加味附子理中湯對(duì)慢性腎臟病患者血清纖維化指標(biāo)及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1表達(dá)的影響※

謝永祥 龍春莉

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科，廣西 南寧 530023)

目前，我國(guó)慢性腎臟病(chronic kidney disease，CKD)的發(fā)病率有逐年增高趨勢(shì)，腎纖維化是所有CKD進(jìn)行性發(fā)展的共同通路，因此腎纖維化的防治工作顯得十分重要。中醫(yī)藥在抗腎纖維化、保護(hù)腎功能方面有著一定作用。2010—2013年，我們應(yīng)用加味附子理中湯治療CKD 50例，并與雙嘧達(dá)莫片治療50例、健康組40人對(duì)照，觀察加味附子理中湯對(duì)CKD患者血清纖維化指標(biāo)及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF－β1)表達(dá)的影響，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 診斷標(biāo)準(zhǔn) CKD及其分期標(biāo)準(zhǔn)均參照《內(nèi)科學(xué)》［1］，無(wú)心、肝、肺等其他重要臟器疾患。

1.2 一般資料 全部100例均為廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科住院患者，隨機(jī)分為2組。治療組50例，男33例，女17例;年齡18～60歲，平均(36.28±7.51)歲;病程2～9年，平均(5.62±3.12)年;CKD 分期:1期15例，2期25例，3期10例。對(duì)照組50例，男32例，女18例;年齡19～58歲，平均(37.21±9.01)歲;病程 2～8年，平均(5.12±2.21)年;CKD分期:1期14例，2期26例，3期10例。2組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。同時(shí)選取廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院健康體檢者40人作為健康組，男20人，女20人;年齡18～60歲，平均(36.33 ±7.21)歲。

1.3 治療方法 2組均結(jié)合對(duì)癥治療，伴有高血壓者予血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑治療，將血壓控制在17.29/10.64 kPa(130/80 mmHg)以內(nèi);伴水腫者予利尿治療。

1.3.1 對(duì)照組 予雙嘧達(dá)莫片(天津力生制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H12020225)50 mg，每日3次口服。

1.3.2 治療組 在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用加味附子理中湯。藥物組成:制附子(先煎)10 g，干姜6 g，人參10 g，白術(shù)15 g，丹參10 g，莪術(shù)10 g，紅花10 g。日1劑，水煎2次取汁400 mL，分早、晚2次服。

1.3.3 療程 2組均治療3個(gè)月。

1.4 觀察指標(biāo)及方法 應(yīng)用放射免疫法檢測(cè)血清纖維化指標(biāo)透明質(zhì)酸(HA)、層黏連蛋白(LN)、Ⅳ型膠原(C－Ⅳ)、Ⅲ型前膠原(PC－Ⅲ)，試劑盒由天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司提供，嚴(yán)格按說明書操作。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)外周血中TGF－β1含量，試劑盒由北京天象邦定生物醫(yī)學(xué)科技有限公司提供，嚴(yán)格按說明書操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用 SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 2組治療前后血清HA、LN、C－Ⅳ及PC－Ⅲ變化比較 見表1。

表1 2組治療前后血清HA、LN、C－Ⅳ及PC－Ⅲ變化比較μg/L，±s

表1 2組治療前后血清HA、LN、C－Ⅳ及PC－Ⅲ變化比較μg/L，±s

與健康組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;與本組治療前比較，△P ＜0.05;與對(duì)照組治療后比較，#P ＜0.05

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由表1可見，CKD患者治療前血清HA、LN、C－Ⅳ及PC－Ⅲ均較健康組明顯升高(P ＜0.05，P ＜0.01)。治療組治療后血清HA、LN、C－Ⅳ及PC－Ⅲ均較本組治療前、對(duì)照組治療后下降(P＜0.05)。對(duì)照組治療前后血清HA、LN、C－Ⅳ及PC－Ⅲ比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 2組治療前后TGF－β1含量變化比較 見表2。

表2 2組治療前后TGF－β1含量變化比較

由表2可見，CKD患者治療前TGF－β1含量較健康組明顯升高(P＜0.01)。2組治療后TGF－β1含量均較本組治療前下降(P＜0.01)，且治療組下降更明顯(P＜0.05)。

3 討論

隨著近年來(lái)對(duì)CKD患者腎纖維化認(rèn)識(shí)的不斷深入，對(duì)CKD的病因研究有了重大進(jìn)展，目前研究發(fā)現(xiàn)，TGF－β1是導(dǎo)致腎纖維化的主要細(xì)胞因子，它控制著細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的合成和降解［2－3］。HA 是蛋白多糖的一種，LN屬糖蛋白，而PC－Ⅲ、C－Ⅳ是膠原蛋白的主要成分，血清中這些成分的增高，在一定程度上反映血清纖維化的增強(qiáng)［4］。本研究結(jié)果表明，CKD患者存在血清 HA、LN、C－Ⅳ、PC－Ⅲ及外周血中TGF－β1含量異常升高，血清HA、LN、C－Ⅳ、PC－Ⅲ升高與TGF－β1含量異常有相關(guān)性。腎活檢是診斷腎纖維化的金指標(biāo)，但其創(chuàng)傷性和局限性限制了其在臨床上的開展。目前，尚無(wú)檢測(cè)腎纖維化的血清學(xué)指標(biāo)，反應(yīng)ECM成分的血清HA、LN、C－Ⅳ及PC－Ⅲ可以作為腎纖維化的有意義的檢查指標(biāo)。

中醫(yī)學(xué)無(wú)腎纖維化這一表述，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為各種腎臟疾病之所以纏綿難愈，主要由于疾病遷延反復(fù)不愈，導(dǎo)致脾腎嚴(yán)重受損，當(dāng)泄不泄，日久化濁，瘀血互結(jié)。基本病機(jī)在于脾腎虧虛，濁瘀互結(jié)［5］。我們根據(jù)中醫(yī)理論，結(jié)合CKD病因病機(jī)，應(yīng)用加味附子理中湯溫陽(yáng)健脾，化濁通絡(luò)。方中制附子、干姜溫陽(yáng)健脾，人參補(bǔ)中益氣，白術(shù)燥濕健脾化濁，丹參、莪術(shù)、紅花活血化瘀。本研究結(jié)果表明，治療組血清HA、LN、C－Ⅳ、PC－Ⅲ及外周血中機(jī)制，可能是能夠抑制動(dòng)物佐劑性關(guān)節(jié)炎的炎癥發(fā)展，對(duì)體液免疫及細(xì)胞免疫均有抑制作用，對(duì)快速增長(zhǎng)的上皮細(xì)胞、TGF－β1含量明顯下降，而對(duì)照組血清纖維化指標(biāo)無(wú)明顯改善，說明加味附子理中湯對(duì)緩解CKD病情、控制腎纖維化進(jìn)程有較好療效。腎纖維化病機(jī)與細(xì)胞因子的作用、細(xì)胞外基質(zhì)的沉積、細(xì)胞凋亡、脂質(zhì)代謝紊亂等因素有關(guān)。目前研究表明，加味附子理中湯對(duì)外周血中CD4+、CD8+具有雙向調(diào)節(jié)作用，使過高或過低的CD4+/CD8+比值恢復(fù)正常并維持兩者的平衡，能降低TGF－β1含量［6］。補(bǔ)腎藥有減少T淋巴細(xì)胞凋亡、增強(qiáng)細(xì)胞免疫、維持免疫穩(wěn)態(tài)的功能［7］。而活血化瘀中藥通過改善血流動(dòng)力學(xué)，抑制膠原表達(dá)，從而達(dá)到抗腎纖維化的作用［8］。這些可能是加味附子理中湯治療CKD發(fā)揮療效的主要機(jī)制。

在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，借助現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的研究成果，深入研究加味附子理中湯抗腎纖維化的作用機(jī)制，研究出臨床長(zhǎng)期使用的新劑型，這將為中醫(yī)藥在防治腎纖維化方面開辟?gòu)V闊的前景。

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