連錢草物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量研究進展※

薛 璟 陸海峰

連錢草物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量研究進展※

薛 璟 陸海峰

（江蘇省蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，蘇州215009）

連錢草作為傳統(tǒng)常用中藥，臨床療效顯著，但其所含成分繁多，本文以連錢草的物質(zhì)基礎(chǔ)為著眼點，對連錢草所含化學(xué)成分進行歸類梳理，并對其質(zhì)量研究做一綜述，提出建立質(zhì)量評價體系，應(yīng)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)規(guī)范化生產(chǎn)，提高連錢草藥材質(zhì)量的思路。

連錢草；物質(zhì)基礎(chǔ)；化學(xué)成分；質(zhì)量研究；規(guī)范化生產(chǎn)

連錢草為唇形科植物活血丹（Glechoma longituba Nakai）Kupr．的干燥地上部分［1］，又名遍地香、透骨風(fēng)、江蘇金錢草等［2］，收載于 《中國藥典》1977年版至今，具有利濕通淋、清熱解毒、散瘀消腫等功效，主治熱淋，石淋，濕熱黃疸，瘡癰腫痛，跌打損傷，是 “排石顆粒”的主要藥材。近年來，隨著對肝膽系統(tǒng)結(jié)石癥研究的不斷深入，連錢草以其療效顯著、毒副作用小等特點越來越受關(guān)注［3-4］，需求量日益增加。然而，由于生態(tài)環(huán)境破壞等原因，連錢草種植資源退化，產(chǎn)量下降。本文以連錢草的物質(zhì)基礎(chǔ)為著眼點，綜述其化學(xué)成分和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，提出建立質(zhì)量評價體系，應(yīng)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)規(guī)范化生產(chǎn)，提高連錢草品質(zhì)，為進一步開發(fā)研究連錢草奠定基礎(chǔ)。

1 連錢草的化學(xué)成分

連錢草化學(xué)成分繁多，主要有黃酮類、萜類、揮發(fā)油類、有機酸類、醇類、甾體類等。

1.1黃酮類連錢草含有多種黃酮及其苷類成分，包括芹菜素（apigenin）、木犀草素（luteolin）、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸乙酯苷（apigenin-7-O-β-D-glucuronide ethyl ester）、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸乙酯苷（luteolin-7-O-β-D-glucuronide ethyl ester）、大波斯菊苷（cosmosiin）、木犀草素-7-O-葡萄糖苷（luteolin-7-O-β-D-glucuroside）、山奈酚-3-O-蕓香糖苷（kaempferol-3-O-β-D-rutinoside）、蘆?。╮utin）、6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖-芹菜素（6-C-arabinose-8-C-glucose-apigenin）、6-C-葡萄糖-8-C-葡萄糖-芹菜素（6-C-glucose-8-C-glucose-apigenin）、刺槐素（acacetin）、蒙花苷（linarin）、海常素（clerodendrin）、槲皮素（queretin）、芫花素（genkwanin）、3，6-二甲氧基-6”，6”-二甲基苯并吡喃-（7，8，2”，3”）-黃酮（3，6-dimethoxy-6”，6”-dimethyl chromeno-（7，8，2”，3”）-flavone）［5-8］等。

1.2萜類連錢草中萜類化合物主要為三萜類和倍半萜類，包括有白樺脂醇（betulin）、白樺脂酸（betulinic acid）、2α，3α，24-二烯三羥基烏蘇-12-烯-28-酸（2α，3α，24-dien trihydroxyurs-12-en-28-oic acid）、熊果酸（ursolic acid）、20-羥基達瑪-24-烯酮（20-hydroxydammar-24-ketene）、3β-羥基-20，24-二烯-達瑪烷（3β-hydroxy-20，24-diene dammarane）、豆甾-4-烯-3，6，-二酮（stigmasta-4-ene-3，6-dione）、2α，3α-二羥基烏蘇-12-烯-28-酸（2α，3α-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid）、2α，3β-二羥基烏蘇-12-烯-28-酸（2α，3β-dihydroxyrus-12-en-28-oic acid）、齊墩果酸（oleanolic acid）、1，8-epoxy-7（11）-germacren-5-one-12，8-olide、1，10；4，5-diepoxy-7（11）-germacren-12，8-olide［6，8-10］等。

1.3揮發(fā)油類連錢草含有豐富的揮發(fā)油成分，主要有左旋松樟酮（pinocamphone）、左旋薄荷酮（menthone）、胡薄荷酮（pulegone）、α-蒎烯（α-pinene）、β-蒎烯（β-pinene）、檸檬烯（limonene）、1，8-桉葉素（1，8-cineole）、對-聚傘花素（p-cymene）、異薄荷酮（isomenthone）、異松樟酮（isopinocamphone）、芳樟醇（linalool）、薄荷醇（menthol）、α-松油醇（α-terpineol）、石竹烯（caryophyllene）、早熟素I（prococene I）、早熟素II（prococene II）、喇叭烯（viridiflorene）、β-蓽澄茄油烯（β-cubebene），反式斯巴醇（（-）spathulenol）、γ-欖香烯（γ-elemene）、β-欖香烯（β-elemene）和D-檸檬烯（D-limonene）［2，11］等。

1.4有機酸類有機酸類包括阿魏酸（ferulic acid）、咖啡酸（caffeic acid）、迷迭香酸（rosmanic acid）、間羥基苯甲酸（m-hyoxybenzoic acid）、可樂蘇酸（corosolic acid）、肉豆蔻酸（myristic acid）、月桂酸（lauric acid）、二十四烷酸（tetracosanoic acid）、丁二酸（succinic acid）、順丁烯二酸（maleic acid）、三十烷酸（triacontanoic acid）［8，12-13］等。

1.5其他類化合物連錢草中含有少量的醇類、甾體類及其他成分，包括6R，9R-3-氧代-α-紫羅蘭醇（6R，9R-3-oxo-α-ionol）、S（+）-去氫催吐蘿芙葉醇（S（+）-dehydrovom ifoliol）、催吐蘿芙葉醇（vom ifoliol）、正三十烷醇（triacontanol）、胡蘿卜苷（daucosterol）、木栓酮（friedelin）、β-谷甾（β-sitosterol）、大黃素甲醚（physcion）、大黃酚（chrysophanol）、原兒茶醛（protocatechualdehude）［6-7，12］等。

2 連錢草的質(zhì)量研究

連錢草分布廣泛，成分繁多，建立連錢草質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，制定藥材規(guī)范化種植生產(chǎn)，利用現(xiàn)代分析方法檢測、評價藥材質(zhì)量，控制有效或毒成分含量，是確保臨床用藥安全的必要手段。

2.1連錢草質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

2.1.1以單一成分為指標(biāo)張前軍等［14］采用氯仿超聲提取，以乙腈-0.15%磷酸水溶液為流動相，建立HPLC測定熊果酸的方法，消除了異構(gòu)體齊墩果酸的干擾，簡單快速，重復(fù)性好。田萍等［15］應(yīng)用甲醇超聲提取藥材，建立高效液相色譜法測定連錢草中迷迭香酸含量的方法，并對連錢草不同部位的含量進行考察，表明迷迭香酸在根部含量大于莖部。

2.1.2以多成分或組分為指標(biāo)楊曦亮等［16］以70%甲醇超聲提取連錢草藥材粉末，建立HPLC法測定其中齊墩果酸和熊果酸含量的方法，作為連錢草藥材質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。NI等［17］運用HPLC-PDA-及QTOF／MS等方法建立了連錢草酚類化合物中9個成分 （原兒茶醛、綠原酸、咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、木犀草苷、木犀草素、芹菜素及刺槐素）同時含量測定的方法，以多成分綜合評價有效的控制評價連錢草質(zhì)量，確保藥材的有效性與安全性。

2.1.3以指紋圖譜為指標(biāo)程偉等［18］采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳法建立連錢草的數(shù)據(jù)化指紋圖譜，確定16個共有指紋峰，結(jié)果表明連錢草藥材的主要化學(xué)成分種類和質(zhì)量分?jǐn)?shù)均因產(chǎn)地不同而有差異。所建方法具有較好的穩(wěn)定性、精密度和重現(xiàn)性，簡便快速，可作為連錢草藥材的質(zhì)量控制方法。朱玲英等［19］采用HPLC-PDA檢測器檢測技術(shù)對連錢草脫脂后用有機溶劑提取的連錢草藥材中綠原酸、木犀草素黃酮類成分建立HPLC指紋圖譜，確定18個峰構(gòu)成連錢草藥材的指紋特征，通過指紋圖譜可以比較全面地反映連錢草藥材的化學(xué)成分以及各特征性有效成分間峰面積的相對比例，進而反映連錢草藥材的內(nèi)在質(zhì)量，為連錢草藥材判斷真?zhèn)?、評價優(yōu)劣、考察穩(wěn)定性和一致性提供依據(jù)。

2.2連錢草質(zhì)量控制的研究連錢草化學(xué)成分豐富，不同生態(tài)環(huán)境，不同栽培技術(shù)，以及采收、加工等方法都會影響其質(zhì)量。目前連錢草質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究多集中對藥材成分的檢測評價，而藥材的生產(chǎn)是中藥藥品研制、生產(chǎn)、開發(fā)和應(yīng)用整個過程的源頭，只有首先抓住源頭，才能從根本上解決中藥的質(zhì)量問題。

2.2.1不同產(chǎn)地對連錢草質(zhì)量的影響連錢草資源豐富，除西北地區(qū)，全國各地均有分布［2］。王慶等［20］對江蘇與江蘇周邊地區(qū)的連錢草野生品與栽培品進行比較，對連錢草中熊果酸與齊墩果酸的含量分析結(jié)果表明，江蘇盱眙產(chǎn)者含量高于河南固始，其中熊果酸含量顯著高于齊墩果酸，同產(chǎn)地野生品含量高于栽培品；對不同產(chǎn)地、不同來源樣品中黃酮類成分分析表明，黃酮含量差別較大，同產(chǎn)地野生品與栽培品含量無明顯差異。楊曦亮等［21］對湖北不同產(chǎn)地連錢草的總黃酮成分進行比較，結(jié)果表明7種湖北不同地區(qū)的連錢草總黃酮含量差異較大。不同產(chǎn)地、不同來源的連錢草所含成分含量不同，因此應(yīng)建立多指標(biāo)分析藥材品質(zhì)，保證藥材質(zhì)量，指導(dǎo)其栽培生產(chǎn)。

2.2.2不同采收期對連錢草質(zhì)量的影響 連錢草全年皆可采收，藥典收載為春至秋季采收，也有文獻報道［2］4～5月采收全草。黃齊慧等［22］對不同采收期的連錢草進行質(zhì)量分析，結(jié)果表明7～8月連錢草中總黃酮含量最高，12月至次年4月，連錢草中總黃酮含量最低。

關(guān)于不同采收期對連錢草質(zhì)量的影響目前多集中于以總黃酮為指標(biāo)，而對其他成分的含量影響鮮有報道。

2.2.3不同種植方法對連錢草質(zhì)量的影響 連錢草作為一種藥用植物，不同栽培技術(shù)會影響藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量。張雁萍等［23］考察了不同基肥使用量對連錢草生長情況及品質(zhì)的影響，結(jié)果表明連錢草產(chǎn)量隨基肥用量的增加成增加趨勢，但增幅逐步下降，不同基肥用量對連錢草植株營養(yǎng)性狀影響不同，但差異不明顯。為滿足連錢草的匍匐生長及喜陰喜光習(xí)性，研究了不同密度間套對連錢草質(zhì)量、產(chǎn)量及收益的影響，為連錢草的科學(xué)種植提供依據(jù)和指導(dǎo)［24］。

目前，關(guān)于不同種植方法對連錢草質(zhì)量的影響研究還處于起步階段，對其中所含化學(xué)成分的含量影響報道較少。

3 小結(jié)與展望

近年來，泌尿系統(tǒng)結(jié)石和肝膽結(jié)石已成為臨床常見病，肝膽系統(tǒng)結(jié)石癥的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，連錢草作為我國治療結(jié)石癥的傳統(tǒng)中草藥，日益受到關(guān)注，如何利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)方法進行系統(tǒng)研究開發(fā)，確保臨床用藥安全有效，是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵。

連錢草的化學(xué)成分豐富，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，已有越來越多的化學(xué)成分從連錢草中提取分離出，對于連錢草物質(zhì)基礎(chǔ)的研究逐漸深入，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評價已從原有的一個單體或幾個單體為指標(biāo)性成分檢測，向中藥指紋圖譜技術(shù)發(fā)展。但是，連錢草的質(zhì)量研究還存在一定問題。

一方面，中藥成分復(fù)雜，藥效是多成分、多靶點、多途徑的綜合效應(yīng)，以什么指標(biāo)作為評價連錢草藥材質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)有待進一步研究。藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄 （ADME）是藥物的基本性質(zhì)，決定了藥物的安全性有效性［25］，中藥物質(zhì)基礎(chǔ)是由多成分構(gòu)成的，多種成分并不是簡單的堆積，而是一個有序的體系， “組分結(jié)構(gòu)理論”［26-27］將中藥的化學(xué)成分分為單一成分、組分、組分群3個層次，連錢草發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)應(yīng)是組分的組合 （組分群），這個組分群包括 “有效組分”和 “功能組分”，各組分形成一個有序的整體，且各組分之間具有一定的配伍配比關(guān)系。在連錢草質(zhì)量研究的過程中，借助ADME技術(shù)平臺確定連錢草發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，以 “組分結(jié)構(gòu)理論”為指導(dǎo)，建立完善的連錢草質(zhì)量評價體系。

另一方面，對于已建立的連錢草成分定量定性分析方法，目前研究多停留在對市場銷售的連錢草藥材、飲片或其制劑的質(zhì)量檢測，而利用建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制連錢草品質(zhì)、指導(dǎo)連錢草規(guī)范化生產(chǎn)的研究較少。優(yōu)質(zhì)的藥材不是靠檢測出來，而是靠生產(chǎn)出來的。藥材的不同種質(zhì)、不同生態(tài)環(huán)境、不同栽培技術(shù)以及采收、加工等方法都會影響藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量，必須從源頭上提高連錢草藥材質(zhì)量，從中間過程監(jiān)控質(zhì)量，才能從根本上解決質(zhì)量問題。

通過對連錢草物質(zhì)基礎(chǔ)的研究，提出 “以組分結(jié)構(gòu)理論”建立完善的中藥質(zhì)量評價體系、指導(dǎo)規(guī)范化生產(chǎn)、提高中藥質(zhì)量的研究思路，為中藥系統(tǒng)研究開發(fā)提供新的思路，繼承和發(fā)展中醫(yī)藥事業(yè)。

［1］國家藥典委員會．中國藥典（一部）［M］．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：158．

［2］國家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會．中華本草［M］．上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：6058．

［3］葛少祥，彭代銀，劉金奇，等．連錢草治療膽固醇結(jié)石的實驗研究［J］．中藥材，2007，30（7）：842-845．

［4］李建兵．連錢草泡服為主防治膽道結(jié)石術(shù)后復(fù)發(fā)［J］．江西中醫(yī)藥，2004，35（255）：21．

［5］楊念云，段金廒，李萍，等．連錢草中的黃酮類化學(xué)成分［J］．中國藥科大學(xué)學(xué)報，2005，36（3）：210-212．

［6］楊念云，段金廒，李萍，等．連錢草的化學(xué)成分［J］．中國天然藥物，2006，4（2）：98-100．

［7］YANG Nian-yun，DUAN Jin-ao，LI Ping，et al．Chemical constituents of Glechoma longituba［J］．Acta Pharmaceutica Sinica，2006，41（5）：431-434．

［8］ZHANG Qian-jun，YANG Xiao-sheng，ZHU Hai-yan，et al．Chemical constituents of Glechoma longituba［J］．Nat Prod Res Dev，2006，18：55-57．

［9］張前軍，楊小生，朱海燕，等．連錢草中三萜類化學(xué)成分［J］．中草藥，2006，37（12）：1780-1781．

［10］ZHANG Qian-jun，YANG Xiao-sheng，ZHU Hai-yan，et al．A Novel Sesquiterpenoid from Glechoma longituba［J］．Chinese Chemical Letters，2006，17（3）：355-357．

［11］周子曄，林觀樣，林迦勒，等．浙產(chǎn)連錢草揮發(fā)油化學(xué)成分的分析［J］．中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2011，28（8）：737-739．

［12］YU Zhi-bin，WU Xia，YE Yun-hua，et al．Chemical Constituents of Glechoma longituba［J］．Natural Product Research and Development，2008，20：262-264．

［13］ZHANG Qian-jun，YANG Xiao-sheng，ZHU Hai-yan，et al．Organic Acids of Glechoma longituba，2006，18（Suppl）：55-56．

［14］張前軍，趙超，楊小生，等．高效液相色譜法測定連錢草中熊果酸的含量［J］．中國中藥雜志，2006，31（18）：1533-1534．

［15］田萍，王道平，朱海燕，等．高效液相色譜法測定連錢草中的迷迭香酸的含量［J］．貴州大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2008，25（2）：160-171．

［16］楊曦亮，吳云霏．高效液相色譜法分析不同產(chǎn)地連錢草中三萜酸類成分［J］．醫(yī)藥導(dǎo)報，2009，28（4）：429-432．

［17］NI Shu-mao，QIAN Da-wei，DUAN Jin-ao，et al．Qualitative and quantitave analysis of the major bioactive phenolic compounds of Glechoma longituba by LC-Coupled with PADand ESI-MSdetection［J］．Natural Product Communications，2011，6（1）：17-20．

［18］程偉，梅潔，肖玉秀．連錢草藥材的高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜研究［J］．氨基酸和生物資源，2006，28（2）：7-11．

［19］朱玲英，錢大瑋，段金廒，等．江蘇連錢草高效液相色譜指紋圖譜研究［J］．時珍國醫(yī)國藥，2009，20（1）：113-115．

［20］王慶，段金廒，錢大瑋，等．不同產(chǎn)地連錢草中三萜酸類及黃酮類成分的分析與評價［J］．南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2006，22（1）：44-46．

［21］楊曦亮，肖玉秀．不同產(chǎn)地連錢草藥材中總黃酮成分含量測定［J］．亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5（1）：21-23．

［22］黃齊慧，陳小英．不同采收期對連錢草中總黃酮的影響［J］．國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報，2004，10（18）：160-161．

［23］張雁萍，楊志剛，陳顯國．不同基肥施用量對連錢草生長情況及品質(zhì)的影響［J］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（10）：5773-5774，5777．

［24］張雁萍，陳顯國，吳穎榮．不同密度間套對玉米和連錢草生長發(fā)育·產(chǎn)量及收益的影響［J］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（14）：7291-7293．

［25］薛璟，賈曉斌，譚曉斌，等．雷公藤的肝毒性研究及ADME／Tox評價思路［J］．中草藥，2009，40（4）：655-658．

［26］賈曉斌，陳彥，李霞，等．中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究新思路和方法［J］．中華中醫(yī)藥雜志，2008，23（5）：420-425．

［27］薛璟，賈曉斌，譚曉斌，等．雷公藤制劑中雷公藤紅素及雷公藤總?cè)频臏y定［J］．中華中醫(yī)藥雜志，2010，25（7）：1105-1108．

Re s ea r c h o n Ma t e rial Ba sis an d Qualit y o f Gle c h oma Lon git uba

Xue Jing Lu Haifeng
(Suzhou Health College,Jiangsu Prouince,Suzhou,215009,China)

Glechoma longituba；Material basis；Chemical constituents；Quality research；Standardized production

The clinical therapeutic effect of Glechoma longituba（Nakai）Kupr．a(chǎn)re significant．As a traditional Chinese medicine，it contains quite a lot of chemical constituents which are complicated．This article classifies and combs the components in Glechoma longituba，reviews recent research on its quality，and proposes to establish the equality evaluation system and apply it to guide the production to improve the equality．

楊 杰

2013-07-21）

江蘇省高等學(xué)校大學(xué)生實踐創(chuàng)新訓(xùn)練計劃項目；蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院2011年度院級立項課題［No：szwzy201116］

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.18.120

1672-2779（2013）-18-0163-03