王 留 劉秀玲
(河南省商丘職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程系,河南省商丘市 476000)
豬傳染性胸膜肺炎 (PCP)是由胸膜肺炎放線桿菌 (APP)引起的一種高度接觸性呼吸道疾病,1957年P(guān)attison等首次報(bào)道[1],國(guó)內(nèi)自1990年楊旭夫等首次發(fā)現(xiàn)該病以來(lái),現(xiàn)己成為影響我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的五大疫病之一[2]。豬傳染性胸膜肺炎可致各年齡段的豬發(fā)生急性和慢性感染,急性型豬傳染性胸膜肺炎以纖維素性出血性胸膜肺炎為主要特征,發(fā)病率和死亡率常在20%以上,最急性型的死亡率高達(dá)80%~100%;慢性型豬傳染性胸膜肺炎以纖維素性壞死性胸膜肺炎為主要特征,病原菌潛伏于豬群內(nèi),可使豬只生長(zhǎng)緩慢,平均日增重下降,飼料報(bào)酬降低,給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。研究及臨床實(shí)踐表明,當(dāng)豬群發(fā)生偽狂犬、豬瘟、藍(lán)耳病、喘氣病、副豬嗜血桿菌等疾病時(shí),豬的免疫系統(tǒng)遭到破壞,肺臟的防御功能被削弱,產(chǎn)生免疫抑制,從而使豬只對(duì)該病的易感性增加,易于繼發(fā)或混合感染該病,造成更大損失。
自2011年9月開(kāi)始采用IHA方法對(duì)前來(lái)就診的豬群進(jìn)行采血檢測(cè),并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析,旨在為養(yǎng)豬場(chǎng)在養(yǎng)殖過(guò)程中預(yù)防和控制該病流行提供參考。
按照無(wú)菌采血要求,對(duì)就診的未免疫豬群隨機(jī)采集血液樣本967份,采用前腔靜脈或耳靜脈采血法采集血液,離心分離血清,于56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,用于血清學(xué)檢測(cè)。
5~200μL微量移液器、微量振蕩器、離心機(jī)、電熱恒溫箱等購(gòu)自江蘇金壇設(shè)備有限公司,冰箱購(gòu)自海爾電器公司,96孔V型血凝反應(yīng)板購(gòu)自海門天龍實(shí)驗(yàn)器材廠,豬傳染性胸膜肺炎正向間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。
將稀釋液滴于V型反應(yīng)板各孔中,每孔25μL;取被檢血清25μL于第1孔中,與稀釋液混合后吸取25μL加于第2孔,依次作倍比稀釋至第4孔;每孔加致敏紅細(xì)胞抗原25μL。每塊反應(yīng)板均設(shè)陽(yáng)性、陰性血清對(duì)照,對(duì)照均加至8孔。加完后將反應(yīng)板置微量振蕩器上振蕩1~2分鐘,直至診斷液中的紅細(xì)胞分布均勻,從振蕩器上取下反應(yīng)板,蓋上一塊與反應(yīng)板大小相近的玻璃板,置37℃溫育2~3小時(shí)后觀察結(jié)果。
出現(xiàn) “++”的血清最高稀釋倍數(shù)為該血清的抗體效價(jià),血清效價(jià)≥1∶8以上者判為陽(yáng)性,效價(jià)≤1∶4者判為陰性,介于二者之間判為可疑,應(yīng)重新試驗(yàn)。
應(yīng)用IHA方法共檢測(cè)血清樣本967份,其中檢出抗體陽(yáng)性血清224份,血清抗體陽(yáng)性率23.16%。由表1可見(jiàn),不同豬群傳染性胸膜肺炎血清抗體陽(yáng)性率具有一定的差異,生長(zhǎng)育肥豬血清抗體陽(yáng)性率最高 (39.68%),其次為哺乳母豬 (34.04%)、后備母豬 (21.88%)和哺乳仔豬 (16.14%),保育仔豬最低(15.97%)。
表1 豬傳染性胸膜肺炎抗體檢測(cè)結(jié)果
豬傳染性胸膜肺炎是規(guī)模化豬場(chǎng)的主要呼吸道傳染病之一,由于豬胸膜肺炎放線桿菌 (APP)血清型眾多,各型之間及同一血清型的不同菌株之間毒力和致病性均有差異,幾乎無(wú)交叉保護(hù)作用,因而導(dǎo)致該病的診斷、治療及預(yù)防比較困難。國(guó)外曾有報(bào)道生前無(wú)癥狀豬宰后64%有胸膜肺炎病變,73%能從肺中分離到豬胸膜肺炎放線桿菌。豬胸膜肺炎放線桿菌主要通過(guò)豬群間的接觸、空氣飛沫及污染物傳播,帶菌豬與慢性感染豬為本病的傳染源。豬營(yíng)養(yǎng)不良和各種應(yīng)激因素可誘發(fā)和促使本病的發(fā)生與流行,如氣溫突變、空氣污染嚴(yán)重、通風(fēng)不良、寒冷潮濕,不同日齡的豬只混群飼養(yǎng)、密度過(guò)大、飼料質(zhì)量差、長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)染蓪?dǎo)致本病的發(fā)生。
本次調(diào)查的被檢血清樣品全部來(lái)自未經(jīng)豬傳染性胸膜肺炎疫苗免疫的豬群,因此血清學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性即可判斷該豬群已經(jīng)感染豬傳染性胸膜肺炎。調(diào)查結(jié)果證明,商丘地區(qū)不同豬群傳染性胸膜肺炎血清抗體陽(yáng)性率在15.97%~39.68%之間,總體抗體陽(yáng)性率為23.16%,未免疫豬傳染性胸膜肺炎血清抗體陽(yáng)性率較高,表明商丘地區(qū)豬群傳染性胸膜肺炎野毒感染具有普遍性。
檢測(cè)結(jié)果還顯示,母豬群的傳染性胸膜肺炎血清抗體陽(yáng)性率較高,可能與母豬群的隱性感染有關(guān)。由于母豬飼喂時(shí)間較長(zhǎng),若管理不嚴(yán)或圈舍條件有限,就極容易感染豬胸膜肺炎放線桿菌。如果感染強(qiáng)度沒(méi)有達(dá)到致病,母豬長(zhǎng)期處于隱性帶菌狀態(tài)就容易產(chǎn)生抗體。保育仔豬血清抗體陽(yáng)性率最低,因?yàn)楸Si恰好剛斷奶,母源抗體已經(jīng)消失,體內(nèi)抗體水平達(dá)到最低。調(diào)查結(jié)果與王天奇等[3]、李珂等[4]、張光輝等[5]的報(bào)道基本一致,而與李明彥等[6]對(duì)豫南地區(qū)豬常見(jiàn)傳染病抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率為74.6%相差較大,可能與調(diào)查對(duì)象的地域分布、感染情況、豬齡結(jié)構(gòu)的不同及養(yǎng)殖場(chǎng)的規(guī)模、管理、環(huán)境等因素有關(guān)。
IHA檢測(cè)方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速、簡(jiǎn)便、適用性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),可作為豬傳染性胸膜肺炎臨床診斷的主要方法之一,在該病的流行病學(xué)調(diào)查和防控方面具有重要的指導(dǎo)意義。
[1]趙德明.豬病學(xué).張仲秋,沈建忠,譯.第八版.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2000:357-367.
[2]楊旭夫,彭發(fā)泉.我國(guó)豬胸膜肺炎嗜血桿菌感染的確定和診斷.畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),1990,21(3):243-245.
[3]王天奇,董發(fā)明,龍塔,等.洛陽(yáng)地區(qū)規(guī)?;i場(chǎng)傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查.中國(guó)獸醫(yī)雜志,2006,42(11):22-23.
[4]李珂,張方杰.河南部分規(guī)?;i場(chǎng)豬傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查.中國(guó)畜牧獸醫(yī),2009,3(5):181-183.
[5]張光輝,解金輝,陳靜,等.河南省豬傳染性胸膜肺炎血清學(xué)調(diào)查分析.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(6):326-327.
[6]李明彥,董冰.豫南地區(qū)豬常見(jiàn)傳染病抗體檢測(cè)及分析. 畜牧與獸醫(yī),2004,36(8):33-34.