808例變態(tài)反應(yīng)性疾病敏篩過敏原檢測結(jié)果分析

張 燕，史學(xué)娟

（上海曙光醫(yī)院寶山分院：1.皮膚科；2.檢驗(yàn)科，上海201900）

過敏性疾病是一種常見的變態(tài)反應(yīng)性疾病，臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，如蕁麻疹、皮炎、過敏性鼻炎、支氣管哮喘等?；加凶儜B(tài)反應(yīng)性疾病的患者在第一次接觸變應(yīng)原時(shí)，體內(nèi)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生致敏淋巴細(xì)胞及相應(yīng)的抗體，如患者再次接觸這些變應(yīng)原時(shí)，變態(tài)反應(yīng)發(fā)作。因此，通過檢測患者血液中存在的特異性免疫球蛋白E（specific immunoglobulin E，sIgE）類過敏原抗體，可以尋找變態(tài)反應(yīng)性疾病的病因，對疾病的診斷及選擇合適脫敏治療具有極其重要的價(jià)值。為此，作者收集、整理了所有于2011年1～12月來本院就診被臨床診斷為變態(tài)反應(yīng)性疾病患者血清的敏篩過敏原（allergy screen）檢測結(jié)果，對資料進(jìn)行分析匯總，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 所有入選的血清樣本均來自本院2011年1～12月經(jīng)臨床確診為變態(tài)反應(yīng)性疾病的患者808例（涉及的變態(tài)反應(yīng)性疾病包括蕁麻疹、皮炎、支氣管哮喘、過敏性鼻炎），其中男398例，女410例；年齡最小11個(gè)月，最大92歲，平均（34.09±21.95）歲，分別按疾病和年齡大小來分組（表1）。入選的變態(tài)反應(yīng)性疾病患者所有入選患者在檢測前均停止服用抗組胺藥1周以上，2周內(nèi)未使用糖皮質(zhì)類固醇激素及免疫抑制劑。

1.2 方法

1.2.1 觀察指標(biāo) 采用敏篩過敏原體外半定量免疫試驗(yàn)的檢測方法，觀察變態(tài)反應(yīng)性疾病患者致敏物陽性率及血清總IgE水平。檢測儀及試劑由Mediwiss Analytic GmbH提供。

1.2.2 試驗(yàn)原理和方法 采用德國Mediwiss敏篩免疫印跡技術(shù)，分級定量檢測患者血清中過敏原特異性抗體sIgE，其測試結(jié)果用于判斷患者對某一過敏原的過敏程度。特異性過敏原（抗原）被吸附于硝酸纖維素膜表面，置于反應(yīng)槽中。用移液器加入患者血清后室溫下孵育，標(biāo)本中過敏原特異性的IgE抗體就會與過敏原發(fā)生反應(yīng)，并結(jié)合到硝酸纖維素膜上。將多余的抗體洗脫后，再加入生物素標(biāo)記的抗人IgE抗體，室溫下孵育，洗脫未結(jié)合上的抗體。然后加上堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈霉親和素，室溫下孵育，鏈霉親和素會和生物素結(jié)合。將未結(jié)合上的酶標(biāo)鏈霉親和素沖洗干凈。在加入BCIP／NBT酶（5－溴－4－氯－3－吲哚基磷酸鹽＋四唑硝基藍(lán)）作用底物孵育后，發(fā)生特定的酶顯色反應(yīng)，試劑條上出現(xiàn)沉淀。顏色深淺與血清中sIgE抗體含量呈正比。待試劑條干燥后，由專用過敏原檢測儀檢測，讀取定量檢測結(jié)果。

1.2.3 結(jié)果判斷 試劑條上沉淀的條帶顏色深淺與血清中sIgE抗體含量呈正比，可根據(jù)沉淀顏色得出sIgE抗體含量。方法是通過計(jì)算顯色條帶的面積積分，并與內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線對比（以草花粉為標(biāo)準(zhǔn)），對之進(jìn)行分級，分級與IgE的IU／mL濃度相對應(yīng)，分析中曲線均經(jīng)“平滑處理”，排除干擾。（1）把過敏原特異性IgE＜0.35IU／mL定為陰性反應(yīng)，為0級。（2）＞0.35 IU／mL定為陽性反應(yīng)，其中0.35～0.69IU／mL為1級（低）；0.70～3.49IU／mL為2（增加）。（3）＞3.5IU／mL定為強(qiáng)陽性反應(yīng)，3.50～17.49IU／mL為3級（顯著增加）；17.50～49.90IU／mL為4級（高）；50～100IU／mL為5級（較高）；＞100IU／mL為6級（極高）。

1.2.4 過敏原分組 將檢測的過敏原分為吸入組和食物組。吸入組包括：屋塵H1，戶塵螨D1，貓毛皮屑E1，狗毛皮屑E5，矮豚草 W1，蟑螂I6，桑樹T70，真菌混合組 Mx1（點(diǎn)青霉、交鏈孢霉、煙曲霉、分枝孢霉），草粉混合組Tx4（櫟、榆、梧桐、柳、三角葉楊）；食入組包括：牛奶F2，羊肉F88，腰果F202，雞蛋白F1，魚F3，芒果F91，牛肉F27，蟹F23，蝦F24，青貝F37。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SAS9.2統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。變態(tài)反應(yīng)性疾病的構(gòu)成和過敏原陽性人數(shù)采用分類匯總，計(jì)量資料以±s表示；計(jì)數(shù)資料主要描述頻數(shù)分布、構(gòu)成比及百分率等。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 患者的血清樣本過敏原測試結(jié)果 808例變態(tài)反應(yīng)性疾病患者的血清樣本過敏原測試出現(xiàn)陽性反應(yīng)553例（68.44%），其中過敏原sIgE陽性492例（60.89%）。

2.2 各年齡組4種變態(tài)反應(yīng)性疾病的分布情況 在調(diào)查患者中，兒童組比例為25.62%（207／808），青年組為27.35%（221／808），中年組為32.80%（265／808），老年組為14.23%（115／808）。因過敏性鼻炎來就診進(jìn)行過敏原檢測的患者比例最高為45.79%（370／808）。因支氣管哮喘來就診的患者比例以兒童和老年組為高，分別達(dá)到40.58%（84／207）和46.96%（54／115）；而以皮膚癥狀就診進(jìn)行過敏原檢測的患者比例相對較低為27.23%（220／808）。

2.3 4種常見變態(tài)反應(yīng)性疾病患者的過敏原檢測結(jié)果 在所有過敏原sIgE陽性的患者中，前6位的特異性過敏原是戶塵螨、點(diǎn)青霉分枝孢子、牛奶、屋塵、狗毛皮屑和羊肉；吸入性過敏原sIgE的陽性率為54.70%（442／808），明顯高于食入性過敏原sIgE 21.41%（173／808），χ2＝189.95，P＜0.05。過敏性鼻炎過敏原sIgE陽性率68.38%（253／370）為最高；支氣管哮喘為61.47%（134／218），略低于過敏性鼻炎；皮炎陽性率最低，為41.11%（37／90）。4種變態(tài)反應(yīng)性疾病間過敏原sIgE檢測陽性率比較經(jīng)多個(gè)獨(dú)立樣本的秩和檢驗(yàn)（K－W檢驗(yàn)）示（χ2＝27.51，P＜0.05），認(rèn)為4種疾病間過敏原陽性率分布不全相同；經(jīng)組間多重比較結(jié)果表明，過敏性鼻炎的過敏原sIgE陽性率分別高于皮炎和蕁麻疹，支氣管哮喘又高于皮炎，組間的三重比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其余各組兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；4種疾病組間吸入性過敏原的陽性率不全相同（χ2＝16.99，P＝0.000 7），支氣管哮喘的吸入性過敏原的陽性率高于過敏性鼻炎和皮炎，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；食入性過敏原陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝5.40，P＝0.144 7）。變態(tài)反應(yīng)性疾病組內(nèi)吸入性過敏原陽性率均大于食入性過敏原陽性率，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見表2、3。

表1 各年齡組4種變態(tài)反應(yīng)性疾病的分布情況［n（%）］

表2 變態(tài)反應(yīng)性疾病患者的過敏原sIgE檢測結(jié)果［n（%）］

續(xù)表2 變態(tài)反應(yīng)性疾病患者的過敏原sIgE檢測結(jié)果［n（%）］

表3 4種變應(yīng)性病患者過敏原tIgE和sIgE檢測結(jié)果［n（%）］

2.4 不同年齡組血清過敏原sIgE檢測結(jié)果 兒童組過敏原陽性 率 最 高，達(dá) 到 79.23%（164／207），其 次 是 青 年 組 為66.06%（146／221），中年組為51.70%（137／265），老年組最低為39.13%（45／115）。通過百分率的趨勢檢驗(yàn)，結(jié)果統(tǒng)計(jì)量Z＝－7.78［χ2＝Z2＝（8.00）2＝64.00，P＜0.05］，認(rèn)為年齡組與過敏原sIgE陽性率間存在負(fù)性線性關(guān)系，從具體數(shù)值看，年齡越小，過敏原sIgE陽性率越高，隨著年齡的增大，過敏原sIgE陽性率呈明顯的下降趨勢，見表4。

2.5 患者1種或多種過敏原的陽性率結(jié)果 在492例查出過敏原的患者中，只對1種過敏原呈陽性反應(yīng)的有216例（43.90%），2種的有117例（14.48%），3種及3種以上過敏原呈陽性反應(yīng)的有159例（32.32%）；血清總IgE陽性率為32.05%（259／808），316例特異性過敏原檢測結(jié)果均為陰性的患者中，有61例患者的血清總IgE＞200IU／mL；492例過敏原陽性的患者中，有294例血清總IgE濃度并不高。

表4 1種或多種過敏原陽性數(shù)

3 討 論

隨著環(huán)境因素、飲食習(xí)慣等發(fā)生改變，在最近的二三十年內(nèi)，世界范圍內(nèi)過敏性疾病的發(fā)病率都有逐年增加的趨勢［1－2］，由于多數(shù)患者變應(yīng)原不明確，給預(yù)防和治療帶來很大難度。盡管有許多較為有效的治療方法，但都存在著不少弊端。如脫敏治療，療程長，很少患者能堅(jiān)持到底，且停止治療后仍可復(fù)發(fā)；口服抗組胺類藥物，需長期服用，患者往往也有顧慮。因此，盡早查出致病原因，避免接觸過敏原或進(jìn)行特異性治療，可使大多數(shù)患者病情得到緩解，甚至完全控制。

本研究結(jié)果顯示，sIgE檢出陽性率為60.89%（492／808），低于 文 獻(xiàn) 報(bào) 道［3－7］，其 中 呼 吸 道 疾 病 患 者 sIgE 陽 性 率 為65.82%（387／588）顯著高于皮膚病患者47.73%（105／220），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝22.00，P＜0.05）。過敏性鼻炎陽性率68.38%（253／370）為最高；皮炎陽性率41.11%（37／90）為最低。同時(shí)，檢測結(jié)果還顯示，吸入性過敏原起主要作用，陽性率為54.70%，明顯高于食入性過敏原21.41%（χ2＝189.95，P＜0.05）。提示在本地區(qū)過敏性鼻炎和支氣管哮喘與過敏原的關(guān)系最為密切，且吸入性過敏原sIgE可能是誘發(fā)和加重過敏性疾病潛在的因素，相當(dāng)一部分患者與吸入性過敏原致敏有關(guān)。而皮膚過敏性疾病（如皮炎和慢性蕁麻疹）的發(fā)病機(jī)制中除變態(tài)反應(yīng)外，還有非變態(tài)反應(yīng)機(jī)制，如攝入一些含組胺的食品，其組胺直接作用于機(jī)體；或者食入富含其他生物胺的食物，其中的生物胺可與組胺競爭雙胺氧化酶，致組胺降解減少，或者某些食物、藥物及一些食品添加劑可能非特異性地從嗜堿性粒細(xì)胞釋放組胺，這些患者會有極類似過敏性疾病如蕁麻疹的臨床癥狀，但并不是真正的過敏反應(yīng)，致病過程中無sIgE產(chǎn)生。

本組變態(tài)反應(yīng)吸入性過敏原中以戶塵螨的陽性例數(shù)最多，有303例，占所有患者的37.50%，與其他過敏原比較存在顯著性差異，其次是點(diǎn)青霉及其分枝孢霉，陽性率為22.03%，提示引起本地區(qū)變態(tài)反應(yīng)性疾病最主要的吸入性過敏原是戶塵螨和點(diǎn)青霉及其分枝孢子屬，這一結(jié)果與國內(nèi)詹青松等［8］、孫廷泉等［9］、趙梓綱等［10］報(bào)道的結(jié)果相一致，由于檢測方法不同，陽性率有一定差異。上海地處沿海、溫暖、濕潤多雨的地區(qū)，其周圍環(huán)境和居室中的戶塵螨和真菌、孢子極易孳生；加上大氣及環(huán)境污染；空調(diào)的廣泛使用，室內(nèi)空氣不流通等諸多因素都給塵螨和真菌的繁殖提供了必要條件。因此，患者家居應(yīng)保持清潔、通風(fēng)、干燥，衣物勤晾曬，勿鋪地毯，不養(yǎng)寵物。對確認(rèn)戶塵螨過敏的患者，可進(jìn)行特異性脫敏治療，以提高對戶塵螨的耐受力。

本組患者過敏原檢測結(jié)果顯示，血清tIgE陽性259例（32.05%）；492例sIgE陽性的患者中，有294例（59.76%）血清tIgE濃度并不高，316例sIgE陰性的患者中，tIgE升高者有61例（19.30%）。由此可見變應(yīng)性疾病病因復(fù)雜，過敏原種類繁多，過敏因素可能在本檢查的19種過敏原之外；許多變應(yīng)性疾病患者血清tIgE水平不一定會增高［5］，甚至低于正常水平，過敏患者與健康人tIgE存在廣泛的交叉，tIgE不能用來診斷過敏，其升高也可見于選擇性IgA缺乏癥、骨髓瘤、霍杰金病、腎病綜合征、肝臟疾病等，故高tIgE僅意味著過敏的概率相對較高。另外，tIgE正常也不能排除過敏，因?yàn)閠IgE的水平受到遺傳、年齡、種族、性別、寄生蟲等許多因素的影響，且tIgE水平波動范圍大，也就是說，tIgE高不一定是過敏，過敏者的tIgE水平也不一定高，過敏與否主要取決于sIgE的存在，所以需結(jié)合sIgE等檢查結(jié)果進(jìn)行綜合判斷。本次檢測中有39.11%（316／808）患者未見變應(yīng)原陽性反應(yīng)，考慮這些患者病因中有較特殊的變應(yīng)原或存在其他的發(fā)病機(jī)制，囑其做進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)室檢查，以明確可能的病因或其他疾病。

本研究中，兒童組過敏原陽性率最高（79.23%），老年組最低（39.13%）。年齡越小，過敏原陽性率越高，隨著年齡的增大，過敏原陽性率呈明顯的下降趨勢。提示年輕的變態(tài)反應(yīng)性疾病患者較年紀(jì)大的受致敏原影響大。

本調(diào)查結(jié)果還顯示，過敏原陽性患者中，僅由1種變應(yīng)原引起過敏者為216例（43.90%）；對2種或2種以上變應(yīng)原產(chǎn)生過敏反應(yīng)的患者為276例（56.10%），提示大多數(shù)患者對多種過敏原反應(yīng)陽性［3，11］，可能是由于存在同時(shí)致敏，或者反應(yīng)過程中許多炎癥因子及相關(guān)分子表達(dá)上調(diào)，患者處于高敏狀態(tài)，增加了新過敏原致敏的可能性；也可能是由于交叉過敏的存在，所以當(dāng)一種過敏原致敏后，再接觸含有相同致敏蛋白質(zhì)序列的物質(zhì)也容易發(fā)生過敏［12］。因此，患者可同時(shí)對多種變應(yīng)原產(chǎn)生過敏，這種現(xiàn)象也提示單一變應(yīng)原脫敏治療效果不佳的原因。不同的物質(zhì)含有相同或相似的致敏蛋白質(zhì)序列，提示醫(yī)生在臨床上要考慮到有同時(shí)致敏及交叉過敏的可能性，醫(yī)生除了指導(dǎo)患者盡可能避免檢測到的過敏原之外，也需查找和避

免未檢測到的過敏原，從而最大限度地減輕癥狀。

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