不同廠家?jiàn)W美拉唑腸溶膠囊釋放曲線評(píng)價(jià)

王震紅，楊永剛，薛 嬌，王新意

奧美拉唑是一種質(zhì)子泵抑制劑，口服后在十二指腸吸收，選擇性地聚集在胃壁細(xì)胞的酸性環(huán)境中，通過(guò)特異性地抑制胃壁細(xì)胞的H+-K+-ATP酶，減少胃酸分泌，促進(jìn)潰瘍愈合，作用持久。釋放度是評(píng)價(jià)一種藥物制劑不同劑型、不同生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品、不同批次間質(zhì)量的重要數(shù)據(jù)。體外釋放度在某種程度上與體內(nèi)生物利用度呈現(xiàn)一定的相關(guān)性，從體外釋放度數(shù)據(jù)可估計(jì)其藥動(dòng)學(xué)和生物利用度的特性。本文通過(guò)對(duì)52個(gè)奧美拉唑腸溶膠囊生產(chǎn)企業(yè)69批次樣品進(jìn)行批內(nèi)釋放度考察，對(duì)5家生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行批間釋放度考察，用以評(píng)價(jià)不同生產(chǎn)企業(yè)制劑工藝的成熟性和穩(wěn)定程度。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 美國(guó)Agilent 1200高效液相色譜儀;RCZ-8B藥物溶出度測(cè)定儀(天大天發(fā)科技有限公司)。

1.2 試藥 奧美拉唑?qū)φ掌?中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào):100367-200702)，奧美拉唑腸溶膠囊(來(lái)源于 52家生產(chǎn)企業(yè)，總計(jì) 300批，規(guī)格:20 mg)，乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 色譜條件與方法

2.1 色譜條件 色譜柱:Agela C8(200 mm×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:0.01 mol/L 磷酸氫二鈉溶液(用磷酸調(diào)pH值至7.6)-乙腈(75∶25);檢測(cè)波長(zhǎng):302 nm;柱溫:室溫;進(jìn)樣量:20 μL;流速:1.0 mL/min。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密量取奧美拉唑?qū)φ掌?0 mg，加乙醇10 mL溶解后，用混合釋放介質(zhì)［氯化鈉的鹽酸溶液-0.235 mol/L磷酸氫二鈉溶液(5∶4)］定量稀釋制成每1 mL中約含20 μg的溶液，精密量取5 mL，加0.25 mol/L氫氧化鈉溶液1 mL，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 采用漿法，以氯化鈉的鹽酸溶液500 mL為溶劑，轉(zhuǎn)速為100 r/min，經(jīng)2 h，在操作容器中加預(yù)熱至37℃的0.235 mol/L磷酸氫二鈉溶液 400 mL，分別于 5、10、20、30、45、60 min取溶液濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 mL，加0.25 mol/L氫氧化鈉溶液1 mL，搖勻，作為供試品溶液。

3 釋放度評(píng)價(jià)

3.1 批內(nèi)均一性評(píng)價(jià)

3.1.1 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 以每個(gè)生產(chǎn)企業(yè)一個(gè)批號(hào)一次試驗(yàn)6片在各點(diǎn)釋放量的精密度為指標(biāo)，比較批內(nèi)均一性。第1個(gè)取樣點(diǎn)釋放量的RSD應(yīng)在20%以?xún)?nèi)，其他各取樣點(diǎn)釋放量的RSD應(yīng)在10%以?xún)?nèi)。

3.1.2 考察樣品52家生產(chǎn)企業(yè)各1批樣品。

3.1.3 結(jié)果 20批樣品中符合“3.1.1”項(xiàng)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)占總數(shù)的38.5%，32批樣品不符合“3.1.1”項(xiàng)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)占總數(shù)的61.5%。代表圖譜見(jiàn)圖1、圖2。

圖1 批內(nèi)均一性標(biāo)準(zhǔn)曲線(符合評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn))

圖2 批內(nèi)均一性標(biāo)準(zhǔn)曲線(不符合評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn))

3.1.4 結(jié)論 大部分生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品批內(nèi)均一性較差，主要體現(xiàn)在釋放曲線前兩點(diǎn)重復(fù)性差，RSD較大。通過(guò)觀察外觀性狀，發(fā)現(xiàn)腸溶小丸大小的均勻程度會(huì)影響批內(nèi)均一性。如果腸溶小丸大小差異較大，比表面積呈幾何級(jí)數(shù)增大，釋放速度差異也會(huì)增大，直接影響批內(nèi)均一性。

3.2 批間均一性評(píng)價(jià)

3.2.1 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 選取5個(gè)生產(chǎn)企業(yè)各3～5批樣品進(jìn)行試驗(yàn)。用相似等效限法分析同一企業(yè)的批間重現(xiàn)性。以同一企業(yè)多批產(chǎn)品同一時(shí)間點(diǎn)釋放量的平均值為釋放限度值(Q)，概率水平(δ)取5%，按下式分別計(jì)算UT(上限)與LT(下限)。如果該企業(yè)多批產(chǎn)品釋放量測(cè)定結(jié)果均在LT～UT之間，則認(rèn)為受試制劑釋放均一性良好。

3.2.2 考察樣品 根據(jù)單批次考察結(jié)果，選取抽樣批次較多、工藝具有代表性的5家企業(yè)3～5批樣品。

3.2.3 結(jié)果 5家生產(chǎn)企業(yè)中3家生產(chǎn)企業(yè)達(dá)到“3.2.1”項(xiàng)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，2家生產(chǎn)企業(yè)批間均一性不符合評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，見(jiàn)表1。

表1 奧美拉唑腸溶膠囊釋放度批間均一性考察結(jié)果

3.2.4 結(jié)論 3家生產(chǎn)企業(yè)符合評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，說(shuō)明其生產(chǎn)工藝控制相對(duì)較好;2家生產(chǎn)企業(yè)批間均一性不符合“3.2.1”項(xiàng)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，其處方及生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性有待進(jìn)一步考察。其中C生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)工藝為直接購(gòu)買(mǎi)B生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的奧美拉唑腸溶小丸進(jìn)行分裝。但批號(hào)為 090102、090201、081101，與批號(hào)為081002、080408的釋放曲線明顯不同，初步認(rèn)為該企業(yè)購(gòu)入的腸溶小丸并非同一來(lái)源。不同來(lái)源的小丸，因其質(zhì)量不同，可能導(dǎo)致成品釋放曲線的不同，即生物利用度的不同。因此，在提高奧美拉唑成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的同時(shí)，應(yīng)提高小丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3.3 釋放曲線相似性比較 將考察樣品的平均釋放率與參比制劑的平均釋放率進(jìn)行比較，以評(píng)價(jià)釋放曲線相似性。

3.3.1 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 評(píng)價(jià)釋放曲線相似性目前多采用f2因子法［1］。該方法能夠較客觀地對(duì)相似性給出結(jié)論。但該方法對(duì)參比制劑與受試制劑均有一定的限度，如:參比制劑與受試制劑含量應(yīng)一致，含量差異不得超過(guò)5%;參比制劑與受試制劑前4個(gè)時(shí)間點(diǎn)組內(nèi)釋放量RSD小于20%，最后一個(gè)時(shí)間點(diǎn)組內(nèi)釋放量RSD小于10%，很多企業(yè)產(chǎn)品因上述限制無(wú)法進(jìn)行評(píng)價(jià)。同時(shí)該方法要求每個(gè)制劑均要對(duì)12個(gè)單劑的釋放情況進(jìn)行測(cè)定。奧美拉唑腸溶膠囊釋放度測(cè)定全過(guò)程需要3.5 h以上(2 h酸液，1 h緩沖液釋放，約0.5 h后處理)，如按f2因子法對(duì)52個(gè)膠囊劑生產(chǎn)企業(yè)均測(cè)定12個(gè)單劑的釋放情況，工作量過(guò)大，無(wú)法在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成。因此，參照f(shuō)2因子法，對(duì)每批產(chǎn)品測(cè)定6個(gè)單劑的釋放情況，同時(shí)，暫不考慮受試制劑與參比制劑含量的差異(參比制劑與受試制劑含量最大未超過(guò)10%)，模擬f2因子法進(jìn)行釋放過(guò)程比較。按下列公式計(jì)算類(lèi)f2值。類(lèi)f2值≥50，認(rèn)為受試制劑與參比制劑釋放過(guò)程一致。參比制劑選擇原研單位阿斯利康制藥有限公司生產(chǎn)的“洛賽克”。

參比制劑與受試制劑釋放曲線應(yīng)符合以下條件:參比制劑與受試制劑前4個(gè)時(shí)間點(diǎn)組內(nèi)釋放值RSD小于20%，最后一個(gè)時(shí)間點(diǎn)組內(nèi)釋放值RSD小于10%。

3.3.2 考察樣品 52個(gè)膠囊劑生產(chǎn)企業(yè)各選一批次樣品與參比制劑進(jìn)行比較。

3.3.3 結(jié)果 共22批樣品類(lèi)f2值大于50，可認(rèn)為與參比制劑釋放過(guò)程一致，占總數(shù)的42.3%。20批樣品RSD符合要求，其中類(lèi)f2值大于50的9批，占RSD符合要求總數(shù)的45.0%。

3.3.4 結(jié)論 在RSD符合要求的樣品中，有55.0%的樣品與參比制劑釋放過(guò)程不相似。經(jīng)與參比制劑比較發(fā)現(xiàn)，幾乎所有產(chǎn)品在測(cè)定時(shí)間內(nèi)均能達(dá)到完全釋放。而類(lèi)f2值低的主要原因是樣品釋放速度較快，其中大部分樣品t80≤20 min，即在20 min內(nèi)釋放量已經(jīng)超過(guò)80%，尤其是類(lèi)f2值最低的3家生產(chǎn)企業(yè)，t80≤10 min。而參比制劑的t80=30 min，即30 min時(shí)釋放量達(dá)到80%，可見(jiàn)樣品釋放速度直接影響與參比制劑釋放過(guò)程的相似性。

4 討論

4.1 釋放曲線均一性、相似度 多數(shù)企業(yè)樣品釋放曲線批內(nèi)均一性較差，其中2家生產(chǎn)企業(yè)的批間重現(xiàn)性亦不符合要求，其他批內(nèi)均一性較好的生產(chǎn)企業(yè)，只有半數(shù)釋放曲線與原研制劑的釋放曲線相似。從工藝角度分析，腸溶小丸制備工藝復(fù)雜，小丸大小、均勻程度、膠囊質(zhì)量均會(huì)影響釋放曲線。

4.2 膠囊殼的影響 膠囊殼對(duì)產(chǎn)品的釋放曲線有一定的影響。分析其原因，雖然膠囊殼大部分在氯化鈉的鹽酸溶液中已經(jīng)溶解，但仍有部分未完全溶解的囊殼包裹或黏附在小丸上，影響奧美拉唑的釋放。

4.3 釋放度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 從國(guó)內(nèi)奧美拉唑腸溶膠囊現(xiàn)有生產(chǎn)水平看，僅從一個(gè)時(shí)間點(diǎn)、一種釋放介質(zhì)、一個(gè)限度值已經(jīng)不能科學(xué)地控制產(chǎn)品的質(zhì)量，應(yīng)建立嚴(yán)格的釋放度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，從而促進(jìn)生產(chǎn)企業(yè)對(duì)工藝、處方和原/輔料來(lái)源進(jìn)行深入研究，同時(shí)亦可避免低水平仿制藥的申報(bào)，還可減少人為因素和主觀因素對(duì)生物等效性試驗(yàn)結(jié)果的影響;上市后的產(chǎn)品可采用集中抽驗(yàn)進(jìn)行釋放曲線評(píng)價(jià)，以促進(jìn)生產(chǎn)企業(yè)把好質(zhì)量關(guān)，嚴(yán)格規(guī)范地進(jìn)行生產(chǎn)，保證國(guó)內(nèi)產(chǎn)品與原研產(chǎn)品質(zhì)量的一致性和等效性。

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［1］國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.關(guān)于印發(fā)藥品評(píng)價(jià)抽驗(yàn)質(zhì)量分析指導(dǎo)原則的通知［Z］.食藥監(jiān)辦稽［2009］30號(hào)，2009.