老年慢性心力衰竭患者血清中親環(huán)素、內(nèi)皮素－1、同型半胱氨酸和半胱氨酸蛋白酶抑制劑C的表達及意義

梁 雪 張佩生 高 瑜 (鄭州大學第五附屬醫(yī)院心內(nèi)二科，河南 鄭州 450052)

近年來學者提出了心-腎機制、心-周圍循環(huán)機制、神經(jīng)體液機制及細胞因子學說等來試圖解釋慢性心力衰竭病變的機制〔1〕，其理論的共同特征是病變在進展中多種相關細胞因子參與，使心臟和內(nèi)環(huán)境相關的動態(tài)平衡失調(diào)。研究證實血清中親環(huán)素(CypA)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、同型半胱氨酸(Hcy)和半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(CystatinC)表達的失調(diào)在心血管疾病中的作用〔2，3〕。但是四者聯(lián)合檢測在老年人慢性心力衰竭病變進展時的作用及相關性尚未見報道。本實驗探討慢性心力衰竭老年患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年1月至2012年6月我院確診為慢性心力衰竭老年患者97例為觀察組。排除標準:①伴有嚴重感染;②伴有惡性腫瘤;③伴有肺、腎及四肢疾病的患者。其中男52例，女45例，年齡60～83〔平均(66.0±6.5)〕歲。收集同期在我院進行健康檢測，認定為各器官功能正常的健康老年人79例作為對照組，其中男40例，女39例，年齡60～78〔平均(65.5±6.9)〕歲。

1.2 CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的檢測 觀察組于確診后的次日清晨抽取靜脈血10 ml，對照組常規(guī)抽取清晨靜脈血10 ml，分離血清后進行蛋白的檢測。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC試劑盒均購自北京中杉金橋公司，檢測均應用ELISA法，并由主管檢驗師完成，減少誤差，嚴格質(zhì)量控制。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用SAS6.12軟件進行方差分析或t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達比較與對照組比較，觀察組CypA、ET-1和Hcy高表達，而CystatinC低表達(P ＜0.01，P ＜0.001)，見表1。

2.2 觀察組中不同心功能分級患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達 隨著心功能分級的增加，血清中cypA、ET-1和Hcy的表達明顯升高，而血清中CystatinC的表達明顯下降(P＜0.05，P＜0.01)。見表2。

2.3 觀察組患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC表達的相關性分析 觀察組患者血清中CypA和ET-1(r=0.45，P=0.012 0)、CypA 和 Hcy(r=0.41，P=0.010 4)、ET-1 和 Hcy(r=0.43，P=0.018 2)的表達呈正相關性;Hcy和CystatinC的表達呈負相關性(r= －0.47，P=0.018 2)。

表1 兩組血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達比較(ng/L，±s)

表1 兩組血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達比較(ng/L，±s)

分組 n CypA t值 P值 ET-1 t值 P值 Hcy t值 P值 CystatinC t值 P值觀察組 97 105.14±30.25 13.43 0.000 4 79.51±12.23 10.47 0.009 7 17.79±4.51 16.87 ＜0.000 1 0.96±0.2915.47 0.000 1對照組 79 50.68±19.61 46.69±10.50 7.81±2.49 1.87±0.96

表2 觀察組不同心功能分級患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達比較(ng/L，±s)

表2 觀察組不同心功能分級患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達比較(ng/L，±s)

心功能分級 n CypA F值 P值 ET-1 F值 P值 Hcy F值 P值 CystatinC F值 P值Ⅱ 37 89.13±20.37 10.24 0.008 0 68.71±17.61 8.78 0.012 0 14.69±6.54 11.37 0.007 4 1.14±0.35 9.47 0.009 7Ⅲ 31 100.23±27.94 80.75±14.42 16.53±5.84 0.94±0.26Ⅳ 29 125.68±31.43 98.65±20.32 20.86±6.51 0.82±0.26

3 討論

CypA是一種具有趨化功能的細胞因子，能夠趨化損傷因子向炎癥部位的聚集。CypA還可以促進細胞外信號調(diào)節(jié)激酶的活性，并通過 PI3K的作用，調(diào)節(jié)新生血管平滑肌細胞(VSMC)的生長和發(fā)育。當體內(nèi)細胞或組織中出現(xiàn)明顯的氧化反應和較強應激時，受損傷的細胞分泌CypA增加，使內(nèi)環(huán)境中CypA的表達均升高，而心力衰竭在病變進展時會出現(xiàn)明顯的氧化反應，因此認為心力衰竭時CypA的表達升高。CypA在作用過程中可能與生長因子可能具有共同的信號通路位點，并能激活ERK1/2，增加DNA的合成，抑制細胞的凋亡。ET-1是由內(nèi)皮細胞合成和釋放的21個氨基酸構(gòu)成的多肽，是已知最強的縮血管物質(zhì)之一，其中心力衰竭中也有明顯的促進作用〔4〕。Hcy是甲硫氨基酸轉(zhuǎn)甲基后生成的中間代謝產(chǎn)物，Hcy水平升高對血管內(nèi)皮有損害，而且通過多種途徑促進血管病變的發(fā)生〔5〕。CystatinC在有核細胞均有表達，可以參與細胞內(nèi)外蛋白水解的調(diào)控，保護細胞免受不適當?shù)膬?nèi)源性或外源性蛋白酶水解〔1〕。有研究認為CystatinC也是重要的組織蛋白酶蛋白酶抑制劑，在動脈壁蛋白溶解和抗蛋白溶解活性平衡中發(fā)揮重要作用，并參與血管壁和細胞外基質(zhì)產(chǎn)生和降解的動態(tài)平衡，對心力衰竭有重要的調(diào)節(jié)作用〔6〕。

本研究提示四種蛋白異常表達與心力衰竭的發(fā)生發(fā)展有關。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC可能具有協(xié)同正向作用，也提示四種蛋白在疾病進展中可能存在明顯的級聯(lián)反應。CypA激活后誘導3個重要的生物學反應及過程:首先，分泌到細胞外的CypA和ET-1刺激VSMC的ERK1/2、AKt和JAK磷酸化，引起下游NFκB通路激活，促進血管平滑肌細胞的大量增生，同時放大活性氧(ROS)的產(chǎn)生。其次，CypA也是直接的炎癥細胞趨化物質(zhì)，可誘導炎癥細胞分泌Hcy、白細胞介素(IL)-6和IL-12，并可以有效地通過活化NFκB通路，刺激單核巨噬細胞的表達，并通過激活基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)調(diào)節(jié)蛋白水解活性，為炎癥細胞遷移創(chuàng)造條件。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC是心力衰竭級聯(lián)反應過程中的一部分，但是其調(diào)節(jié)的具體機制尚不完全清楚。也有研究認為Hcy和CystatinC可能通過調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞合成和降解一氧化氮，影響心肌的舒張功能〔7〕，或者通過對氧化作用的調(diào)節(jié)，使心肌細胞膜脂質(zhì)過氧化，對心肌細胞形成損傷〔8〕。

總之，老年慢性心力衰竭患者血清中 CypA、ET-1、Hcy和CystatinC異常表達，四者的協(xié)同作用在疾病的發(fā)展中具有重要促進作用，聯(lián)合檢測可能對判斷病變程度有一定價值。

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2 楊玉雯，王德國，王 新，等.老年心力衰竭患者血漿CGRP和ET-1水平的相關性分析〔J〕.實用老年醫(yī)學，2005;19(4):187-8.

3 張 永，張友亮，黃宇理.血漿脂聯(lián)素、同型半胱氨酸與慢性心力衰竭關系的分析〔J〕.中華全科醫(yī)學，2011;9(8):1244-5.

4 胡詠梅，趙思勤，李 秋，等.慢性心力衰竭患者血漿腦鈉肽和內(nèi)皮素-1水平與血流動力學的相關性〔J〕.臨床心血管病雜志，2006;22(11):672-4.

5 孫云鵬，郭 宏.心力衰竭患者同型半胱氨酸和基質(zhì)金屬蛋白-9的相關性研究〔J〕.齊齊哈爾醫(yī)學院學報，2011;32(4):2248-9.

6 張 良，周勝華，方臻飛，等.慢性心力衰竭患者胱抑素C的變化及意義〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2010;10(7):1291-3.

7 張書敏，王永梅，杜貽萌，等.胱抑素C對大鼠心肌成纖維細胞增殖的影響〔J〕.山東大學學報(醫(yī)學版)，2010;48(10):9-13.

8 張紹武，寧 潔.心力衰竭患者血清N端腦鈉肽前體和同型半胱氨酸的測定及臨床意義〔J〕.陜西醫(yī)學雜志，2011;40(8):979-80.