170例重癥手足口病患兒病原學(xué)檢測分析

宋麗麗 管玉潔 毛彥娜 劉煒

手足口病(Hand-foot-mouth disease，HFMD)由腸道病毒感染引起，主要病原為柯薩奇病毒CA16(CoxAl6)、腸道病毒71(Ev71)及其他人腸道病毒［1］，主要發(fā)生于學(xué)齡前兒童，重癥患兒可并發(fā)腦炎、心肌炎等，病死率可達(dá)10% ～25%。2012年6月至2012年10月我們對鄭州市兒童醫(yī)院170例重癥手足口患兒病原學(xué)進(jìn)行檢測，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 170例患兒中男112例，女58例，年齡＜12個(gè)月15例，1～3歲129例，3歲以上26例，均有發(fā)熱、皮疹，體溫37.9℃ ～40.1℃，皮疹分布于手、足、口腔、臀部等處，合并神經(jīng)系統(tǒng)受累表現(xiàn)，出現(xiàn)腦膜刺激征、腱反射減弱消失，經(jīng)臨床診斷為重癥手足口病，實(shí)驗(yàn)室分離出腸道病毒，CoxAl6、EV7l等特異性核酸檢測陽性，符合2010衛(wèi)生部《手足口病診療指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 檢測方法

1.2.1 采集患者5～8 g新鮮糞便置于無菌采便管內(nèi)，4℃冷藏，24 h內(nèi)送檢，未及時(shí)檢測者置-20℃以下低溫暫存。

1.2.2 取2～3 g糞便加入裝有10 ml PBS、1 g細(xì)玻璃珠和1 ml氯仿的離心管中，劇烈振蕩30 min，6000 rpm/min離心，取上清液接種至RD細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞后行病毒分離。

1.2.3 采用QIAGEN Viral RNA Mini Extraction Kit試劑盒(CAT︰52904，F(xiàn)ermentas，美國)提取RNA，病毒核酸自動(dòng)提取，按2009衛(wèi)生部《手足口病預(yù)防控制指南》立即進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增，采用RT-PCR方法檢測病毒核酸，腸道病毒71型和柯薩奇病毒A16型實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測試劑盒，PCR產(chǎn)物采用3%瓊脂糖凝膠，成像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率表示，比較采用 χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 170例中病毒核酸檢測陽性142例(81.76%)，其中EV71陽性117例(68.8%)，CA16陽性4例(2.35%)，其他腸道病毒陽性21例(12.35%)，無EV71和CA16均呈陽性者(表1)。

2.2 170例中3歲以下患兒144例，約占84.7%;144例中EV71陽性101例(70.1%)，CA16陽性4例(2.8%)，其他腸道病毒陽性16例(11.1%);EV71陽性者為3歲以下患兒病毒核酸陽性總數(shù)的83.5%。

表1 170例重癥手足口病患兒病原情況(例，%)

表2 不同年齡手足口病患兒病原學(xué)檢測結(jié)果

3 討論

手足口病是由腸道病毒引起的急性傳染病，多見于嬰幼兒，與嬰幼兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善有關(guān)，整個(gè)消化道均可為傳染部位，病毒在腸道增殖，傳染性強(qiáng)、傳播快，短時(shí)間內(nèi)可造成較大范圍流行，主要表現(xiàn)為發(fā)熱及手、足、口腔等部位皮疹或皰疹，多數(shù)1周內(nèi)痊愈，少數(shù)患兒出現(xiàn)無菌性腦膜炎、腦炎、急性弛緩性麻痹、神經(jīng)源性肺水腫及心肌炎，重癥患兒可致死亡。

CA16、EV71及其他人腸道病毒為手足口病主要病原，目前尚無有效疫苗。EV71與CA16所致手足口病臨床表現(xiàn)難以區(qū)別，EV71所致手足口病可引發(fā)致死性腦病、腦出血，甚至心肌炎猝死［2］，近年我國重癥手足口病病原多為EV71，為病死率升高之主因，早期識別十分重要。

本研究中170例患兒中EV71陽性者117例，CA16陽性4例，其他腸道病毒陽性者21例，提示本地區(qū)重癥患兒病原以EV71為主，與國內(nèi)其他重癥手足口病主要病原報(bào)道一致［3，4］。EV71基因型在流行中不斷變化，基因突變可影響其致病性，需進(jìn)一步研究EV7l在手足口病中的動(dòng)態(tài)變化、病毒變異、基因型與基因重組等問題［5］。其他腸道病毒陽性者約占病毒核酸檢測陽性總數(shù)的12.35%，提示重癥手足口病存在EV71、CA16外其他毒株。

同一流行期可存在多種病毒，也可由不同亞型引起，積極開展手足口病病原檢測，提高早期病原學(xué)檢測水平，可提高重癥手足口患兒早期診斷率，控制病情發(fā)展，降低病死率，同時(shí)有助于明確原體不同時(shí)期分布特征及流行趨勢，預(yù)測本區(qū)域手足口病疫情暴發(fā)流行，針對性預(yù)防控制。

［1］ 趙海霞，韓輔華，張文濤.2008年遼源地區(qū)手足口病病例實(shí)驗(yàn)室結(jié)果分析.中華疾病控制雜志，2010，14(5):468．

［2］ 楊智宏，朱啟銘，李秀珠，等.2002年上海兒童手足口病病例中腸道病毒71型和柯薩奇病毒A組16型的調(diào)查.中華兒科雜志，2005，43(9):648-652．

［3］ 錢素云.手足口病在中國大陸的流行現(xiàn)狀及診治進(jìn)展.中國小兒急救醫(yī)學(xué)，2011，18(1):1-3．

［4］ 王彥霞，許汴利，陳豪敏，等.河南省2008-2010年手足口病流行趨勢及病原學(xué)分析.中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2012，46(8):761-762．

［5］ 黎念.手足口病研究進(jìn)展.重慶醫(yī)學(xué)，2011，40(1):93-95．