氣相色譜－質(zhì)譜法聯(lián)用快速檢測(cè)果蔬中常見(jiàn)農(nóng)藥殘留

曹殿潔，黃信龍

(1.安徽新華學(xué)院藥學(xué)院，安徽合肥230088;2.合肥周谷堆農(nóng)產(chǎn)品批發(fā)市場(chǎng)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，安徽合肥230009)

食品中的農(nóng)藥殘留污染影響著人民生活質(zhì)量的提高和食品貿(mào)易的順利進(jìn)行。日常食用的果蔬施用的農(nóng)藥種類繁多，常見(jiàn)的農(nóng)藥如有機(jī)磷類農(nóng)藥、氨基甲酸酯類農(nóng)藥、菊酯類農(nóng)藥和除草劑，抑菌劑等。由于果蔬中往往同時(shí)殘留不同種類的農(nóng)藥，這對(duì)多殘留同時(shí)檢測(cè)條件提出很高要求。由于氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(GC－MS)具有靈敏度高、分析速度快、鑒別能力強(qiáng)等特點(diǎn)，可同時(shí)完成待測(cè)組分的分離和鑒定，特別適用于多組分混合物的定性定量分析，目前被廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥多殘留檢測(cè)［1－10］。本文在 GC－MS/SIM掃描方式下，通過(guò)采集待測(cè)組分的特征離子，利用化合物的保留時(shí)間、特征離子及其比例關(guān)系檢測(cè)同時(shí)確證果蔬中常見(jiàn)的樂(lè)果、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果、久效磷、克百威、乙草胺、甲胺磷、丁硫克百威、高效氯氰菊酯、噁唑菌酮等5類10種不同極性的農(nóng)藥殘留，縮短了分析時(shí)間，簡(jiǎn)化了操作步驟，建立了一種高效的果蔬中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)分析方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

新鮮果蔬 蘋(píng)果、白菜、蘿卜，購(gòu)自合肥周谷堆農(nóng)產(chǎn)品批發(fā)市場(chǎng);農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液［樂(lè)果(dimethoate)、乙酰甲胺磷(acephate)、氧化樂(lè)果(dimethoxon)、久 效 磷 (monocrotophos)、克 百 威(carbofuran)、乙 草 胺 (acetochlor)、甲 胺 磷(methamidophos)、丁硫克百威(carbosulfan)、高效氯氰菊酯(alphamethrin)、噁唑菌酮(famoxadone)］100mg/L 農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所;乙腈、丙酮 分析純，購(gòu)自合肥大藥房;氯化鈉 分析純，經(jīng)120℃下烘8h，合肥大藥房。

6890/5973氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國(guó)Agilent;FSH－2A型高速組織勻漿機(jī) 金壇市瑞華儀器有限公司;FA2004型分析天平 上海精科儀器有限公司;氮吹儀 天津市恒奧科技發(fā)展有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 將新鮮果蔬樣品攪碎混勻，稱取20.0g于勻漿機(jī)的玻璃瓶中，加入40mL乙腈，10000r/min勻漿3min，過(guò)濾，放入裝有5g氯化鈉的100mL具塞量筒內(nèi)，蓋上塞子，劇烈振蕩2min，在室溫下靜置10min，讓乙睛和水相分層，吸取10mL乙腈相溶液(上層)于小燒杯中，置于水浴內(nèi)30～40℃，溶液上方加氮?dú)獯祾撸舭l(fā)至近干，加入5mL丙酮，研洗殘?jiān)?，混勻后供氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀分析用。

1.2.2 氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀分析條件 色譜條件:載氣 He(純度99.99%);流速 1.0mL/min;進(jìn)樣量1.0μL;不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度 230℃;HP－5MS(30m×0.32mm×0.25μm)熔融石英毛細(xì)管柱;柱溫升溫程序:初溫50℃，以30℃/min升至150℃，再以10℃/min升至290℃保持5min。

質(zhì)譜條件:接口溫度280℃，電子轟擊(EI)離子源，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，離子化方式為電子電離，電子能量70eV，倍增器電壓在自動(dòng)調(diào)諧后加400V，同步掃描選擇離子監(jiān)測(cè)/全掃描(SIM/SCAN)模式。

全掃描方式(SCAN)分析10種農(nóng)藥單標(biāo)溶液，確定各農(nóng)藥組分的相對(duì)保留時(shí)間、定性離子和定量離子，在選擇離子監(jiān)測(cè)方式(SIM)測(cè)定10種農(nóng)藥混標(biāo)溶液。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜檢測(cè)

在設(shè)定條件下，10種農(nóng)藥的保留時(shí)間、定性離子和定量離子見(jiàn)表1，圖1為10種農(nóng)藥混標(biāo)采用SIM測(cè)定方式得到總離子色譜圖。

由圖1可以看到，在本實(shí)驗(yàn)條件下，包括乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果、久效磷、甲胺磷等5種有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酷類農(nóng)藥丁硫克百威、菊酷類農(nóng)藥高效氯氰菊酯以及常用農(nóng)藥乙草胺、噁唑菌酮得到了很好的分離，沒(méi)有相互干擾，符合農(nóng)藥多殘留檢測(cè)的方法要求。

2.2 樣品前處理?xiàng)l件的選擇

勻漿后果蔬樣品分別以乙腈和甲醇為溶劑進(jìn)行提取，發(fā)現(xiàn)用乙腈提取時(shí)，劇烈振蕩后分層明顯，而用甲醇提取時(shí)，分層效果不明顯，上清液較混濁，即乙腈的鹽析效果好于甲醇，有利于下一步的處理，故選擇乙腈為提取溶劑。

圖1 10種農(nóng)藥的總離子流圖Fig.1 Total ion chromatograms of 10 pesticides

表1 10種農(nóng)藥的保留時(shí)間和特征離子Table1 Retention time and characteristic ions of 10 pesticides

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍和檢出限

將混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制成相應(yīng)質(zhì)量濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，以峰面積(Y)對(duì)質(zhì)量濃度(X，mg/kg)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。10種農(nóng)藥線性關(guān)系列于表2。結(jié)果表明，在相應(yīng)的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)各農(nóng)藥的響應(yīng)值與其質(zhì)量濃度均呈良好的線性關(guān)系，10種化合物的相關(guān)系數(shù)均高于0.989，檢出限為1.6～18.5μg/kg。

2.4 回收率和精密度

在三種果蔬中添加0.2、0.4mg/kg兩個(gè)水平的10種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述前處理、測(cè)定步驟進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，每個(gè)水平重復(fù)測(cè)定3次，同時(shí)做空白對(duì)照，采用空白提取液配制的基質(zhì)標(biāo)樣進(jìn)行定量，結(jié)果如表3所示。由表3可知，部分樣品的甲胺磷、乙酰甲胺磷的添加回收率較低，10種農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于16%，本方法的回收率和重現(xiàn)性均能夠滿足農(nóng)藥殘留分析的要求。

表2 線性范圍、線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢測(cè)限Table 2 Liner range，regressive equation，correlation coefficients and the limits of detection

表3 方法的精密度和加標(biāo)回收率(%)Table 3 Method’s precision and recoveries of standard addition(%)

3 結(jié)論

利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用的高靈敏度、抗干擾強(qiáng)等特點(diǎn)，在選擇離子掃描模式下，建立了同時(shí)測(cè)定果蔬中10個(gè)不同種類的農(nóng)藥殘留的分析方法。結(jié)果表明，10種農(nóng)藥在0.05～0.5 mg/kg范圍內(nèi)線性條件良好，檢出限為1.6～18.5μg/kg。在空白基質(zhì)中進(jìn)行0.2、0.4mg/kg兩個(gè)水平的加樣回收實(shí)驗(yàn)時(shí)，平均回收率為70%～125%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%～15.5%。為了達(dá)到快速檢測(cè)的目的，使用簡(jiǎn)化了的前處理方法，對(duì)儀器的維護(hù)提出一定要求，如定時(shí)更換玻璃棉，清洗進(jìn)樣口襯管、離子源等，以保證整個(gè)方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，回收率良好。方法前處理步驟簡(jiǎn)單，保留時(shí)間重現(xiàn)性好，具有良好的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，可以滿足果蔬中農(nóng)藥多殘留限量國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)要求［11－12］，對(duì)其它樣品中農(nóng)藥殘留分析有參考價(jià)值。

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［11］GB2763－2005食品中農(nóng)藥最大殘留限量［S］.北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2005.

［12］GB18406.1－2001農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量無(wú)公害蔬菜安全［S］.北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2001.