均相免疫發(fā)光檢測(cè)法測(cè)定在肺癌患者血清CA125中的應(yīng)用比較

劉佳 王鈞 王燕

廣東省第二人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科 廣東廣州 516898

肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，病死率極高。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2000年我國(guó)城市居肺癌死亡率為42.08/10萬(wàn)人口，并呈逐年增加趨勢(shì)，在許多發(fā)達(dá)國(guó)家及我國(guó)大城市如北京、上海、廣州患病率和病死率均上升為惡性腫瘤的第1位。血清腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)是肺癌診斷和治療觀察的重要指標(biāo)之一。目前采用半定量酶免試劑和進(jìn)口熒光免疫、放免試劑進(jìn)行檢測(cè)，不但需要進(jìn)口，而且在準(zhǔn)確性和敏感性方面還有一定的欠缺，本研究應(yīng)用國(guó)產(chǎn)新型測(cè)定試劑和方法對(duì)臨床Ⅲ～Ⅳ期肺腺癌血清CAl25進(jìn)行測(cè)定并與傳統(tǒng)測(cè)定方法進(jìn)行比較，應(yīng)用該測(cè)定方法對(duì)患者化療前后血清CAl25水平進(jìn)行了觀察，旨在了解該種測(cè)定方法的穩(wěn)定性和和敏感性，并觀察化療對(duì)患者血清CAl25水平的影響。

資料與方法

資料:選擇本院2009年1月～2012年4月住院肺癌患者30例，男19例，女11例;年齡39～76歲，平均59歲;均經(jīng)支氣管鏡或CT引導(dǎo)下經(jīng)皮肺肺活檢病理證實(shí)，均為腺癌Ⅲ～Ⅳ期患者，且無(wú)明顯心臟、肝臟和腎臟等疾病。

化療前2天及化療后1周，清晨空腹抽取外周靜脈血6rnl，離心提取血清備用。

儀器采用美國(guó)雅培公司ACCESS2型全自動(dòng)自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀，分別采用進(jìn)口熒光免疫試劑盒及廣東虹業(yè)抗體科技有限公司生產(chǎn)的脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光檢測(cè)對(duì)患者血清CA125進(jìn)行測(cè)定，并且采用脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光檢測(cè)對(duì)患者化療前后血清CAl25水平的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行對(duì)比。

計(jì)量資料比較:分別應(yīng)用X2檢驗(yàn)和 t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

采用進(jìn)口熒光免疫試劑肺腺癌檢出陽(yáng)性患者21例，陽(yáng)性率為70%，而采用脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光檢試劑盒檢出陽(yáng)性患者為24例，陽(yáng)性率為80%，前者血清CAl25水平為(133.59±53.45)u/ml，后者 CAl25 水平為(128.23 ±42.95)u/ml，兩種方法在肺癌檢出陽(yáng)性率方面差異顯著。在血清CAl25水平上兩種方法無(wú)明顯差異?；熀蠡颊哐錍Al25水平均呈現(xiàn)明顯下降，具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1和表2。

表1 傳統(tǒng)方法與脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光檢測(cè)法檢出率比較

表2 化療前后患者血清cAl25水平變化

討 論

CA125是一種細(xì)胞表面的高分子量黏液樣糖蛋白，1981年由Bast等首先發(fā)現(xiàn)從卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌所獲得上OVCA433表達(dá)的抗原，是一種類似黏蛋白的糖蛋白負(fù)荷物，它存在于卵巢癌細(xì)胞的表面，80%以上的非黏液表皮卵巢癌可表達(dá)這種抗原，是目前臨床上最重要的卵巢癌標(biāo)志物，被廣泛用于卵巢癌及子宮內(nèi)膜異位癥的診斷和治療。近來(lái)研究表明，CAl25濃度水平在肺癌患者與肺部良性疾病患者之間存在顯著性差異，對(duì)協(xié)助肺癌診斷及提示預(yù)后有一定的臨床價(jià)值［1］，CA125作為肺癌的血清學(xué)標(biāo)志物之一具有非常高的敏感性和特異性［2］。周國(guó)勝等測(cè)定45例肺癌患者治療前血清CAl25［3］，結(jié)果腺癌Ⅲ～Ⅳ期患者CAl25水平明顯高于正常水平。CAl25水平隨臨床分期的增加而升高，陽(yáng)性檢出率遞增。因此我們選擇腺癌Ⅲ～Ⅳ期患者，應(yīng)用不同的測(cè)定方法對(duì)其CAl25水平進(jìn)行檢測(cè)，以觀察其敏感性和穩(wěn)定性，并對(duì)化療前后CAl25水平進(jìn)行觀察，以期了解化療對(duì)患者血清CAl25水平的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)應(yīng)用脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光法，對(duì)肺癌的檢測(cè)陽(yáng)性率明顯高于傳統(tǒng)檢測(cè)方法，穩(wěn)定性良好。肺癌患者經(jīng)化療后，患者血清CAl25較化療前明顯降低。說(shuō)明應(yīng)用脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光法測(cè)定CAl25是一種新型穩(wěn)定、敏感的測(cè)定方法。脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光法采用CA～125 N～連接糖鏈抗原制備的單克隆抗體分離純化技術(shù)。此單抗特異性非常高，與其他糖類抗原沒有交叉反應(yīng)。同時(shí)采用補(bǔ)體和抗體反應(yīng)后介導(dǎo)的脂質(zhì)體裂解技術(shù)，進(jìn)一步增加了檢測(cè)的特異性;每個(gè)免疫脂質(zhì)體可以交聯(lián)多個(gè)抗體，并包封有大量的堿性磷酸酶(AP)。當(dāng)脂質(zhì)體破裂，釋放大量的AP，經(jīng)增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光底物的作用導(dǎo)致很強(qiáng)的信號(hào)放大作用。因此具有很高的特異性。此方法操作簡(jiǎn)單、定量準(zhǔn)確。采用脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光法，不用洗去未結(jié)合的免疫脂質(zhì)體，不失為一種臨床檢測(cè)患者血清CAl25水平好方法。Cedrés S，等發(fā)現(xiàn)［4］，CAl25水平在Ⅳ期肺癌患者血清中的變化與病情的惡化程度有關(guān)，因此，動(dòng)態(tài)檢測(cè)CAl25水平可以幫助臨床選擇和調(diào)整治療方案。CAl25是腺癌Ⅲ～Ⅳ期患者診斷和治療過(guò)程中的一項(xiàng)重要參考指標(biāo)，但作為肺癌的腫瘤學(xué)標(biāo)志物，都有一定的局限性，多指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)血清腫瘤學(xué)標(biāo)志物，可提高檢出率［5］，采用脂質(zhì)體均相免疫發(fā)光法測(cè)定肺癌患者血清 CAl25水平提高了陽(yáng)性檢測(cè)率，聯(lián)合其它標(biāo)志物檢測(cè)，有利于肺癌，特別是腺癌的診斷。

1 張麗華.NSE、CEA及CAl25聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的價(jià)值.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2006，14(2):160 ～161.

2 Li CG，Huang XE，Xu L，et al.Clinical Application of Serum Tumor Associated Material(TAM)from Non～small Cell Lung Cancer Patients.Asian Pac JCancer Prev，2012，13(1):301 ～304.

3 周國(guó)勝，段紅興.肺癌患者血清CAl25檢測(cè)分析.中國(guó)臨床實(shí)用醫(yī)學(xué)，2010，4(11):131 ～132.

4 Cedrés S，Nuez I，Longo M，et al.Serum tumor markers CEA，CYFRA21 ～1，and CA ～125 are associated with worse prognosis in advanced non～smalL － Cell lung cancer(NSCLC).Clin Lung Cancer，2011，12(3):172～179.

5 方明，趙本玉.聯(lián)合檢測(cè)血清CEA、CAl25、FERRI、NSE在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值.臨床肺科雜志，2010，15(9):1238～1239.