斑蝥酸鈉維生素B6注射液對改善非小細(xì)胞肺癌多藥耐藥研究

王迎利，王麗萍，李曉鳳，馮志清

(包頭市腫瘤醫(yī)院，內(nèi)蒙古包頭 014030)

非小細(xì)胞肺癌化療效果差，由于多藥耐藥的因素常導(dǎo)致化療失敗。為進(jìn)一步提高非小細(xì)胞肺癌的化療療效，我院對2009年1月至2010年6月的非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行了以愛易舒聯(lián)合NP方案的臨床研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 病例材料

研究對象為2009年1月至2010年6月在我院住院的經(jīng)病理診斷為Ⅲ、Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌的患者80例，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組。其中實(shí)驗(yàn)組42例，女性20例，男性22例，年齡32～70歲，中位年齡42歲;鱗癌26例，腺癌16例，Ⅲ期24例，Ⅳ期18例。對照組38例，女性18例，男性20例，年齡31～58歲，中位年齡44歲;鱗癌24例，腺癌14例，Ⅲ期22例，Ⅳ期16例。所有患者Karnofsky評分≥60分，1個(gè)月內(nèi)未進(jìn)行放化療且未用過愛易舒及方案，預(yù)計(jì)患者可接受2周以上化療。

1.2 治療方法

每周期化療前后檢測血常規(guī)、肝腎功能、心電圖以及胸部CT。實(shí)驗(yàn)組:愛易舒50ml+0.9%氯化鈉注射液250ml靜脈點(diǎn)滴，聯(lián)合應(yīng)用NP方案(蓋諾25mg/m2第18天靜脈點(diǎn)滴，順鉑30mg/m2第2～4天靜脈點(diǎn)滴)，對照組只用NP方案，2組患者均輔以止吐及水化等輔助治療。

1.3 療效判定標(biāo)準(zhǔn)

化療前后觀察可測量病灶CT影像，按照世界衛(wèi)生組織(WHO)實(shí)體瘤客觀療效評定標(biāo)準(zhǔn):完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(NC)、進(jìn)展(PD)。計(jì)算有效率(CR+PR)及臨床受益率(CR+PR+NC)以及治療后1年生存率。

1.4 毒性反應(yīng)

按照世界衛(wèi)生組織(WHO)標(biāo)準(zhǔn)分為0～Ⅳ度。

1.5 腫瘤藥敏試驗(yàn)

因患者均為Ⅲ、Ⅳ期病例，實(shí)體瘤組織不易獲取，因此采用患者的外周血淋巴細(xì)胞代替腫瘤組織標(biāo)本進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)檢測［8］，于化療前及化療2周期后進(jìn)行腫瘤藥敏試驗(yàn)。用淋巴細(xì)胞分離液從新鮮的外周血中分離淋巴細(xì)胞(2000r/min，20min)，經(jīng)臺盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞。用完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為5×105/ml，接種細(xì)胞于96孔板。加藥:接種細(xì)胞后分別加抗癌藥，另設(shè)空白對照組(加細(xì)胞而不加藥)及調(diào)零組(只加培養(yǎng)液)，每組4個(gè)復(fù)孔。加藥后將96孔板放置于CO2孵箱，37℃培養(yǎng)。MTT檢測:加藥培養(yǎng)72h后，每孔加入5mg/ml MTT試劑10μl，繼續(xù)培養(yǎng)4h 再加入 DMSO100μl，放振蕩器震蕩15min使沉淀充分溶解，用酶標(biāo)儀(λ=570nm)測每孔的OD值，根據(jù)相對抑制率判斷藥物敏感性。相對抑制率=(對照孔平均OD值－加藥孔平均OD值)÷對照孔平均OD值×100%。淋巴細(xì)胞的相對抑制率＞20%判斷為藥敏陽性［11］。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 12.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)或四格表確切概率法。

2 結(jié)果

2.1 2組近期臨床療效(見表1)

表1 2組化療后近期臨床療效

2.2 1年生存率

經(jīng)隨訪獲得實(shí)驗(yàn)組42.9%(18/42)，對照組36.8%(14/38)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.3 毒副反應(yīng)(見表2)

2.4 治療效果

表3顯示，2組患者治療前、后腫瘤藥敏結(jié)果。

表2 毒副反應(yīng)評定表

表3 2組患者治療前、后腫瘤藥敏結(jié)果

3 討論

非小細(xì)胞肺癌約占全部肺癌的80%左右，晚期非小細(xì)胞肺癌預(yù)后差，不治療的1年生存率僅為10%［7］。糖蛋白多藥耐藥(MDR)是指腫瘤細(xì)胞經(jīng)化療藥物作用后，不但對該種化療藥物且對那些從未接觸過的結(jié)構(gòu)和功能完全不同的其他化療藥也產(chǎn)生耐藥性。MDR是惡性腫瘤化療失敗的一個(gè)重要原因之一［1］。美國癌癥協(xié)會統(tǒng)計(jì)，每年死亡的癌癥患者中，90%以上與MDR有關(guān)。斑蝥是我國傳統(tǒng)的中草藥，為芫青科昆蟲南方大斑蝥或黃黑小斑蝥的干燥全蟲，味辛、熱，歸肝、胃、腎經(jīng)，有大毒。據(jù)《神農(nóng)本草經(jīng)》記載，斑蝥具有散結(jié)消癓、破血逐瘀、攻毒蝕瘡的功效。南宋名醫(yī)楊士瀛在其著作《仁齋直指方論》中明確記載斑蝥可以治療癌癥。艾易舒為復(fù)方斑蝥酸鈉制劑，斑蝥酸鈉主要抗瘤成分為斑蝥素，是從斑蝥體內(nèi)提取的一種單萜烯類物質(zhì)，它抑制癌細(xì)胞的核酸代謝及蛋白質(zhì)合成，使癌細(xì)胞的形態(tài)和功能發(fā)生改變，從而導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡［1，3，4］。斑蝥素的毒性、刺激性很大，而斑蝥酸鈉是斑蝥素的半合成衍生物，抗腫瘤作用明顯優(yōu)于斑蝥素［6］，故在臨床中刺激性較輕，尤其是愛易舒加入維生素B6后減輕了斑蝥酸鈉對靜脈的刺激，可刺激骨髓造血，升高白細(xì)胞［2，5］，改善患者的一般狀況。從本研究可以看出，實(shí)驗(yàn)組的療效明顯優(yōu)于對照組，白細(xì)胞下降總發(fā)生率低于對照組，其他毒副反應(yīng)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，尤其是靜脈炎發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從藥敏試驗(yàn)我們觀察到，2組在治療前總敏感率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而治療后實(shí)驗(yàn)組總敏感率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這說明用愛易舒聯(lián)合NP方案治療非小細(xì)胞肺癌可以減少耐藥現(xiàn)象，提高藥物敏感性，故愛易舒具有逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的作用。腫瘤的多藥耐藥機(jī)制負(fù)載主要與運(yùn)轉(zhuǎn)蛋白、，酶系統(tǒng)和細(xì)胞凋亡相關(guān)基因有關(guān)［10］，而愛易舒具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡作用，可下調(diào)腫瘤細(xì)胞bcl-2基因的表達(dá)，從而逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥。本研究觀察2組患者1年生存率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但實(shí)驗(yàn)組有增高趨勢，有待于進(jìn)一步的觀察和隨訪。本研究通過探討斑蝥酸鈉對細(xì)胞MDR的作用和機(jī)制，為中藥逆轉(zhuǎn)腫瘤的多藥耐藥提供了理論依據(jù)，為中西醫(yī)聯(lián)合抗腫瘤提供了新的發(fā)展方向。

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