心腦寧片對(duì)大鼠血栓形成的影響

張中華，呂宏迪，郝少君，張正臣

中風(fēng)是發(fā)病率高、病死率高、致殘率高、復(fù)發(fā)率高的疾病，是世界范圍內(nèi)人口病死的第三位病因和成人殘疾的首要原因。近10年來，我國中風(fēng)的發(fā)病率隨著人口老齡化以及受行為、社會(huì)環(huán)境因素的影響，仍有不斷上升的趨勢，每年新發(fā)中風(fēng)患者約130～150萬。我國中風(fēng)發(fā)病率居世界第2位，僅次于前蘇聯(lián)西伯利亞地區(qū)。世界衛(wèi)生組織最近的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)表明中風(fēng)每年要奪去五百多萬人生命，因中風(fēng)致殘者超過1500萬人。預(yù)計(jì)到2020年左右，全球每年死于中風(fēng)的人數(shù)將上升至七百多萬。缺血性中風(fēng)占所有類型中風(fēng)的85%左右。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，我國近年來出血性中風(fēng)的發(fā)病率明顯下降，缺血性中風(fēng)則明顯上升[1]。治療這一疾病的藥物很多，但效果均不很理想，筆者根據(jù)多年的臨床經(jīng)驗(yàn)篩選出由人參、當(dāng)歸、川芎、黃芪等組成的中藥片劑，具有活血化瘀，益氣安神，用于腦血栓形成，冠心病等，亦可用于記憶力減退，抗衰老等的治療。為探究其療效原理筆者進(jìn)行了心腦寧片對(duì)大鼠血栓形成影響的實(shí)驗(yàn)研究。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品 心腦寧片由解放軍第371醫(yī)院制劑室提供，批號(hào)20110606；阿司匹林腸溶片，石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司，批號(hào)018110810；腦心通膠囊，咸陽步長制藥有限公司，批號(hào) 111106；凝血酶原（PT）ELISA檢測試劑盒，上海長怡生物技術(shù)有限公司，批號(hào)20111201B；羧甲基纖維素鈉，天津恒興化學(xué)試劑制造有限公司，批號(hào)20090723；生理鹽水，河南華利制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)11041806。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 大鼠，清潔級(jí)，Wistar，河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)1112027。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 精密天平（AR1140/C），奧豪斯儀器（上海）有限公司生產(chǎn)；離心機(jī)（Anke TDL-40B），上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)；酶標(biāo)儀 （680），Bio-Rad生產(chǎn)；可調(diào)式移液器（ZX31689），熱電（上海）儀器有限公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 取清潔級(jí)體重260～280 g大鼠72只，SD，雄性，隨機(jī)均勻分為6組，分別灌服大、中、小劑量心腦寧片混懸液 （1.5、0.75、0.375 g/kg， 用 0.5%CMC 配成 75、37.5、18.8 mg/ml，2 ml/100 g），阿司匹林混懸液（0.05 g/kg，用 0.5%CMC 配成 2.5 mg/ml，2 ml/100 g）， 腦心通混懸液 （8 g/kg，用0.5%CMC配成0.4 g/ml，2 ml/100 g）和同體積的0.5%CMC，連續(xù)給藥7 d，1次/d。末次給藥30 min，大鼠用20%烏拉坦（1 g/kg）腹腔注射麻醉后，仰臥固定于鼠板上，解剖頸部、分離氣管，插入塑料套管[2]。分離右頸總動(dòng)脈和左頸外靜脈，置入絲線后備用；將絲線游離端聚乙烯管插入左頸外靜脈并結(jié)扎絲線，用肝素生理鹽水（5 U/ml）充盈三段相連的聚乙烯管中（取長約80 mm外徑1.6 mm聚乙烯管1根，另取長約60 mm外徑1.3 mm聚乙烯管2根，取7-0絲線長約50 mm（干燥至恒重，并稱重）置外徑1.6 mm聚乙烯管中，用外徑1.3 mm聚乙烯管固定，另一外徑1.3 mm聚乙烯管插入外徑1.6 mm聚乙烯管的另一端，用含肝素5 U/ml的氯化鈉注射液充滿聚乙烯管備用），將該管一端插入左頸外靜脈，再經(jīng)此管另一端插入右頸總動(dòng)脈中，立即放開動(dòng)脈夾，準(zhǔn)確記錄血流，15 min后終止血流，迅速取出絲線稱重，計(jì)算血栓濕重[3]。血栓重量（mg）=血栓絲線重量（mg）-絲線重量（mg）。大鼠取血，測凝血時(shí)間；離心，取血清，測定大鼠凝血酶原（PT）濃度[4]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析用SPSS 13.0 for windows統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)資料的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（s）表示，組間比較用方差分析（LSD 法）。

2 結(jié) 果

心腦寧對(duì)大鼠血栓濕重、凝血時(shí)間、凝血酶原濃度的影響見表1。

表 1 心腦寧對(duì)大鼠血栓形成的影響±s，n=12）

表 1 心腦寧對(duì)大鼠血栓形成的影響±s，n=12）

注：與空白對(duì)照組比，*P<0.05；與空白對(duì)照組比，#P<0.01

凝血酶原濃度空白對(duì)照組 0.036±0.006 105.8±43.6 0.097±0.118阿司匹林組 0.05 0.020±0.003#162.6±37.5#0.424±0.436#腦心通膠囊組 0.8 0.020±0.004#145.6±14.2#0.183±0.142大劑量心腦寧片組 1.5 0.022±0.004#146.9±39.3*0.248±0.143#中劑量心腦寧片組 0.75 0.024±0.004#141.4±31.1*0.180±0.233小劑量心腦寧片組 0.375 0.022±0.006#143.9±47.3 0.196±0.169組別 劑量（g/kg）血栓濕重（g）凝血時(shí)間（s）

從表1可看出，大、中、小劑量心腦寧片組、腦心通膠囊組和阿司匹林組與空白對(duì)照組比血栓濕重均顯著減輕 （P<0.01）；大、中劑量心腦寧片組凝血時(shí)間顯著延長（P<0.05），腦心通膠囊組和阿司匹林組可顯著延長（P<0.01）；大劑量心腦寧片組和阿司匹林組凝血酶原濃度顯著提高（P<0.01）。

3 討 論

心腦寧片是根據(jù)中醫(yī)理論和現(xiàn)代藥理研究成果擬定的院內(nèi)協(xié)定處方。該制劑由人參、川芎、當(dāng)歸、黃芪組成。方中以人參為君藥，《名醫(yī)別錄》：調(diào)中，止消渴，通血脈，破堅(jiān)疾，令人不忘，以其主補(bǔ)五臟，安精神，定魂魄；黃芪，補(bǔ)中益氣，為臣藥。當(dāng)歸，活血養(yǎng)血；川芎，其性善降結(jié)氣，以走肝經(jīng)，氣中之血藥，通行十二經(jīng)，具有理氣、活血化瘀的作用為佐藥。四藥合用，集活血化瘀、抗血栓、益氣之功于一體，既重視疏通脈管，以改善臟器供血，又注意改善人體整體功能及代謝，達(dá)到扶正祛邪之目的[5]。該制劑適用于氣虛血瘀癥之缺血性腦血管疾病的治療。為進(jìn)一步探討該藥藥理作用，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了心腦寧片對(duì)大鼠血栓形成影響的研究。結(jié)果顯示：大鼠腦血栓模型成功；與模型組比，心腦寧片大、中、小劑量組、腦心通膠囊組和阿司匹林組均可顯著減輕血栓濕重 （P<0.01）；大、中劑量心腦寧片組可明顯延長凝血時(shí)間（P<0.05），大劑量心腦寧片組和阿司匹林組可顯著提高凝血酶原濃度 （P<0.01）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：心腦寧片具有明顯抗腦血栓形成的作用，其作用機(jī)制可能延長凝血時(shí)間、提高凝血酶原濃度，其作用優(yōu)于心腦通膠囊和阿司匹林片。

志謝 本實(shí)驗(yàn)在河南中醫(yī)學(xué)院苗明三教授指導(dǎo)下完成，特此致謝

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