非常規(guī)狀態(tài)下的家蠶卵即時浸酸技術(shù)應(yīng)用

蔣龍?jiān)?/p>

(江蘇省蠶種管理所，無錫 214000)

家蠶是卵生昆蟲，所謂家蠶種就是蠶卵，產(chǎn)下后的蠶卵在完成受精、合子分裂和早期胚形成后，有直接進(jìn)入中后期發(fā)育直至孵化的非滯育類型，還有在早期胚形成后進(jìn)入滯育狀態(tài)，需要經(jīng)過自然冬季低溫或人工活化處理后才能夠進(jìn)入中后期發(fā)育而孵化的滯育類型。我國主要蠶區(qū)基本都使用的是滯育性蠶卵，其突出的優(yōu)點(diǎn)是蠶種有效保存時間長，結(jié)合先進(jìn)的各種人工孵化技術(shù)，一次生產(chǎn)的蠶種可以滿足1年內(nèi)甚至更長時間內(nèi)隨時用種的需要，但其中涉及復(fù)雜的蠶種保存和人工孵化處理模式。目前，蠶業(yè)生產(chǎn)只有春用、夏用和秋用幾個主要蠶期的處理模式實(shí)現(xiàn)了規(guī)范化的生產(chǎn)技術(shù)總結(jié)和應(yīng)用，但隨著生產(chǎn)環(huán)境和生產(chǎn)布局的變化，符合規(guī)范化狀態(tài)的情況并不多見。本文針對非常規(guī)狀態(tài)的即時浸酸技術(shù)發(fā)展背景及生產(chǎn)應(yīng)用情況進(jìn)行了總結(jié)。

1 即時浸酸生產(chǎn)問題的提出

蠶種即時浸酸作為生產(chǎn)上重要的蠶種處理方法常用于夏用種的供應(yīng)，如果因用種增加而致秋用冷藏浸酸種供應(yīng)不足，也可將早秋制種即時浸酸作補(bǔ)充調(diào)節(jié)。多年來，江蘇省夏期用種基本上穩(wěn)定在5萬張左右，均采用春制種即時浸酸的方法予以供應(yīng)，效果較好。常規(guī)的即時浸酸方法對浸酸適期的控制、浸酸標(biāo)準(zhǔn)及浸酸前后冷藏抑制的有效期都有嚴(yán)格的規(guī)定，這是過去近百年來反復(fù)論證和實(shí)踐證明非常安全可靠的規(guī)范技術(shù)。該規(guī)范技術(shù)要求在蠶卵產(chǎn)下后于24～25℃保護(hù)18～22小時實(shí)施浸酸，極限容許在產(chǎn)卵后24～25℃保護(hù)15～30小時實(shí)施浸酸，而實(shí)際生產(chǎn)上由于此時有很多生產(chǎn)處理，還有可能需要長途運(yùn)輸蠶種，很難控制穩(wěn)定的24～25℃保護(hù)溫度，相應(yīng)的經(jīng)驗(yàn)方法是卵色從淡黃色轉(zhuǎn)變成黃色時為浸酸適期。另一方面，農(nóng)村的用種時間很難與蠶種場的制種時間密切銜接，20世紀(jì)80～90年代發(fā)展的即時浸酸配套技術(shù)大大提高了生產(chǎn)的靈活性，其技術(shù)核心是浸酸前2.5℃冷藏抑制1～2天、不超過3天，浸酸后在25℃保護(hù)20小時后，在10～13℃中間溫度中保護(hù)8～10小時，再入庫用2.5℃冷藏抑制不超過20天(吉村儀成，1990;朱勇，1991;施俊香，1999)。

雖然即時浸酸的配套技術(shù)使蠶種的供應(yīng)時間超過了3周，然而，在實(shí)際生產(chǎn)能夠保證在浸酸適期浸酸的情況很少。第一種情況是微粒子病防治的需要，必須母蛾檢驗(yàn)合格的蠶種方可浸酸，有帶毒但合格的蠶種批次要先淘汰檢出微粒子的蠶種或關(guān)聯(lián)的蠶種。為此，浸酸前的蠶種冷藏抑制是一個目前普遍使用的方法，由于母蛾微粒子檢驗(yàn)和冷庫浸酸兩個環(huán)節(jié)的生產(chǎn)能力和工作安排存在的局限，生產(chǎn)上制種比較集中時很難及時處理，常常導(dǎo)致浸酸前冷藏抑制時間超過3天的常規(guī)方法極限，有時甚至長達(dá)7～8天。

第二種情況是春蠶制種正值盛夏，蠶種保護(hù)溫度難控制在24～25℃理想的狀態(tài)，經(jīng)常出現(xiàn)送庫蠶種發(fā)育進(jìn)程太快，浸酸時蠶卵已著色，且存在卵色開差，可以看到黃色、淡紅色到淡赤豆色各種卵色(發(fā)育階段)的蠶卵同時存在，超過了規(guī)范即時浸酸方法的浸酸適期，這種蠶種中發(fā)育快的卵對規(guī)范的即時浸酸刺激量已經(jīng)不敏感，出現(xiàn)遲孵化或不孵化而導(dǎo)致實(shí)用孵化率降低。另一方面，這種蠶種已納入夏用種計劃，如果不浸酸就沒有夏種供應(yīng)，改作越年種也容易造成損失。

2 即時浸酸生產(chǎn)問題的解決方案與生產(chǎn)應(yīng)用

規(guī)范的即時浸酸標(biāo)準(zhǔn)為液溫46.1℃時鹽酸比重1.075，蠶種在鹽酸中的浸漬時間5分鐘。上述即時浸酸蠶種生產(chǎn)問題的核心是超過浸酸適期的蠶種用規(guī)范的鹽酸刺激量會出現(xiàn)孵化推遲或部分卵不孵化，導(dǎo)致實(shí)用孵化率嚴(yán)重下降(徐世清，1991a)。鹽酸刺激對于這時期的蠶卵具有阻止進(jìn)入滯育發(fā)動，誘導(dǎo)蠶卵直接進(jìn)入非滯育卵相似的發(fā)育狀態(tài)(徐世清，1991b)，即時浸酸蠶卵從產(chǎn)下后至孵化的經(jīng)過時間比非滯育卵要長1日左右。徐世清(1990，1091c)進(jìn)行了產(chǎn)卵后100小時蠶卵的即時浸酸試驗(yàn)，提出了各種浸酸時期的蠶種鹽酸刺激量標(biāo)準(zhǔn)，試驗(yàn)也同時發(fā)現(xiàn)，浸酸時期越遲，浸酸后催青孵化的經(jīng)過時間越長。表明即時浸酸處理后的蠶卵不是立即停止滯育發(fā)動啟動正常孵化發(fā)育進(jìn)程，而有兩種進(jìn)程相互轉(zhuǎn)換的過程，這種過程浸酸時期越遲所需時間越長。余武昌(2010)也進(jìn)行了類似的試驗(yàn)，得到了相似的結(jié)果。一個尚存的問題是，如何在解決超過即時浸酸適期的同時解決發(fā)育進(jìn)程差異偏大的蠶種，這是目前還沒有成功報道問題。

我們的解決方案核心技術(shù)要點(diǎn)如下:第一在蠶種送達(dá)冷庫后及時入庫冷藏，盡量縮短常溫保護(hù)時間，通常是上午10時左右進(jìn)外庫，用10～13℃保護(hù)2小時，再進(jìn)內(nèi)庫用4～5℃冷藏;第二是盡量縮短在冷庫內(nèi)的冷藏時間，經(jīng)檢驗(yàn)合格的蠶種按制種先后次序安排浸酸，以冷藏抑制不超過7天為宜;第三是浸酸前促使蠶種盡量充分散冷又不致發(fā)育太快，出庫時先在外庫放2小時，再出庫在常溫中保護(hù)不少于2小時;第四是對不同發(fā)育階段的蠶種給予不同的浸酸刺激(浸酸標(biāo)準(zhǔn)見表1)，以適應(yīng)不同發(fā)育階段蠶種對鹽酸的耐受力，既要防止發(fā)生浸酸無效卵，又要避免發(fā)生浸酸死卵。操作上先在浸酸前逐張檢查卵面，按不同卵色分段，用不同標(biāo)準(zhǔn)浸酸處理，浸酸后再以批為單位合并處理。第五是蠶種浸酸后要嚴(yán)格控制保護(hù)溫度，并及時稱量裝盒，進(jìn)庫冷藏，以控制入庫時蠶卵的發(fā)育進(jìn)度。生產(chǎn)上常用的方法是浸酸后用22～24℃保護(hù)20小時左右，蠶卵胚胎發(fā)育至丙1丙+1，于次日上午10-11時入庫，先用10～13℃中間溫度保護(hù)8～10小時，再入庫用3～4℃冷藏，可延長即時浸酸蠶種冷藏抑制的有效期至40～45天，用于早秋蠶期生產(chǎn)。

表1 不同卵色蠶種的即時浸酸處理鹽酸刺激量標(biāo)準(zhǔn)

采用上述處理方法，蠶種的孵化良好。2011和2012年無錫西漳蠶種場生產(chǎn)的以該法處理的46000張夏用種為例，蠶種實(shí)用孵化率穩(wěn)定在97%以上，超過國家標(biāo)準(zhǔn)的要求(圖1)。近2年江蘇省已經(jīng)比較普遍地使用了上述技術(shù)處理方法，并較好地解決了夏期用種的供應(yīng)，主要使用了該法處理蠶種的東臺、海安2縣(市)，農(nóng)村飼養(yǎng)生產(chǎn)成績良好(表2)，表明我們使用的技術(shù)處理的蠶種質(zhì)量穩(wěn)定。事實(shí)上，多年來江蘇省重點(diǎn)蠶區(qū)夏期生產(chǎn)一直有上述技術(shù)使用，農(nóng)村的蠶繭產(chǎn)量一直維持高水平，蠶繭質(zhì)量也很好，能繅制高品位生絲。因此，我們的生產(chǎn)應(yīng)用實(shí)例是一項(xiàng)依據(jù)鹽酸刺激家蠶滯育性卵活化機(jī)理(徐世清，1991c)，集成創(chuàng)新的可靠的即時浸酸種孵化技術(shù)，也充分說明改進(jìn)經(jīng)典的即時浸酸方法，適當(dāng)延長浸酸前后冷藏抑制時間，按卵色變化調(diào)節(jié)鹽酸浸漬時間，適應(yīng)了目前蠶種生產(chǎn)實(shí)際和蠶種質(zhì)量管理要求的變化，在保障蠶種供給、保證蠶種質(zhì)量方面起到了積極的作用。

圖1 非常規(guī)用種的家蠶卵即時浸酸處理后實(shí)用孵化成績

表2 2011～2012年夏蠶農(nóng)村飼養(yǎng)成績調(diào)查

［1］吉村儀成.即時浸酸種的長期保護(hù)法.中國農(nóng)學(xué)—蠶業(yè)，1990，(4):58-59.

［2］施俊香.即時浸酸蠶種浸后冷抑期限的試驗(yàn)初報，北方蠶業(yè)，1999，20(80):18-19.

［3］徐世清，劉建潮，沈小明.產(chǎn)卵后100小時蠶卵的即時浸酸試驗(yàn).江蘇蠶業(yè)，1990，(2):19-25.

［4］徐世清.產(chǎn)卵后4日內(nèi)不同保護(hù)溫度對蠶卵浸酸成績的影響.江蘇蠶業(yè)，1991a，(1):5-9.

［5］徐世清.家(桑)蠶滯育性卵鹽酸刺激活化機(jī)理研究Ⅵ 鹽酸刺激量對蠶卵孵化率的影響.安徽蠶業(yè)，1991b，(3):11-16.

［6］徐世清.鹽酸刺激家蠶滯育性卵活化機(jī)理研究進(jìn)展.江蘇蠶業(yè)，1991c，(3):1-5.

［7］余武昌，李國棟，陸呈宏，張朝華，陽誠.不同保護(hù)時間對家蠶即時浸酸種一日孵化率的影響.廣西蠶業(yè)，2010，47(2):36-38.

［8］朱勇.家蠶即時浸酸種冷藏試驗(yàn)(簡報).蠶學(xué)通訊，1991，(3):29-30.