腦安片治療腦梗塞的有效性和安全性評(píng)價(jià)研究

王 昆 潘 琛 裴明硯

（哈藥集團(tuán)三精制藥股份有限公司·150069）

腦梗死（CI）又稱缺血性腦卒中（CSI），是指局部腦組織因血液循環(huán)障礙、缺血、缺氧而發(fā)生的軟化壞死，主要由于供應(yīng)腦部血液的動(dòng)脈出現(xiàn)粥樣硬化和血栓形成，是管腔狹窄甚至閉塞，導(dǎo)致局灶性急性腦供血不足而發(fā)病；也有因異常物質(zhì)沿血液循環(huán)進(jìn)入腦動(dòng)脈或供應(yīng)腦血液循環(huán)的頸部動(dòng)脈，造成血流阻斷或血流量驟減而產(chǎn)生相應(yīng)支配區(qū)域組織軟化壞死者。由于腦卒中對(duì)老年人是重要的死亡或致殘?jiān)颍谑澜缗c我國人口老齡化趨勢日益加速的情況下，腦卒中的危害性亦必然日益突出，因此腦卒中的防治已成為衛(wèi)生工作中的一項(xiàng)重要課程，越來越引起國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界特別是神經(jīng)科學(xué)界的重視。哈藥集團(tuán)三精制藥股份有限公司研制生產(chǎn)的腦安片（國藥準(zhǔn)字Z19991034）主要成分為人參、川芎、當(dāng)歸、紅花、冰片等，具有活血化瘀，益氣通絡(luò)的功效，應(yīng)用于腦血栓形成急性期，恢復(fù)期氣虛血瘀癥候者，癥見急性起病，半身不遂，口舌歪斜，舌強(qiáng)語蹇，偏身麻木，氣短乏力，口角流涎，手足腫脹，舌暗或有瘀斑，苔薄白等。本文根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局相關(guān)中藥品種保護(hù)法規(guī)要求而進(jìn)行腦安片有效性和安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)研究工作。

1 材料與方法

1.1 藥物

腦安片，批號(hào)為960410，由哈爾濱市漢方藥物研究所提供。本品片重0.5g。含生藥材為2.4g/片。臨床用量為一日二次，每次2 片。

腦安膠囊，批號(hào)：950801，遼源市亞東制藥廠生產(chǎn)。

1.2 動(dòng)物

清潔級(jí)SD 大鼠，雄性65 只，體重（280±20）g，吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。合格證號(hào)：SCXK-（吉）2007-0003。

家兔，雄性16 只，體重2.0～2.5kg，哈爾濱市華宇養(yǎng)殖場提供。合格證號(hào)：SCXK 黑2007003。

1.3 主要試劑與儀器

戊巴比妥鈉（Serva 公司產(chǎn)品），5,-腺苷二磷酸單鈉鹽（ADP.Na）（中國科學(xué)院上海生物化學(xué)研究所上海東風(fēng)生化技術(shù)公司提供）。壓力換能器、電磁流量計(jì)、八道生理記錄儀。

1.4 方法

1.4.1 動(dòng)物急性毒性實(shí)驗(yàn) 取體重18～20g 的小白鼠20 只，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前將小鼠禁食不禁水12 小時(shí)，每只小鼠灌胃給以60%(已達(dá)最大濃度)藥液0.8ml/20g 體重。觀察給藥后7日內(nèi)動(dòng)物毒性反應(yīng)及死亡情況。

1.4.2 抗大白鼠實(shí)驗(yàn)性血栓形成實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)前以2%羥甲基纖維素鈉溶液配制成1%、3%、10%的藥液供試驗(yàn)用。試驗(yàn)選用雄性Wistar 大白鼠，參照Umetsu 等和徐理納等方法，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為五組，空白組，給予2%羥甲基纖維素鈉溶液，陽性對(duì)照組，給予腦安膠囊（300mg/kg），實(shí)驗(yàn)組給予腦安片（30、100 和300mg/kg），連續(xù)灌胃給藥10d，末次給藥1h 后，3%戊巴比妥鈉麻醉，分離右頸部動(dòng)脈及左頸外靜脈，取三段聚乙烯塑料管，其中二段二根內(nèi)徑為1.5mm，長約10cm，中段一根內(nèi)徑為2mm，長約8.5cm，在三段聚乙烯管的中段放入一根長約6.5cm 的4 號(hào)手術(shù)絲線，將肝素生理鹽水溶液充滿聚乙烯管腔內(nèi)，當(dāng)塑料管的一端插入左頸外靜脈后，將管的另一端插入右頸總動(dòng)脈，手術(shù)完成后，立即開放血流。15min 后中段血流，迅速取出絲線稱重，總重量減去線重為血栓濕重，以mg 計(jì)算。

1.4.3 腦安片對(duì)家兔腦血管阻力的影響 選用2～3kg 健康家兔，雄性，3.5%戊巴比妥鈉35mg/kg iv 麻醉，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，鎖骨下動(dòng)脈及椎動(dòng)脈，分離并結(jié)扎內(nèi)乳房動(dòng)脈，頸深動(dòng)脈，肌支，肝素按10mg/kg 抗凝后，作頸總動(dòng)脈插管，連接壓力換能器，分離左側(cè)股動(dòng)脈并插管，另端連接硅緣膠管，經(jīng)恒速蠕動(dòng)泵后，再接玻璃T 形管。管側(cè)壁連接另一壓力換能器測定椎動(dòng)脈壓力，管的另一端接硅膠管及聚乙烯插管，該管經(jīng)鎖骨下動(dòng)脈逆行插至椎動(dòng)脈開口處，開動(dòng)電子橫流泵引股動(dòng)脈血恒速灌注椎動(dòng)脈，最后結(jié)扎鎖骨下動(dòng)脈的近心端即根部，將頸總動(dòng)脈壓力（ABP）和椎動(dòng)脈壓力（VAP）均同步輸入八道生活記錄儀上，觀察比較腦安片對(duì)腦血管阻力和血壓的影響，在保溫（近體溫）條件下，調(diào)橫流泵使腦血管阻力與血壓相近（即調(diào)正進(jìn)入腦血流量接近動(dòng)物自然狀態(tài)），椎動(dòng)脈壓力曲線穩(wěn)定10min 后，通過埋入十二指腸的導(dǎo)尿管給藥，受試藥物與陽性藥物、空白組給藥體積均控制在0.5ml/kg 等體積注入，注速5sec，觀察并記錄給藥后10，20，30，50，60min 時(shí)的變化值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 腦安片安全性評(píng)價(jià)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)14日內(nèi)連續(xù)觀察小鼠無一只死亡，一般狀態(tài)、飲食、排泄物均正常，毛色光澤佳，未見神經(jīng)興奮、抑制等異常反應(yīng)癥狀出現(xiàn)。腦安片對(duì)小鼠灌胃急性毒性試驗(yàn)的最大給藥量為24g/kg，相當(dāng)于人臨床用量的840 倍。

2.2 腦安片對(duì)大鼠在體血栓形成的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腦安片高、中劑量組，腦安膠囊陽對(duì)藥組明顯抑制大鼠在體血栓形成，血栓形成速度和空白組比較明顯減慢，血栓濕重減輕，抑制率分別為47.7%、39.2%和48.6%，與空白組比較有顯著性差異P ﹤0.01。腦安片低劑量組對(duì)血栓形成無影響。結(jié)果見表1。

表1 腦安片對(duì)大鼠血栓形成的影響（±SD）

表1 腦安片對(duì)大鼠血栓形成的影響（±SD）

與空白組比較▲P<0.05 ▲▲P<0.01

組別 劑量（mg/kg） 鼠數(shù)（只）血栓濕重（mg） 抑制率（%）空白 — 10 32.9±8.1 —腦安片 30 10 32.4±5.9 1.5 100 10 20.0±8.2▲ 39.2 300 10 17.2±6.6▲▲ 47.7腦安膠囊 300 10 16.9±9.2▲▲ 48.6

2.3 腦安片對(duì)家兔腦血管阻力的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：腦安片能明顯降低家兔椎動(dòng)脈阻力，增加腦血流量，改善腦部微循環(huán)，與腦安膠囊作用相似。其中腦安片高、中、低劑量組于給藥10 分鐘后可使家兔腦血管阻力分別達(dá)到99±2、89±4、84±5mmHg，與空白組相比有顯著差異P ﹤0.01。 腦安片對(duì)家兔血壓影響的實(shí)驗(yàn)表明，給藥10 分鐘前后，3 個(gè)劑量組家兔的血壓分別99±4、95±6、96±4 和99±3、95±4、97±3，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，給藥20、30、50、60 分鐘后的結(jié)果與給藥前相比之無差異。該實(shí)驗(yàn)表明腦安片對(duì)腦血管有選擇性擴(kuò)張作用，在降低腦血管阻力的同時(shí)，對(duì)外周血壓幾乎沒有影響。結(jié)果見表2、3。

表2 腦安片對(duì)家兔腦血管阻力的影響（±SD）

表2 腦安片對(duì)家兔腦血管阻力的影響（±SD）

與空白組比較▲P<0.05 ▲▲P<0.01

血管阻力（mmHg）組別劑量（mg/kg）動(dòng)物數(shù)（只）給藥前10 20 30 50 60空白 — 10 112±3 103±5 108±4 110±4 113±2 115±3腦安片 1 10 114±4 99±2▲▲108±3▲114±2 114±3 114±4 3 10 110±3 89±4▲▲98±2▲▲109±3 108±5 110±3 10 10 112±2 84±5▲▲91±5▲▲111±3 112±4 112±3腦安膠囊 10 10 111±3 83±3▲▲92±4▲▲97±3▲102±5▲110±2

表3 腦安片對(duì)家兔血壓的影響（±SD）

表3 腦安片對(duì)家兔血壓的影響（±SD）

與空白組比較▲P<0.05 ▲▲P<0.01

藥后血壓（mmHg）10 20 30 50 60空白 10 110±3 111±4 111±3 111±4 110±5 110±2腦安片 1 10 99±4 99±3 98±3 98±5 99±3 97±2 3 10 95±6 95±4 94±2 93±5 94±2 94±5腦安膠囊 10 10 96±4 97±3 97±2 96±4 96±3 96±3組別劑量（mg/kg）動(dòng)物數(shù)（只） 給藥前

3 討論

腦血管疾病的分類，目前尚未統(tǒng)一。有按病程分為急性腦血管病和慢性腦血管疾病，有按病變性質(zhì)分為出血性腦血管疾病和缺血性腦血管疾病，還有按病程進(jìn)展分為暫性腦缺血發(fā)作、可逆性缺血性神經(jīng)功能缺失、進(jìn)展性腦卒中、完全性腦卒中。腦安片中所含冰片具有辛香走竄之性，以開竅醒神為主要作用，其中的異龍腦成分能夠提高血液的脂溶性，血液中的脂溶性越高，藥物更加容易穿透血腦屏障，從而增強(qiáng)了心腦血管藥物的治療作用。此外冰片對(duì)中樞神經(jīng)興奮性有雙向調(diào)節(jié)作用，既能“鎮(zhèn)靜安神”，又有醒腦作用。能縮短戊巴比妥鈉持續(xù)睡眠時(shí)間，還能延長苯巴比妥鈉入睡時(shí)間，興奮中樞神經(jīng)的作用，延長驚厥潛伏期，減少驚厥死亡率，發(fā)揮鎮(zhèn)靜、抗驚厥作用。但有效成分龍腦、異龍腦能顯著延長戊巴比妥引起的小鼠睡眠時(shí)間，與戊巴比妥產(chǎn)生協(xié)同作用，異龍腦的這一作用尤為顯著，這可能與異龍腦的脂溶性較高有關(guān)。芳香開竅藥物影響血腦屏障通透性的研究主要集中于冰片上。冰片作為小分子脂溶性單萜類物質(zhì)，口服后迅速透過血腦屏障，腦內(nèi)濃度高于其他組織，深入研究證實(shí)冰片促血腦屏障開放式生理性開放，與大鼠腦皮質(zhì)微血管內(nèi)皮CAM-1 的表達(dá)無關(guān)，而與內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生NO 量的增多有一定關(guān)系。大量研究還表明冰片具有很好的促透作用，不僅體現(xiàn)在促進(jìn)藥物通過血腦屏障，還體現(xiàn)在透過皮膚與鼻腔、角膜的粘膜系統(tǒng)。通過實(shí)驗(yàn)研究表明，腦安片未見明顯毒性反應(yīng)，具有明顯的抗血栓作用，能顯著降低腦血管阻力，對(duì)腦血管有選擇性擴(kuò)張作用，能夠增加腦血流量，改善腦循環(huán)，與陽性藥物腦安膠囊等劑量比較，作用相似。