乙型肝炎血清兩對(duì)半檢測(cè)與HB V-DNA濃度的分析

楊 慧

池州市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽池州 247100

乙型肝炎在我國(guó)有較高的感染率，盡管隨著疫苗的推廣，整體人群的感染率都有所下降，但HBV的流行率仍可達(dá)到50.04%[1]。乙型肝炎檢測(cè)的經(jīng)典方法是通過(guò)血清中乙肝標(biāo)志物：表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗體(HBsAb)、乙肝 e 抗原(HBeAg)、乙肝e抗體(HBeAb)和乙肝核心抗體(HBcAb)，也就是“兩對(duì)半”進(jìn)行確診的。目前，HBV-DNA濃度的檢測(cè)與兩對(duì)半檢測(cè)聯(lián)合，在臨床上廣泛應(yīng)用于檢測(cè)乙型肝炎，該研究2012年11月—2013年7月就乙型肝炎患者進(jìn)行血清兩對(duì)半檢測(cè)與HBV-DNA濃度檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行分析，旨在探討這兩種方法聯(lián)合檢測(cè)在臨床上的效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集就診于該院的800例乙型肝炎患者血清，進(jìn)行兩對(duì)半檢測(cè)與HBV-DNA濃度檢測(cè)，對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。其中男473例，女327例，年齡區(qū)間為12～78歲，平均年齡為（43.6±10.1）歲。見(jiàn)表1。

表1 患者分組

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 乙肝血清兩對(duì)半檢測(cè) 乙肝標(biāo)志物：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb選用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)，使用的儀器為上?？迫A生產(chǎn)的KHB-ST-360酶標(biāo)儀，試劑為廈門(mén)新創(chuàng)公司生產(chǎn)。結(jié)果判斷:陽(yáng)性為樣品OD值s/c.o.≥1,陰性為樣品OD值 s/c.o.≤1。

1.2.2 HBV-DNA濃度檢測(cè) 血清中HBV-DNA濃度選用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，使用的儀器Genelight-9800實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀和試劑盒均為廈門(mén)安普利生物工程有限公司生產(chǎn)提供。結(jié)果判斷:陽(yáng)性為≥103 copies/mL,陰性為＜103 copies/mL。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

檢測(cè)結(jié)果采用SPSS15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)來(lái)比較兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性率的差異。計(jì)量資料進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

各組別患者兩對(duì)半檢測(cè)分布和HBV-DNA陽(yáng)性率及平均含量統(tǒng)計(jì)。800例患者中，各組的分布情況為：A組共160例，占20.00%；B組共 396例，占49.50%；C組共 89例，占11.13%；D組共126例，占15.75%；E組共29例，占3.63%。比較發(fā)現(xiàn)A組的HBV-DNA 平均含量（8.04±1.45）copies/mL 明顯高于 B 組(5.37±1.14)copies/mL、C 組 （7.86 ±1.33）copies/mL、D 組 （4.96 ±1.26）copies/mL 及 E 組（0.00±0.00）copies/mL，各組的 HBV-DNA 陽(yáng)性率之間經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表2 5組患者例數(shù)和HBV-DNA陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)

3 討論

乙肝是指由乙型肝炎病毒引起的機(jī)體肝細(xì)胞損傷為主的一系列疾病癥狀。乙型肝炎病毒主要通過(guò)血液傳播，在人群中的傳染率高。隨著病毒疫苗的大力推廣，乙肝的發(fā)生率在國(guó)內(nèi)有所降低。經(jīng)典的檢測(cè)乙肝的指標(biāo)是通過(guò)ELISA檢測(cè)血清中乙型肝炎病毒的 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb。 不同陽(yáng)性指標(biāo)組合代表不同的乙肝病情發(fā)展階段。HBV-DNA濃度檢測(cè)，是通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)患者血清中乙型肝炎病毒的DNA濃度來(lái)反應(yīng)乙肝病情的[2]。

該研究收集了就診于該院的800例乙型肝炎患者血清，進(jìn)行兩對(duì)半檢測(cè)與HBV-DNA濃度檢測(cè)，利用ELISA檢測(cè)乙肝血清兩對(duì)半，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)血清中HBV-DNA濃度，根據(jù)兩對(duì)半的檢測(cè)結(jié)果將患者分為A組、B組、C組、D組及E組。對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。從而探討乙型肝炎患者血清兩對(duì)半檢測(cè)與HBV-DNA濃度的相關(guān)性，及其在臨床中的應(yīng)用價(jià)值。A組即俗稱的“大三陽(yáng)”，一般病毒數(shù)量多、復(fù)制活躍、傳染性強(qiáng)。這與HBV-DNA濃度檢測(cè)結(jié)果[陽(yáng)性率96.25%，平均含量（8.04±1.45）copies/mL]相符。B組即俗稱的“小三陽(yáng)”，相對(duì)A組病毒的數(shù)量少、常規(guī)復(fù)制、傳染性弱。HBV-DNA濃度檢測(cè)結(jié)果 [陽(yáng)性率52.27%，平均含量（5.37±1.14）copies/mL]同樣符合。 A 組與 C 組HBeAg陽(yáng)性時(shí)，HBV-DNA陽(yáng)性率及平均含量都較高，這與文獻(xiàn)報(bào)道的HBeAg陽(yáng)性與HBV-DNA定量具有良好的一致性相符合,也從基因水平上證實(shí)了HBeAg確實(shí)是反映HBV復(fù)制活躍及具有強(qiáng)傳染性的可靠指標(biāo)[3]。結(jié)果中發(fā)現(xiàn)E組血清兩對(duì)半指標(biāo)全部陰性的病例中，有1例的HBV-DNA濃度檢測(cè)為陽(yáng)性，這有可能與病毒感染后在機(jī)體內(nèi)的潛伏期相關(guān)[4]。但病毒具有高度的變異性，因此HBV-DNA濃度檢測(cè)的方法及材料都存在一定的局限性。同時(shí)，HBV-DNA濃度檢測(cè)的成本較高，因此，基層醫(yī)院大部分還是應(yīng)用血清兩對(duì)半檢測(cè)的方法單獨(dú)進(jìn)行乙肝的檢測(cè)[5]。

綜上所述，血清兩對(duì)半檢測(cè)與HBV-DNA濃度檢測(cè)從患者機(jī)體自身免疫應(yīng)答反應(yīng)及病毒在機(jī)體內(nèi)情況兩方面入手，可以綜合反應(yīng)乙肝患者的病情發(fā)展?fàn)顩r，更有利于乙肝的確診。

[1]梁曉峰，陳園生，王曉軍，等.中國(guó)3歲以上人群乙型肝炎血清流行病學(xué)研究[J].中國(guó)流行病學(xué)雜志，2005,26（9）：655-658.

[2]賀巧鳳.HBV-DNA含量與乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物的相關(guān)性研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（3）：353-354.

[3]蔣麗華，曹進(jìn)平，馮嵐.乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物與HBV-DNA定量聯(lián)合檢測(cè)的意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6（19）：1630-1631.

[4]趙富鋒.HBV-DNA定量檢測(cè)與乙肝感染血清標(biāo)志物結(jié)果分析[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2013，17（10）：1228-1229.

[5]彭其才，范建輝，許成芳，等.孕婦乙肝大小三陽(yáng)與血清HBV DNA濃度關(guān)系[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2011,11（1）：91-92.