對(duì)乙肝“小三陽(yáng)”前S1灰區(qū)結(jié)果分析

農(nóng)榮欣

(平南縣第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 平南537307)

乙型肝炎病毒(HBV)為嗜肝DNA病毒，其外膜蛋白包括S、前S1、前S2三種成分。前S1蛋白主要存在于Dane顆粒及管狀顆粒上，具有較高免疫原性。前S1蛋白在病毒感染、裝配、復(fù)制和機(jī)體免疫應(yīng)答方面起著重要作用。因此，國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者對(duì)前S1蛋白的研究都比較深入，但有關(guān)前S1抗原研究的相關(guān)報(bào)道主要偏重于HBeAg與HBVDNA關(guān)聯(lián)方面，而對(duì)乙肝“小三陽(yáng)”前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)作為研究對(duì)象的報(bào)道甚少。隨著對(duì)HBV檢測(cè)、預(yù)防、治療措施的發(fā)展和應(yīng)用，HBV感染傳播方式即已發(fā)生了根本的改變。HBeAb陽(yáng)性以往被認(rèn)為是機(jī)體對(duì)乙肝病毒感染具有保護(hù)和預(yù)后良好的征象，但在現(xiàn)實(shí)的檢測(cè)中，我們發(fā)現(xiàn)HBeAb陽(yáng)性的部分患者仍可檢測(cè)出HBV-DNA和HBVPreS1陽(yáng)性，說(shuō)明這一部分病人仍有病毒復(fù)制并具有傳染性。目前HBeAg陰性的乙肝患者正在不斷遞增，并隨著對(duì)前S1抗原在乙肝發(fā)病機(jī)制，病毒感染與復(fù)制等方面研究深入，發(fā)現(xiàn)還有一部分這樣的病人仍存在病毒復(fù)制，本文對(duì)192例乙肝“小三陽(yáng)”前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)標(biāo)本作為對(duì)象，研究分析前S1抗原顯色深淺與其標(biāo)本的HBV-DNA拷貝/ml量的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 收集本實(shí)驗(yàn)室于2007年10月至2009年3月間，在我院就診的乙肝“小三陽(yáng)”(經(jīng)兩對(duì)半+前S1抗原檢驗(yàn))前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)標(biāo)本192例，其中男性106例，女性86例，年齡8~64歲。留取清晨空腹時(shí)靜脈血3.5 ml，分離血清，-20℃凍存待檢。

1.2 試劑 HBV-M試劑盒由英華新科(廈門(mén))科技有限公司提供，前S1抗原試劑盒由上海阿爾法生物技術(shù)有限公司提供，HBV-DNA熒光定量分析試劑盒由深圳達(dá)爾安生物工程有限公司提供。

1.3 儀器 深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司RT-2100C酶標(biāo)儀，新波生物Egate2310洗板機(jī),Line Gene熒光定量分析儀。

1.4 方法

1.4.1 所有標(biāo)本均經(jīng)ELISA方法進(jìn)行HBV-M檢測(cè)，質(zhì)控品試劑盒自帶,嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。結(jié)果判定：ELISA方法以標(biāo)本吸光度(A)值與臨界A值的比值 (S/CO)≥1.00為陽(yáng)性，HBeAb與HB-cAb測(cè)定則相反，以≤1.00為陽(yáng)性。

通過(guò)大數(shù)據(jù)智能分析出的數(shù)據(jù)，可以為企業(yè)設(shè)計(jì)人員提供用戶(hù)所需要的設(shè)計(jì)元素，例如分析用戶(hù)群體的年齡、消費(fèi)能力、消費(fèi)興趣等，推測(cè)用戶(hù)最需求的金融服務(wù)[8]。為設(shè)計(jì)者提供新的設(shè)計(jì)思路，使設(shè)計(jì)出的產(chǎn)品更具有針對(duì)性，更加滿(mǎn)足用戶(hù)的使用需求，甚至目前很多金融產(chǎn)品可以實(shí)現(xiàn)用戶(hù)自行設(shè)計(jì)購(gòu)買(mǎi)方案，十分便捷。靈芝系統(tǒng)就是相對(duì)于普適性的信用評(píng)價(jià)系統(tǒng)，采用更多的數(shù)據(jù)類(lèi)型，對(duì)于特殊類(lèi)型的企業(yè)和個(gè)人進(jìn)行獨(dú)特的數(shù)據(jù)分析，獲得更加有針對(duì)性的數(shù)據(jù)和結(jié)果，不但能夠有效地進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)防控，也能以此為根據(jù)設(shè)計(jì)更加符合其消費(fèi)傾向的金融產(chǎn)品，以獲得更加廣闊的市場(chǎng)。

1.4.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料數(shù)據(jù)間比較用χ2檢驗(yàn)。

1.4.3 乙肝前S1抗原檢測(cè)采用雙抗體夾心ELISA方法，質(zhì)控品試劑盒自帶,其試驗(yàn)操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)執(zhí)行，設(shè)陰性、陽(yáng)性和空白對(duì)照，用酶標(biāo)儀(450/630nm)讀取各孔OD值，以O(shè)D值>0.105為陽(yáng)性，臨界值(CUTOFF)=2.1×陰性對(duì)照平均O.D值,計(jì)算值小于臨界值為陰性。

(2)從單一參數(shù)探測(cè)功能向多參數(shù)探測(cè)功能方向發(fā)展。目前具有多種單一探測(cè)功能的激光雷達(dá)技術(shù)，利用理論模型將多種技術(shù)進(jìn)行有機(jī)融合，是降低探測(cè)成本和提高探測(cè)效率的有效途徑。

2 結(jié)果

本研究提示乙肝“小三陽(yáng)”前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)標(biāo)本中，仍有高達(dá)92.2%(177/192)標(biāo)本HBV-DNA載量均>103拷貝/ml，且隨著HBV-DNA含量越高其前S1抗原陽(yáng)性率基本呈上升趨勢(shì)。這種情況可能是機(jī)體免疫清除不完全和乙肝病毒株變異所致，且多易發(fā)生在慢性肝炎。

1.4.2 HBV-DNA的檢測(cè) 將預(yù)備好的DNA模板和定量的陽(yáng)性模板同時(shí)在Line Gene熒光定量分析儀上進(jìn)行DNA擴(kuò)增和分析。擴(kuò)增參數(shù)：93℃預(yù)變120s，再按93℃ 30s,55℃ 60s擴(kuò)增30個(gè)循環(huán)，儀器自動(dòng)計(jì)算樣品中的DNA拷貝數(shù)。

表1 血清HBV-DNA水平與前S1抗原顯色之間的關(guān)系

3 討論

血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果認(rèn)為前S1抗原與HBV-DNA陽(yáng)性率高度吻合，尤其部分HBeAg陰性的乙肝患者前S1抗原與HBV-DNA陽(yáng)性率亦無(wú)顯著差異，但在前S1抗原處于灰區(qū)的標(biāo)本要做進(jìn)一步確認(rèn)試驗(yàn)。本研究對(duì)192例到院就診的乙肝“小三陽(yáng)”(經(jīng)兩對(duì)半+前S1抗原檢驗(yàn))前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)標(biāo)本進(jìn)行HBV-DNA檢測(cè)表明：143例HBVDNA>103拷貝/ml，49 例 HBV-DNA<103拷貝/ml。復(fù)查前S1抗原結(jié)果，有31例為陽(yáng)性，146例仍處在灰區(qū)，另有15例前S1抗原為陰性并且其HBVDNA載量<103拷貝/ml，陰性率7.8%(15/192)，其余177例標(biāo)本HBV-DNA載量均>103拷貝/ml為陽(yáng)性病例，陽(yáng)性率高達(dá)92.2%(177/192)，HBV-DNA組與HBV-PreS1組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。前S1抗原顯色深淺與其標(biāo)本的HBV-DNA拷貝/ml量相關(guān)，見(jiàn)表1。

干擾素α(IFNα)以及核苷類(lèi)似物拉米夫定等抗HBV病毒藥物應(yīng)用，在一定程度上控制了HBV感染的進(jìn)一步流行，同時(shí)，也改變了HBV感染的分布規(guī)律和游行模式，有研究表明，目前流行的HBV病毒株特點(diǎn)與此之前的病毒種群相比較，已經(jīng)發(fā)生了根本的改變，并將繼續(xù)發(fā)生變化。因此，從現(xiàn)在開(kāi)始就必須對(duì)HBV病毒變異給予高度重視。

從前文可以看出，傳統(tǒng)的投入導(dǎo)向規(guī)模報(bào)酬不變DEA模型雖然可以對(duì)決策單元的效率進(jìn)行測(cè)算，但是并不能對(duì)所有單元按照效率值大小進(jìn)行測(cè)算，原因就是在效率測(cè)算結(jié)果中出現(xiàn)了20個(gè)DEA有效的決策單元，這些決策單元的效率值均為1，雖然其他的9個(gè)決策單元可以按效率值的大小進(jìn)行排序，但是對(duì)于這20個(gè)效率值為1的決策單元不能進(jìn)行效率排序。而政府通常是根據(jù)機(jī)構(gòu)排名對(duì)其進(jìn)行補(bǔ)貼或獎(jiǎng)勵(lì)，養(yǎng)老機(jī)構(gòu)的管理者也更加關(guān)注其他養(yǎng)老機(jī)構(gòu)的排名問(wèn)題，而且通過(guò)排序，管理者可以借鑒排名靠前的機(jī)構(gòu)來(lái)改善其服務(wù)績(jī)效。因此，需要進(jìn)一步對(duì)投入產(chǎn)出指標(biāo)進(jìn)行超效率CCR模型測(cè)算，以便獲取排名，進(jìn)一步確認(rèn)標(biāo)桿企業(yè)。

蘭州石化始終堅(jiān)持“環(huán)保優(yōu)先、安全第一、質(zhì)量至上、以人為本”的理念，強(qiáng)化HSE體系建設(shè)，常年堅(jiān)持開(kāi)展公司、分廠和車(chē)間三級(jí)崗位責(zé)任制大檢查，建立了四級(jí)風(fēng)險(xiǎn)“管控網(wǎng)”，形成了專(zhuān)業(yè)監(jiān)督、專(zhuān)職檢查、干部走動(dòng)式巡檢、值班檢查“四位一體”的監(jiān)督檢查體系，做到了現(xiàn)場(chǎng)作業(yè)風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別管控全過(guò)程、全覆蓋。蘭州石化嚴(yán)格執(zhí)行環(huán)保新標(biāo)準(zhǔn)，推進(jìn)清潔生產(chǎn)、綠色發(fā)展。5年來(lái)，公司重點(diǎn)環(huán)保項(xiàng)目建設(shè)投入達(dá)到20多億元，減排成效顯著。

由于 PreS1-Ag與 HbeAb、HBV-DNA均有良好的相關(guān)性，能反映HBV在體內(nèi)的復(fù)制和傳染狀況。所以對(duì)PreS1-Ag的檢測(cè)有助于對(duì)疾病的動(dòng)態(tài)觀測(cè)，特別是PreS1-Ag處在灰區(qū)的結(jié)果，應(yīng)進(jìn)一步作HBV-DNA載量分析，以免漏診延誤治療。

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