SA-6000血液流變分析儀清洗液的研制和應(yīng)用

賀洪軍

（四川省安岳縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 642350）

SA-6000血液流變分析儀是目前國內(nèi)先進(jìn)的血黏度分析系統(tǒng)，儀器采用錐板式測(cè)量方式，通過一個(gè)低慣性的轉(zhuǎn)矩馬達(dá)對(duì)被測(cè)試液體施加一個(gè)受控應(yīng)力，驅(qū)動(dòng)軸由一個(gè)低阻力磁浮軸承保持在中心位置，它將施加的應(yīng)力傳遞到被測(cè)液體上，其測(cè)試頭為錐板式。該儀器自動(dòng)化程度高，簡單，快速，特別適用于血栓性疾病的篩查［1］。但儀器所用清洗液采用獨(dú)特配方，其他型號(hào)儀器的清洗液不能取代，為了節(jié)約成本，本文對(duì)清洗液進(jìn)行了研制并取得了初步成功，經(jīng)與原裝清洗液進(jìn)行對(duì)比和實(shí)際應(yīng)用，效果良好，具有明顯的社會(huì)、經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料與方法

1.1 儀器 SA-6000血液流變分析儀（北京賽科希德科技發(fā)展有限公司）；PHS-2C型酸度計(jì)（上海虹益儀器儀表有限公司）；Moder13900滲透壓測(cè)定儀（美國生產(chǎn)）。

1.2 試劑 （1）對(duì)比試劑：SA-6000血液流變分析儀原裝清洗液。（2）自制試劑：主要成分為非離子表面活性劑、電解質(zhì)等化學(xué)試劑及適量的穩(wěn)定劑及防腐劑。

1.3 試劑配制方法 首先在分析天平上定量稱取不同種類和重量的表面活性試劑、電解質(zhì)等試劑，用蒸餾水溶解，不斷攪拌并加熱，配成1 000mL透明溶液過濾后備用。取2mL全血，讓其自然凝固，等量分成9部分，置于9根清洗干凈的透明試管備用。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 資料經(jīng)SPSS13.0軟件處理，作配對(duì)t檢驗(yàn)和相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

首先仔細(xì)分析原裝清洗液的主要成分，分析其理化指標(biāo)：pH、滲透壓及電導(dǎo)率等；然后設(shè)計(jì)自制清洗液配方并優(yōu)化。

2.1 析因設(shè)計(jì)選擇表面活性劑種類 根據(jù)兩種以上的表面活性劑組成的復(fù)合配方，在種類不同時(shí)可發(fā)生協(xié)同作用，獲得強(qiáng)去污能力這一原理［1］。作者采用析因設(shè)計(jì)篩選表面活性劑種類，其方法是將新鮮配制的一定濃度的表面活性劑，兩兩隨機(jī)分配，每次處理兩個(gè)因素（a、b），每個(gè)因素兩個(gè)水平（a1，a2，b1，b2），研究采用2×2析因設(shè)計(jì)組合方式，將實(shí)驗(yàn)單位隨機(jī)等分為4組，分別接受a1b1，a2b1，a1b2，a2b2各兩個(gè)水平共4種處理方式。通過10、30、60、300s等續(xù)觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)表面活性劑A與表面活性劑B的混合液能迅速使血凝塊溶解，交叉作用分析證明，表面活性劑合理組合具有明顯的增效作用。

2.2 正交試驗(yàn)優(yōu)選最佳濃度 因?yàn)殡娊赓|(zhì)及消泡劑等微環(huán)境不同，在不同程度上可以影響表面活性劑的去污能力，故采用正交試驗(yàn)考察其相互影響［2］，其步驟是先制定因素與水平表（表1）。按照正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)好的表格，嚴(yán)格操作，分別在9根試驗(yàn)管中加入不同的試劑，并于10、30、60、300s和15min及1h逐一觀察其溶解血凝塊的效果，并記錄下每種條件的試驗(yàn)結(jié)果（表2）。

表1 因素與水平表

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：9組試驗(yàn)在30s時(shí)上清液均出現(xiàn)紅色，表明紅細(xì)胞已經(jīng)開始溶解，隨時(shí)間推移，凝塊開始縮小，第8組能在15min時(shí)基本溶解全部血凝塊。其最優(yōu)組合為A3B2C1D3E1，即取表面活性劑 A 1mL、表面活性劑B 0.4 mL、消泡劑0.5mL、pH7.5，電解質(zhì)濃度9mol時(shí)清洗效果最佳。根據(jù)極差Ri的差異，各因素對(duì)清洗質(zhì)量影響程序如下：表面活性劑A＞消泡劑＞表面活性劑B＞電解質(zhì)濃度＞液體pH。

2.3 相關(guān)性分析 對(duì)臨床上50例患者靜脈血隨機(jī)取樣分別用原裝試劑和自配清洗液測(cè)定，結(jié)果見表3。

表3 兩種清洗液在儀器上測(cè)定的結(jié)果（n＝50）

自配清洗液與原裝清洗液在全血（切變率1、5、30、50、200）及血漿黏度測(cè)定中，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而相關(guān)系數(shù)最小為0.98，充分證明兩組數(shù)據(jù)呈高度正相關(guān)。說明自配清洗液可以替代原裝清洗液。

3 討 論

血栓性疾病是目前嚴(yán)重危害中老年生命健康的常見病，已成為世界各國成年人死亡和致殘的主要原因之一。血液黏度分析是心腦血管系統(tǒng)疾病乃至全身各系統(tǒng)疾病的臨床診斷及療效觀察最重要的項(xiàng)目指標(biāo)之一，大量研究證明，許多危害人類健康的常見病、多發(fā)病，如高血壓、高血脂、急性心肌梗死、閉塞性動(dòng)脈粥樣硬化癥、血栓閉塞性脈管炎、先天性心臟病、肺源性心臟病、充血性心力衰竭、惡性腫瘤、燒傷、休克及慢性肝腎疾病，在疾病的發(fā)生與發(fā)展過程中均與血液黏度升高有關(guān)［2］。

表面活性劑是指具有固定親水，親油基團(tuán)的化合物，主要分為陽離子表面活性劑，陰離子表面活性劑及非離子表面活性劑三大類。表面活性劑之間相互作用與相互影響的報(bào)道很多［3］，所以作者采用析因設(shè)計(jì)的科研方法尋找沒有相互拮抗，同時(shí)又具有增強(qiáng)去污效果的兩種表面活性劑。復(fù)合表面活性劑獲得比單一表面活性劑更優(yōu)的去垢效果的機(jī)制是：性質(zhì)不同的表面活性劑在溶液中形成膠束，有很強(qiáng)的表面活性作用，能大大降低水的表面張力，更有利于去垢［4］。同時(shí)，兩種不同性質(zhì)的表面活性劑與單一表面活性劑相比，不但沒有相同電荷的斥力，反而增加了正、負(fù)電荷間的引力，這就大大促進(jìn)了兩種離子間的結(jié)合，因而產(chǎn)生強(qiáng)的去垢效果［5］。陰離子表面活性劑具有很強(qiáng)的溶血能力，在本實(shí)驗(yàn)中得到了驗(yàn)證。

電解質(zhì)及消泡劑作用：電解質(zhì)可使離子型表面活性劑cmc大大降低，膠束聚集數(shù)增加，濁度降低，使增溶能力增強(qiáng)［6］。清洗過程中易產(chǎn)生氣泡，而使表面活性劑無法接觸污垢，加入消泡劑能有效清除液體流動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的氣泡，增強(qiáng)清潔效果。

析因設(shè)計(jì)是一種全面、均衡、高效的設(shè)計(jì)方法，是一種多因素分析設(shè)計(jì)方法。多因素設(shè)計(jì)區(qū)別于單因素設(shè)計(jì)的明顯特征是：其處理因素是由兩個(gè)或兩個(gè)以上因素組合而成，每個(gè)因素至少有兩個(gè)水平。這種設(shè)計(jì)的顯著特點(diǎn)是可以獲得3個(gè)方面重要信息：各因素的效應(yīng)大??；各因素間交互作用大??；通過比較各種組合的效應(yīng)，找出各因素各水平的最優(yōu)組合，正是由于本試驗(yàn)優(yōu)選出了好的配方，才有好的檢測(cè)結(jié)果。

清洗液的配制應(yīng)由指定的專職人員負(fù)責(zé)，必須固定試劑的生產(chǎn)廠商，不要隨意更換生產(chǎn)廠家，不同的廠家產(chǎn)品質(zhì)量有所不同，每次試劑配制最好兩人負(fù)責(zé)，做好記錄，保證清潔液有很好的重復(fù)性，這一過程非常重要。實(shí)踐證明：自主研發(fā)的清洗液效果佳，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，成本低廉，對(duì)皮膚無腐蝕。低濃度的復(fù)合表面活性劑同時(shí)適用于血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀及生化分析儀管道的日常清洗。隨著技術(shù)將愈來愈成熟，復(fù)合表面活性劑的研究與應(yīng)用將會(huì)受到人們更多的關(guān)注。

［1］ 翁維良.血液流變學(xué)研究方法及其應(yīng)用［M］.北京：科學(xué)出版社，1992：37-40.

［2］ 黃文芳.實(shí)用醫(yī)學(xué)分析技術(shù)與應(yīng)用［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：586-602.

［3］ 鐘靜芬.表面活性劑在藥學(xué)中的應(yīng)用［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：515-518.