角果木地上部分的化學(xué)成分研究

霍麗麗，王 慧，吳 軍

（三峽大學(xué) 天然產(chǎn)物研究與利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 宜昌 443002）

角 果 木（Ceriopstagal）為 紅 樹 科（Rhizophoraceae）角果木屬（Ceriops）的常綠植物.本屬有5 個(gè)種，即角果木Ceriopstagal（Perr.）C.B.Robinson、十雄角果木C.decandra（Griff.）Ding Hou、澳洲角果木C.australis（White）Ballment，Smith ＆Stoddart、CeriopszippelianaBlume和CeriopspseudodecandraSheue，Liu，Tsai ＆Yang［1－4］.該屬植物在我國(guó)僅有一個(gè)物種，即角果木.紅樹植物多數(shù)用于消炎解毒，部分具有收斂、止血等作用，可治療燒傷、腹瀉及炎癥等，而角果木中分離鑒定的Dolabrane型二萜類成分具有顯著的抗腫瘤活性［5］.本文對(duì)采自中國(guó)海南角果木的地上部分醇提物乙酸乙酯萃取部位的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，共分離鑒定了7 個(gè)化合物，包括3 個(gè)Dolabrane型二萜（1～3），3個(gè)羽扇豆烷型三萜（4～6）和1個(gè)黃酮類化合物（7）.化合物1～7的結(jié)構(gòu)如圖1所示.

圖1 化合物1～7的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structures of compounds 1～7

1 儀器與材料

Bruker AV－400核磁共振儀；AB API2000液質(zhì)聯(lián)用儀；Waters 600高效液相色譜儀，2996檢測(cè)器，色 譜 柱 為YMC－Pack ODS－5－A 250 mm×10mm i.d.，5μm （半制備柱），YMC－Pack ODS－5－A 250mm×4.5mm i.d.，5μm（分析柱）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海愛朗儀器有限公司）.薄層硅膠和柱層析硅膠（青島海洋化工廠）；柱層析用ODS硅膠（北京金歐亞科技發(fā)展有限公司）；Sephadex LH－20（Amersham Pharmacia Biotech AB 公司）.高效液相色譜所用試劑為色譜純，其余均為分析純.

角果木植物地上部分于2002年采集于海南省三亞市，并經(jīng)暨南大學(xué)藥學(xué)院吳軍教授鑒定.植物標(biāo)本（CT－001）存放于暨南大學(xué)藥學(xué)院海洋藥物研究中心.

2 提取分離

干燥的角果木地上部分14.2kg粉碎后，于室溫下用95%乙醇提取5次.合并提取液，濃縮得到浸膏（1.06kg）.浸膏經(jīng)水懸浮，用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯萃取部位（252.0g）.取乙酸乙酯萃取部位（100.0g），經(jīng)正相硅膠柱色譜分離，氯仿／甲醇系統(tǒng)梯度洗脫（100∶0，50∶1，30∶1，20∶1，10∶1，5∶1，3∶1，1∶1）得到254個(gè)流分.TLC檢測(cè)，合并相似流份38～66（A）、67～122（B）.流份A（0.6g）經(jīng)Sephadex LH－20凝膠柱層析，氯仿／甲醇（1∶1）恒度洗脫得到21 個(gè)流份，根據(jù)TLC檢測(cè)結(jié)果，合并流份A3～A18，并經(jīng)RP－C18硅膠柱層析，丙酮／水系統(tǒng)（50∶50，60∶40，75∶25，90∶10，100∶0）梯度洗脫，得到25個(gè)流份，結(jié)合薄層色譜和HPLC 分析結(jié)果，合并流份6～7（Fr.1.1）和8～12（Fr.1.2），其中Fr.1.1采用高效液相制備色譜（68% MeCN／H2O，YMC－Pack ODS－5－A 250mm ×10mm i.d.，5μm）制備，得到化合物1（12.2mg），F(xiàn)r.1.2經(jīng)高效液相制備色譜 （77% MeCN／H2O，YMC－Pack ODS－5－A 250mm×10mm i.d.，5μm）制備，得到流份Fr.2、Fr.3、Fr.4.Fr.2經(jīng)多次重結(jié)晶（丙酮），得到化合物6（35.0mg），剩余流份再經(jīng)高效液相分析色譜 （76% MeOH／H2O，YMC－Pack ODS－5－A 250mm×4.5mm i.d.，5μm）制備，得到化合物2（1.0 mg）；Fr.3經(jīng)高效液相分析色譜（62%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×4.5mmi.d.，5μm）純化，得到 化 合物4（1.5mg）；Fr.4經(jīng)高效液相分析色譜（64%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×4.5mmi.d.，5μm）純化，得到化合物5（19.0mg）.B部分經(jīng)SephadexLH－20凝膠柱層析、氯仿／甲醇（1∶1）恒度洗脫得到27個(gè)流份，根據(jù)TLC檢測(cè)結(jié)果，合并流份3～22，并經(jīng)RP－C18硅膠柱層析，丙酮／水系統(tǒng)（50∶50，60∶40，75∶25，90∶10，100∶0）梯度洗脫，得到54個(gè)流份.根據(jù)薄層色譜和HPLC分析結(jié)果，合并流份3～7（Fr.2.2）.Fr.2.2經(jīng)高效液相制備色譜（34%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×10mmi.d.，5μm）制備，得到4個(gè)流份（Fr.3.2、Fr.3.3、Fr.3.4、Fr.3.5）.Fr.3.4經(jīng)過(guò)高效液相制備色譜（27%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×10mmi.d.，5μm）制備，得到化合物3（1.0mg）；Fr.3.2經(jīng)高效液相制備色譜（29%MeCN／H2O，YMCPackODS－5－A250mm×10mmi.d.，5μm；26%MeCN／H2O，YMC－PackODS－5－A250mm×4.5mmi.d.，5μm）制備，得到化合物7（2.0mg）.

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色固體，ESI－MS（m／z）：339.9［M＋Na］＋，655.3［2M＋Na］＋，631.4［2MH］－.1H NMR（400MHz，CDCl3）δ：0.74（3H，s，H3－20），1.07（3H，s，H3－17），1.21（3H，s，H3－19），2.22（1H，d，J＝6.8Hz，H－10），3.09（1H，d，J＝6.0Hz，H－18b），3.13（1H，d，J＝6.0Hz，H－18a），4.87（1H，d，J＝10.8Hz，H－16b），4.92（1H，d，J＝17.6 Hz，H－16a），5.79（1H，dd，J＝17.6，10.8Hz，H－15），6.31（1H，d，J＝6.8 Hz，H－1）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：192.3 （C－3），150.8 （C－15），147.6（C－2），119.3（C－1），109.2（C－16），61.5（C－4），55.9（C－18），55.1（C－10），40.4（C－8），39.6（C－14），39.5（C－9），37.3（C－5），36.5（C－13），35.0（C－11），32.4（C－6），31.9（C－12），29.6（C－19），27.5（C－7），23.0（C－17），13.3（C－20）.以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)［6］對(duì)照基本一致，故鑒定化合物1為tagalsin B.

化合物2：無(wú)色油狀，分子式為C20H28O3..1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：0.60（3H，s，H3－20），1.01（3H，s，H3－17），1.24（3H，s，H3－19），1.87（3H，s，H3－18），4.84（1H，d，J＝10.8 Hz，H－16b），4.90（1H，d，J＝17.6 Hz，H－16a），5.78（1H，dd，J＝17.6，10.8 Hz，H－15）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：193.1（C－2），150.9（C－15），144.5（C－3），135.8（C－4），108.9（C－16），54.5（C－10），41.6（C－8），39.0（C－5），38.8（C－14），38.1（C－9），38.0（C－6），36.2（C－13），34.2（C－11），33.2（C－1），31.7（C－12），31.6 （C－19），26.7 （C－7），23.1 （C－17），13.7（C－20），11.6（C－18）.以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù) 據(jù)［6］對(duì)照基本一致，故鑒定化合物2為tagalsinG.

化合物3：無(wú)色透明的針狀晶體，ESI－MS（m／z）：571.3［2M＋Na］＋，273.1［M－H］－，547.5［2M－H］－.1H NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.71（3H，s，H3－20），1.10 （3H，s，H3－19），1.30（3H，s，H3－17），5.33 （1H，s，H－18b），6.15（1H，s，H－18a），6.28（1H，d，J＝10.4 Hz，H－2），6.96（1H，dd，J＝10.4，6.0Hz，H－1）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：189.0（C－3），153.3 （C－1），149.8 （C－4），130.6 （C－2），117.6（C－18），71.3（C－13），57.6（C－10），44.2（C－8），43.4（C－14），40.7（C－5），40.0（C－9），37.6（C－11），36.5（C－6），35.7（C－12），33.6（C－19），26.9（C－17），25.5（C－7），12.5（C－20）.以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)［7］對(duì)照基本一致，故鑒定化合物3為tagalsin Q.

化合物4：無(wú)色針狀晶體（甲醇），ESI－MS（m／z）：441.6［M－H］－，477.6［M＋Cl］－，883.8［2M－H］－.1H NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.83（3H，s，H3－24），0.84 （3H，s，H3－25），0.94（3H，s，H3－23），1.00 （3H，s，H3－27），1.02（3H，s，H3－26），1.68 （3H，s，H3－20），3.33（1H，d，J＝10.8 Hz，H－28b），3.39（1H，br s，H－3），3.79（1H，d，J＝10.8Hz，H－28a），4.58（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29b），4.68（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29a）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：150.7 （C－20），109.8 （C－29），71.4（C－3），60.7（C－28），50.3（C－5），49.1（C－9），48.9（C－18），47.9（C－19），46.7（C－14），42.9（C－4），41.2（C－10），37.7（C－8），37.4（C－13），34.2（C－1），34.1（C－22），33.4（C－2），29.9（C－7），29.3 （C－16），28.4 （C－23），27.1 （C－21），25.5（C－15），25.3（C－12），22.3（C－30），20.8（C－11），19.2（C－25），18.4（C－6），16.1（C－26），16.1（C－27），15.0（C－24）.以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)［8］對(duì) 照 基 本 一 致，故 鑒 定 化 合 物4 為3β－lup－20（29）－ene－3，28－diol.

化合物5：白色粉末，ESI－MS（m／z）：463.3［M＋Na］＋，439.8［M－H］－，475.7［M＋Cl］－，879.8［2M－H］－.1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：0.93（3H，s，H3－24），0.99（3H，s，H3－25），1.03（3H，s，H3－23），1.06 （3H，s，H3－26），1.07（3H，s，H3－27），1.68 （3H，s，H3－30），3.34（1H，d，J＝10.8 Hz，H－28b），3.79（1H，d，J＝10.8 Hz，H－28a），4.59（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29b），4.68（1H，d，J＝2.0Hz，H－29a）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：218.2（C－3），150.5（C－20），110.0（C－29），60.7（C－28），55.1（C－17），49.9（C－5），48.8（C－9），47.9（C－18，19），47.5（C－14），42.9（C－4），41.0（C－8），39.7（C－1），37.6（C－13），37.0（C－10），34.3（C－22），34.1（C－2），33.7（C－7），29.9（C－21），29.3（C－16），27.2（C－15），26.8（C－23），25.4（C－12），21.5（C－11），21.2（C－30），19.8（C－6），19.2（C－25），16.1（C－26），15.9（C－27），14.8（C－24）.以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)［8］對(duì)照基本一致，故鑒定化合物5為羽扇－20（29）－烯－28－醇－3－酮.

化合物6：無(wú)色針狀晶體（甲醇），ESI－MS（m／z）：479.3［M＋Na］＋，455.6［M－H］－，911.8［2M－H］－.1H NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.82（3H，s，H3－24），0.84 （3H，s，H3－25），0.94（3H，s，H3－23），0.94 （3H，s，H3－26），0.99（3H，s，H3－27），1.69 （3H，s，H3－30），3.01（1H，m，H－19），3.39（1H，br s，H－3），4.61（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29b），4.74（1H，d，J＝2.0 Hz，H－29a）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：180.4（C－28），150.6（C－20），109.9（C－29），56.5（C－17），50.5（C－5），49.4（C－9），49.2（C－18），47.1（C－19），42.7（C－14），41.1（C－4），38.5（C－13），37.7（C－8），37.5（C－10），37.2（C－1），34.4（C－22），33.4（C－2），32.3（C－7），30.7 （C－16），29.8 （C－21），28.4 （C－23），25.6（C－15），25.6（C－12），22.3（C－30），20.9（C－11），19.5（C－25），18.4（C－6），16.2（C－26），16.1（C－27），14.9（C－24）.以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)［8］對(duì)照基本一致，故鑒定化合物6 為3α－h(huán)ydroxy－lup－20（29）－ene－28－oic acid.

化合物7：無(wú)色針狀晶體（甲醇），［α］25D＝－49（c0.2，MeOH）.ESI－MS（m／z）：543.2［2MH］－.1H NMR（400 MHz，Acetone－d6）δ：2.73（1H，dd，J＝17.1，3.0 Hz，H－3e），3.19（1H，dd，J＝17.1，12.9Hz，H－3a），5.46（1H，dd，J＝12.9，3.0 Hz，H－2），5.96（1H，d，J＝2.0 Hz，H－6），5.97 （1H，d，J＝2.0 Hz，H－8），6.90（2H，d，J＝8.5 Hz，H－3′，5′），7.40（2H，d，J＝8.5 Hz，H－2′，6′）.13C NMR（100 MHz，Acetone－d6）δ：197.5（C－4），167.3（C－7），165.5（C－5），165.2 （C－9），158.7 （C－4′），130.9 （C－1′），129.2（C－2′，6′），116.3（C－5′），116.2（C－3′），103.3 （C－10），96.9 （C－6），95.9 （C－8），80.1（C－2），43.7（C－3）.以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)［9］對(duì)照基本一致，故鑒定化合物7為（S）－柚皮素.

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)角果木地上部分醇提物的乙酸乙酯萃取部位進(jìn)行了系統(tǒng)分離，共分離得到了7個(gè)單體化合物，并通過(guò)理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜技術(shù)鑒定了其結(jié)構(gòu)，包括3 個(gè)Dolabrane 型二萜：tagalsin B，tagalsin G 和tagalsin Q；3個(gè)羽扇豆烷型三萜：3βlup－20（29）－ene－3，28－diol，28－h(huán)ydroxylup－20（29）－ene－3－one，3α－h(huán)ydroxy－lup－20 （29）－ene－28－oic acid；1個(gè)黃酮類化合物：（S）－柚皮素，該化合物為首次從該屬植物中分離得到.以上研究結(jié)果進(jìn)一步闡明了角果木的化學(xué)成分，為其化學(xué)成分及相關(guān)生物活性的研究奠定了基礎(chǔ).

［1］Wu J，Xiao Q，Xu J，et al.Natural products from true man－grove flora：source，chemistry and bioactivities［J］.Natural Product Reports，2008，25：955－981.

［2］Wang H，Li M Y，Wu J.Chemical constituents and some biological activities of plants from the genus Ceriops ［J］.Chemistry ＆Biodiversity，2012，9：1－11.

［3］Sheue C R，Liu H Y，Tsai C C，et al.On the morphology and molecular basis of segregation of Ceriops zippeliana and C.decandra （Rhizophoraceae）from Asia ［J］.Blumea，2009，54：220－227.

［4］Sheue C R，Liu H Y，Tsai C C，et al.Comparison of Ceriops pseudodecandra sp.nov.（Rhizophoraceae），a new mangrove species in Australasia，with related species［J］.Botanical Studies，2010，51：237－248.

［5］林文翰，陳英玉，顧 佳，等.Tagalsinc及其同系物在制備抗腫瘤藥物中的作用［P］.CN101077345，2006.

［6］Zhang Y，Deng Z W，Gao T X，et al.Tagalsins A－H，dolabrane－type diterpenes from the mangrove plant，Ceriops tagal［J］.Phytochemistry，2005，66（12）：1465－1471.

［7］Hu W M，Li M Y，Li J，et al.Dolabranes from the Chinese mangrove，Ceriops tagal［J］.Journal of Natural Product，2010，73：1701－1705.

［8］張 炎，鄧志威，高天翔，等.中國(guó)紅樹植物角果木的化學(xué)成分［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2005，40（10）：935－939.

［9］吳 威，王春枝，李 夏，等.珍珠菜抗腫瘤有效部位化學(xué)成分研究［J］.中草藥，2011，42（1）：38－42.