子宮內(nèi)膜異位癥不孕患者卵泡液VEGF的變化及意義

李建青，丁鴻燕，葉銀才

(1.平陽縣第二人民醫(yī)院檢驗科，浙江 平陽 325405;2.溫州醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院檢驗科，浙江 溫州 325000)

子宮內(nèi)膜異位癥常見于育齡期婦女，常發(fā)生在卵巢，是婦女不孕的常見原因，發(fā)病率為5%～10%[1]。子宮內(nèi)膜異位癥引起不孕的機制至今尚未完全闡明，其典型表現(xiàn)為內(nèi)膜樣細胞在子宮以外的地方定植、生長，尤以卵巢多見。有研究表明，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)參與子宮內(nèi)膜異位癥患者異位內(nèi)膜生長并導致患者不孕[2-4]，這些研究均檢測的是血清和腹腔液中的VEGF水平。有研究表明，血清和腹腔液中VEGF水平也是惡性腫瘤發(fā)展的關鍵因子[5]。卵泡是卵子發(fā)育和生長的地方，卵泡液是卵子發(fā)育的微環(huán)境。有研究表明，子宮內(nèi)膜異位癥會導致卵母顆粒細胞功能異常、卵母細胞的質(zhì)量下降、優(yōu)勢卵泡減少，致使受精、著床率下降。因此，測量卵泡液中的VEGF水平比血清和腹腔液更能說明問題[6]。本研究比較子宮內(nèi)膜異位癥不孕患者與其他原因?qū)е碌牟辉邪Y患者在促排卵后卵泡液及血清中VEGF的水平，以期為臨床提供有價值的指標。

材料和方法

一、研究對象

研究組為20例子宮內(nèi)膜異位癥不孕患者(內(nèi)異癥組)，來自溫州醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院生殖中心，年齡(32±3)歲。對照組為其他非子宮內(nèi)膜異位癥不孕患者20例，年齡(29±2)歲，無其他內(nèi)分泌疾病。

二、方法

1.絨毛膜促性腺激素(HCG)促排卵法 于月經(jīng)周期監(jiān)測血清雌激素水平，對有一定雌激素水平試驗對象肌肉注射HCG 5000～10000 IU 1～2 d促進患者排卵。

2.標本的收集 2011年1至10月對20例內(nèi)異癥組患者和20例對照組患者在同一生理周期HCG促排卵后，于溫州醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院生殖中心取卵室進行穿刺取卵泡液，收集不含血卵泡液。卵泡液采用離心法(150×g，10 min)去除細胞等有形成分，并冷凍保存。同時采血5 mL于無抗凝劑管中，1400×g離心15 min，取血清置冷凍環(huán)境保存。

3.血清和卵泡液VEGF的測定 人VEGF定量酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(雙抗體夾心法)由深圳依諾金生物科技有限公司提供，嚴格按照說明書操作。

三、統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行分析，計量資料比較用t檢驗，相關分析采用Pearson分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

一、血清和卵泡液VEGF檢測

內(nèi)異癥組患者血清和卵泡液VEGF水平均顯著高于對照組(P＜0.001)。內(nèi)異癥組和對照組患者的卵泡液VEGF水平均高于血清(P＜0.001)。見表1。

表1 內(nèi)異癥組和對照組患者VEGF水平(，ng/L)

表1 內(nèi)異癥組和對照組患者VEGF水平(，ng/L)

注:與對照組比較，*P＜0.001;與血清VEGF水平比較，#P ＜0.001

組別 例數(shù) 血清 卵泡液對照組 20 56.65 ±26.14 432.99 ±243.87#內(nèi)異癥組 20 87.05 ±48.26* 716.32 ±264.26*#

二、卵泡液和血清VEGF水平對子宮內(nèi)膜異位癥不孕的診斷價值

1.卵泡液受試者工作特征(ROC)曲線下的面積較血清大，分別為0.806和0.644。見圖1。

2.卵泡液和血清VEGF取判斷限(cut off值)分別為618.1和53.7 ng/L時最為敏感，卵泡液VEGF敏感性和特異性明顯高于血清VEGF。見表2、表 3。

3.卵泡液與血清VEGF分別在各自特定的cut off值下其敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值不同，卵泡液VEGF各值明顯高于血清。見表4。

圖1 卵泡液和血清VEGF敏感性、特異性分析

表2 卵泡液VEGF各Cut-off值對應的敏感性和特異性 (%)

表3 血清VEGF各Cut-off值對應的敏感性和特異性 (%)

表4 卵泡液和血清在特定的Cut-off值下敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值對比 (%)

討 論

子宮內(nèi)膜異位癥是導致患者不孕的原因之一，其具體機制未明，目前認為可能VEGF、性激素、促紅細胞生成素(EPO)、腫瘤壞死因子α等多種因素參與其中，臨床上常用糖類抗原125(CA125)來檢測，但此指標影響因素較多，特異性、敏感性差，其異常表達也見于卵巢腫瘤，僅可作為臨床篩查、療效觀察的輔助指標[2，7-9]。

VEGF是一種信號蛋白，屬于血小板源性生長因子家族，具有促進胚胎新生血管形成的作用，有增殖、抑制增殖、趨化和促分化作用，是子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)展的關鍵因子，也是惡性腫瘤發(fā)展的關鍵因子[5]。有研究表明，子宮內(nèi)膜異位癥患者血清VEGF水平與1985年美國生育學會修訂的子宮內(nèi)膜異位癥分期標準(r2AFS)呈正相關(P＜0.001)[8]。也有學者研究發(fā)現(xiàn)，腹腔液 VEGF水平在子宮內(nèi)膜異位癥呈反應性升高[10]。本研究所得結(jié)果顯示，內(nèi)異癥組患者卵泡液和血清VEGF水平均顯著高于對照組(P＜0.001)，卵泡液中VEGF水平明顯高于血清(P＜0.001)，且對VEGF診斷更加敏感。又有研究表明，卵泡液中VEGF的水平直接影響卵母細胞的質(zhì)量，并影響妊娠的結(jié)局[11-12]。因此我們認為，子宮內(nèi)膜異位癥引起卵泡中VEGF水平升高，使卵泡質(zhì)量下降，是造成不孕的一個重要的內(nèi)在原因。卵泡液中VEGF的濃度是卵泡質(zhì)量的直接反映，較血清VEGF濃度(受全身各相關部位產(chǎn)生的VEGF影響)更能反映和影響疾病的情況。監(jiān)測卵泡液中VEGF的水平，對治療子宮內(nèi)膜異位癥引起的不孕有著重要的臨床指導意義，對臨床診斷具有輔助參考價值。

綜上所述，子宮內(nèi)膜異位癥不孕患者卵泡液中的VEGF水平較血清更能反映疾病的情況，卵泡液中VEGF含量的改變在臨床上對子宮內(nèi)膜異位癥不孕的診斷更具參考價值。

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