前插管注射肝素鈉生理鹽水（2.5 U/ml）進(jìn)行肝素化抗凝。

1.2.2 模型建立 實(shí)驗(yàn)操作前穩(wěn)定大鼠30 min，記錄相關(guān)指標(biāo)基礎(chǔ)值（T1）。選擇頸動(dòng)脈放血管路放血，記錄每只大鼠收縮壓降至基礎(chǔ)值3/4（T2）、基礎(chǔ)值2/3（T3）、基礎(chǔ)值 2/5（T4）、基礎(chǔ)值 1/5（T5）4 個(gè)位置的時(shí)間、放血量，以及 SP、MBP、DP、HR 等血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。收縮壓達(dá)到下降曲線相應(yīng)位置后，封閉放血管路并維持，以觀測(cè)血流動(dòng)力學(xué)相關(guān)指標(biāo)變化情況，評(píng)估UHS模型效果。

2 結(jié) 果

選擇收縮壓曲線相關(guān)實(shí)驗(yàn)位置T1～T5為5個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組均分別統(tǒng)計(jì)處理19只大鼠的SP、MBP、DP、HR 數(shù)據(jù)，進(jìn)行組間兩兩比較，每組不同時(shí)間點(diǎn)比較用重復(fù)測(cè)量方差分析，取得統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果：

根據(jù)以上統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果如下：①SP組：F=246.235，P<0.01，各階段相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；②DP 組：F=148.18，P<0.01，各階段相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；③MBP 組：F=120.73，P<0.01，各階段相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；④HR 組：F=8.83，P<0.01，各階段相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3 討 論

UHS是由急性血液或血漿的大量丟失導(dǎo)致循環(huán)血量驟減引起，是導(dǎo)致死亡的重要原因之一[5]。由于時(shí)間、地點(diǎn)、設(shè)備和技術(shù)條件限制，創(chuàng)傷傷員在院前早期階段難以得到有效治療而不能有效控制失血，所體現(xiàn)UHS相關(guān)研究具有重要及實(shí)際意義[6-8]，而建立科學(xué)、規(guī)范、適用的動(dòng)物模型是相關(guān)研究的重要基礎(chǔ)。UHS模型應(yīng)主要體現(xiàn)：①以血管傷為主要致傷因素，休克以失血為主，血管傷和休克程度容易復(fù)制；②實(shí)驗(yàn)流程易控制，UHS的影響及復(fù)蘇因素易掌握；③主要反映休克發(fā)病過(guò)程及臨床特征，選擇樣本及指標(biāo)應(yīng)全面、有效。

筆者根據(jù)創(chuàng)傷救治院前期、院內(nèi)救治期、恢復(fù)期的實(shí)際，為體現(xiàn)救治關(guān)鍵是“黃金一小時(shí)”和“損傷控制”等方向[9]，結(jié)合現(xiàn)有創(chuàng)傷性UHS模型特點(diǎn)[6]，選擇大鼠急性失血方式建立THS模型，以收縮壓曲線相關(guān)實(shí)驗(yàn)位置T1～T5為5個(gè)實(shí)驗(yàn)組，通過(guò)不同位置對(duì)相關(guān)過(guò)程進(jìn)行分段研究，并可阻斷失血以維持休克期而建立UHS模型。

通過(guò)急性失血形成收縮壓曲線方式建立THS模型，可對(duì)THS發(fā)生及復(fù)蘇過(guò)程進(jìn)行分段研究，過(guò)程易于觀察及掌握，并可充分體現(xiàn)創(chuàng)傷后非控制性失血狀態(tài)及血流動(dòng)力學(xué)相關(guān)指標(biāo)變化情況，且能選擇相關(guān)位置留取血標(biāo)本檢測(cè)血常規(guī)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶、凝血活性因子、血液乳酸等指標(biāo)，以確定THS的最佳救治時(shí)間及觀測(cè)指標(biāo)、血流動(dòng)力學(xué)相關(guān)指標(biāo)與失血量關(guān)聯(lián)性、液體復(fù)蘇相關(guān)參數(shù)等，為臨床診療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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